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醫(yī)用分子遺傳學dna復制-資料下載頁

2025-01-08 06:22本頁面
  

【正文】 riA 識別起始位點 , ATP酶活性 ?priB 起始引發(fā) ?priC 起始引發(fā) ?DnaT 起始引發(fā) ?DnaB 起始引發(fā) ?DnaC 起始引發(fā) ,與 DnaB一起作用 ?DnaG RNA引物合成 2 大腸桿菌 ? DnaA 識別并 結合于 oriC區(qū) , 有 ATP酶活性 , 使AT富含區(qū) 解 鏈 , 促進 DnaB結合形成起始復合物 。 ? DnaB DNA螺旋酶 , 有解旋和解鏈作用 。 ? DnaC 運輸 DnaB, 形成起始復合物 。 ? DnaG DNA復制引發(fā)酶 , 合成引物 。 ? Hu 促進復制復合物的形成 。 ? 回旋酶 松弛正超螺旋 , 促進單鏈 DNA產生 。 ? 單鏈結合蛋白 促進 DNA解鏈 , 穩(wěn)定單鏈 DNA。 真核細胞( SV40) ? 真核細胞 ( SV40) 的 DNA復制至少需要 6個蛋白因子參與 。 ? T抗原 : N端為 DNA結合區(qū) , 識別起始位點 , C端具有螺旋 酶活性 , 在 RFA的協(xié)助下解開雙鏈 。 SV40 編碼 ? RFA:人單鏈結合蛋白 ? 拓補異構酶 I或 II:解開超螺旋 。 ? 復制因子 C( replication facter C, RFC) :形成起始復合物 ? DNA聚合酶 α 引物酶復合物:合成引物 , 起始 DNA合成 。 真核細胞( Yeast) ( 1) ORC( Origin Recognition Complex) 6個亞基組成 在真核生物中相當保守 特異識別 ARS ( Autonomously replicating sequence) ORC1p, ORC2p, ORC4p 與 A 元件結合, ORC5p與 B元件結合 結合過程需要 ATP ( 2) Cdc6/Cdc18 ( 3)微染色體支持蛋白( Minichromosome maintenance proteins, MCMp) 與 DNA發(fā)生周期性的作用,與復制叉運動有關。 ( 4) Cdc45 與 DNA復制起始位點相互作用。 (三)復制的起始--引發(fā)( Priming) 合成 RNA引物的過程 單鏈結合蛋白 SSB與 M13噬菌體單鏈 DNA結合,在發(fā)夾結構前 6 bp處, RNA聚合酶合成 20~30個堿基的 RNA. 破壞發(fā)夾結構; SSB結合;DNA聚合酶 III在 3’- OH延長 DNA鏈。 DNA聚合酶 I水解 RNA, 并 補平缺口,連接酶連接 。 M13噬菌體 priA,priB,priC識別起始點 在 DnaT幫助下DnaB,DnaC復合物結合形成前引發(fā)體 引發(fā)體 引發(fā)體可沿著DNA鏈移動,在合適的位點起始引物 RNA的合成 引發(fā)體的裝配只能在起始點,引物合成可在多處。 引發(fā)體移動的方向與 DNA鏈延長的方向相反。 類似岡崎片段的合成 ФX174DNA PAS:primosome assembly site 大腸桿菌 Hu因子促進復合物形成 DnaA結合 OriC 富含 AT區(qū)解鏈 2DnaBDnaC復合物 DnaB解鏈 4 SV40 T抗原識別起始點和解鏈 RFA結合到單鏈 DNA 拓撲異構酶參與下形成前引發(fā)體 DNApol ?引物酶結合形成引發(fā)體 SV40 DNA復制的起始
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