酶工程基本原理ppt課件-資料下載頁
2025-01-08 05:29本頁面
【正文】 學(xué)方程： 非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制圖示 交于 x軸 ★ Km不變， Vmax降至 Vmax/（ 1+[I]/Ki） 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制小結(jié)： （ 1） Km不變， Vmax降至 Vmax/（ 1+[I]/Ki） （ 2）抑制程度決定于 [I]和 Ki ， 與底物的 Km和 [S]無關(guān)： 抑制程度與 [I]成正比 在一定 [I] 下， Ki越大，抑制作用越小 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制 ])[][1(][m a xSKIKSVVim ???相對(duì)活力： 抑制分?jǐn)?shù)： 動(dòng)力學(xué)方程： ][][][][SKISKSKaimm????][][][][][1SISKKKSIaiiim ???????★抑制程度決定于 Km、 Ki、 [S]、 [I] ★ Km及 Vmax都變小 一組平行直線 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制小結(jié)： （ 1） Km及 Vmax都變小 (2)抑制程度決定于 Km、 Ki、 [S]、 [I] 抑制程度既與 [I]成正比 ， 又與 [S]成正比 在一定的 [S]、 [I]下 ， Ki越大 ， 抑制程度越小； Km越大 ， 抑制程度越小 。 表小結(jié)： 三種可逆抑制作用的酶促反應(yīng)速度 V與 Km值 一般每一種酶有兩個(gè)名稱： 一個(gè)是它的習(xí)慣名稱， 其習(xí)慣名一般是根據(jù)它的催化底物來命名的。淀粉酶 (Diastase)， 蛋白 (Protiase)， 果膠酶 (Pectinase)等。 另一個(gè)是其系統(tǒng)名稱， 國(guó)際生物化學(xué)協(xié)會(huì) (International Union of Biochemistry)酶學(xué)委員會(huì) (Enzyme Commission)。 于 1961年該委員會(huì)正式提出了酶的系統(tǒng)命名方案。 ⑴ 將底物和催化的反應(yīng)同時(shí)考慮，進(jìn)行命名，如： α1 ， 4葡萄糖水解酶； ⑵ 對(duì)于雙底物的將兩底物用冒號(hào)分開：如： ATP:己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶； ⑶ 對(duì)可逆反應(yīng)的，一般正反應(yīng)和負(fù)反應(yīng)用同一個(gè)名稱，主要考慮催化的主要方向，或根據(jù)首先證明的催化反應(yīng)來確定。如乳酸脫氫酶。 CH 酶的分類和命名 1 酶的命名原則 CH 酶的分類和命名 2 酶的分類原則 ? 1984年出臺(tái)了一套目前為普遍接受的酶分類體系；根據(jù)酶催化反應(yīng)的類型將酶分成６大類，即： ? 氧化還原酶 ..........................................（ 1） ? 轉(zhuǎn)移酶 ..................................................（ 2） ? 水解酶 ..................................................（ 3） ? 裂合酶 ..................................................（ 4） ? 異構(gòu)酶 ..................................................（ 5） ? 合成酶 ..................................................（ 6） ? 酶的分類編號(hào)原則是采用四碼編號(hào)方法，第一碼代表６大類中的哪一類，第二碼代表大類中的亞類，第三碼表示亞類中的小類，第四碼表示小類中不同酶的排序號(hào)；四位號(hào)碼之間用圓點(diǎn)（．）分開。 例如：水解酶類 是作用于酯鍵的亞類 . . . 作用于糖基化合物 水解糖苷鍵 作用于醚鍵 作用于肽鍵 CH 酶活力概念及活力測(cè)定 1. 酶活力概念 ? 酶活力是指在一定條件下，酶所催化的反應(yīng)述度。酶的活力越大，反應(yīng)述度越高。我們知道，酶催化反應(yīng)述度，用單位時(shí)間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的增加量表示： ? ds dp ? v= ——— = ——— ? dt dt ? 酶學(xué)委員會(huì) (E． C． )對(duì)酶活力單位作了統(tǒng)一規(guī)定，酶活力單位定義為： 在特定條件下（酶的最適反應(yīng)條件），每１ min 催化 1μmol底物轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物（或產(chǎn)生1μmol產(chǎn)物）的酶量即為一個(gè)酶活力單位（ U）； 這個(gè)單位又稱為國(guó)際單位（ＩＵ）。 近些年來，提出了一個(gè)更大的酶活力單位，即‘ Katal’， 一個(gè)‘ Katal’單位是在一秒鐘內(nèi)，轉(zhuǎn)化一摩爾底物的酶量。 １ Katal= 6 107U 酶的活力單位和質(zhì)量單位雖然都是酶量多少的標(biāo)志，兩者之間無法彼此對(duì)應(yīng)，為此，人們引用了酶比活力這個(gè)概念。即每 mg酶制劑所含的酶活力。 酶比活力＝酶活力（Ｕ）／ mg酶制劑 酶的轉(zhuǎn)換數(shù)： 轉(zhuǎn)換數(shù)是衡量酶催化效率的另一個(gè)指標(biāo)，有兩種表達(dá)方式： 其一是：分子活性：即在最適條件下，沒摩爾酶每分鐘所轉(zhuǎn)化的底物摩爾數(shù)； 其二是：對(duì)于具有 4級(jí)結(jié)構(gòu)的寡聚酶蛋白，用在最適條件下，每摩爾活性亞基或活性中心所轉(zhuǎn)化的底物摩爾數(shù)。 Vmax μ mol. min1. ml1 Kcat ＝ = ＝ min1 [E] μ mol. ml1 酶的催化周期：即每摩爾酶蛋白催化轉(zhuǎn)化每摩爾底物所需要的時(shí)間 催化周期＝ 1/ Kcat CH 酶活力概念及活力測(cè)定 2. 酶活力測(cè)定原則 ? 酶活力的測(cè)定方法多種多樣，總的要求是快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確。 ? 無論用什么方法，都包括以下幾個(gè)要點(diǎn) ? ① 提供最適底物：由于酶的底物專一性，測(cè)定酶活力時(shí)，提供的底物必須是最適底物，當(dāng)同時(shí)有幾種底物時(shí)，以 Km值最小的為最適底物。 ? ② 測(cè)定時(shí)酶量適當(dāng)。 酶量太?。? ? 酶量太大： ? ③ 確定反應(yīng)時(shí)間適宜。太 長(zhǎng)： ? 太 短： ? ④ 反應(yīng)條件應(yīng)是最適反應(yīng)條件，主要包括反應(yīng)溫度、pH值和基質(zhì)的離子環(huán)境。
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