【正文】 接性、廣譜性 抗病毒機(jī)理： 不 直接作用于病毒， 而 作用于宿主細(xì)胞基 因， 合成 抗病毒蛋白 ，抑制病毒蛋白合成。 —— 蛋白激酶、 2`5`腺嘌呤核苷合成酶、 磷酸二脂酶 早期 中斷病毒復(fù)制，阻止病毒擴(kuò)散 二、特異性免疫 按種類： IgG（ 過胎盤） IgM（ 大） IgA（ 泌粘 ） TD、 TC 、 NK、 M 中和抗體： 定義、機(jī)理和免疫球蛋白的類型 細(xì)胞免疫 ： 體液免疫： 起 預(yù)防 而非治療作用、對(duì) 細(xì)胞內(nèi)病毒無效 按功能： 中和抗體、 補(bǔ)體結(jié)合抗體 、 血凝抑制抗 體 抗病毒免疫的主要成分 抗體 時(shí) 相 中和作用 殺傷機(jī)理 通過胎盤 IgM 出現(xiàn)早 ,消失快 較強(qiáng) CDC 不能 IgG 出現(xiàn)遲 ,消失慢 強(qiáng) ADCC 能 SIgA 存在粘膜中 局部中和 不能 抗病毒免疫的持續(xù)時(shí)間 ? 因病毒的種類而異 – 有病毒血癥 的 全身性病毒感染 ：痊愈后獲得牢固的免疫力，且持時(shí)較長(zhǎng)；天花 V – 只有 單一血清型 的病毒感染：病后有牢固的免疫力，持時(shí)長(zhǎng)；乙型腦炎 V – 易發(fā)生抗原變異 的病毒感染：病后機(jī)僅產(chǎn)生短暫的免疫力；流感 V 病毒感染的檢測(cè)與防治 病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷方法 一、病毒感染的檢查方法 （ 一 ） 標(biāo)本 的采集與送檢 —— 檢查成敗的關(guān)鍵 1. 標(biāo)本 采集 : 發(fā)病初期或急性期；部位 。 2. 標(biāo)本 處理 : 無菌操作，抗生素＋ 50％甘油 鹽水，低溫保存； 3. 冷藏 送檢 : 1～ 2小時(shí)送檢 。70℃ 保存 。 4. 血清學(xué)檢查應(yīng)采 雙份標(biāo)本 。 常見分離病毒標(biāo)本的選擇 病毒 咽拭子 糞便 血液 腦脊液 唾液 組織 柯薩奇 A和 B組 + + + 心 單純皰疹病毒 + 腦膜 腮腺炎病毒 + + + 流感病毒 + 輪狀病毒 + HAV + HIV + 精液 （二）病毒的分離培養(yǎng)與鑒定 ● 分離培養(yǎng) 動(dòng)物 接種 : 最原始 , 易感動(dòng)物的選擇； 雞胚 接種 : 多種病毒敏感，取材方便 細(xì)胞 培養(yǎng) : 最主要 。 包括器官培養(yǎng)、移植培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)（原代 和次代細(xì)胞，二倍體細(xì)胞株和傳代細(xì)胞系） 常用于病毒分離的細(xì)胞 細(xì)胞種類 可分離的病毒 原代細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞 人單核細(xì)胞 人胚腎、肺細(xì)胞 恒河猴獼猴腎細(xì)胞 HSV、 RSV、 VZV、 腮腺炎病毒、風(fēng)疹病毒 HIV、 HTLV、 HHV6 腮腺炎病毒、腺病毒 ECHO、 脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇 A、 B組、 RSV 二倍體細(xì)胞株 人胚肺成纖維細(xì)胞株 WI3 MRC— 5 CMV、 VZV、 鼻病毒 腮腺炎病毒、腺病毒 傳代細(xì)胞系 Hela Hep2 Vero 柯薩奇 A、 B組、 RSV 腺病毒、 RSV HSV、 RSV、 風(fēng)疹病毒 、輪狀病毒、麻疹病毒 ● 病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的檢查與鑒定 增殖指標(biāo) : 細(xì)胞變化 。紅細(xì)胞吸附 。細(xì)胞代謝改變；干擾現(xiàn)象；免疫熒光法檢測(cè) 病毒數(shù)量與感染性的測(cè)定： 蝕斑測(cè)定 （ CPE） TCI D50的測(cè)定 （三）病毒感染的快速診斷 ●形態(tài)學(xué)檢查 光鏡檢查 電鏡檢查：直接檢查；免疫電鏡檢查 ●檢測(cè)病毒抗原 免疫學(xué)檢測(cè)：免疫熒光， ELISA， RIA ELISA for HIV antibody Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity ●病毒核酸檢測(cè)技術(shù) PCR 斑點(diǎn) 分子雜交 ( dotblot ) Southern印跡 ( DNA ), Northern印跡 ( RNA,mRNA ), 原位 分子雜交 , 微板 核酸雜交 ( chip ) 基因芯片（ microarray chip） 理想標(biāo)記物應(yīng)具備的條件 1． 敏感性 高 2. 容 易 標(biāo)記 3. 標(biāo)記后 不影響 序列 特異性 和 雜交溫度 4． 雜交信號(hào) 檢測(cè) 方便 5. 標(biāo)記物 穩(wěn)定 易 保存 ，對(duì)環(huán)境 污染 小 檢測(cè)結(jié)果判定 感染病毒的 臨床意義 必須結(jié)合流行 病學(xué)資料、臨床表現(xiàn)、病毒種類及機(jī)體的 病理變化 作綜合分析 ，才能判定?。? 二、病毒感染的防治原則 對(duì)病毒性疾病預(yù)防的 三大措施 ： 控制 傳染源 、 切斷 傳播途徑 、 保護(hù) 易感人群 。 —— 用 疫苗 作人工主動(dòng)免疫 ， 對(duì)于預(yù)防病毒 感染 有重要意義 。 ? 免疫預(yù)防 ? 藥物防治 針對(duì)性防治 （一）免疫預(yù)防 ●人工主動(dòng)免疫 滅活疫苗 : 核酸滅活 , 抗原性存在 。 減毒活疫苗 :自然或人工篩選低毒 的變異株 。 —— 潛在風(fēng)險(xiǎn) 有： 回復(fù)毒力、并發(fā)癥、活化潛伏病毒、 引起持續(xù)感染 亞單位疫苗 :純化包膜或衣殼上蛋白亞單位 。 多肽疫苗 : 如提取 HBV HBsAg的多肽成分 。 基因工程制備 HBsAg。 ● 人工被動(dòng)免疫 免疫血清 , 胎球 , 丙球 , TF等。 理想病毒疫苗的要求 有效 ： 安全 ： 死 疫苗：防止外源性污染病毒混入其中 。 滅活 病毒：必須徹底 。 活 疫苗：毒株必須是弱毒株 。 價(jià)廉 ：低價(jià)、方便。 現(xiàn)代疫苗學(xué)發(fā)展策略 ① 將病原微生物基因克隆到合適的載體 ， 再導(dǎo)入適宜的表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)中和性免疫原遺傳信息； ② 選擇缺失基因的減毒病原體載體 ， 插入一些外源基因 ， 當(dāng)這些活載體疫苗進(jìn)行流產(chǎn)性復(fù)制時(shí) ， 表達(dá)出的抗原暴露于宿主免疫系統(tǒng)； ③ 預(yù)防多種疾病 、 接種次數(shù)少的多價(jià)聯(lián)合疫苗； ④ 利用質(zhì)粒 DNA誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的核酸疫苗； ⑤ 疫苗的免疫增強(qiáng)物及對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)； ⑥ 特定免疫原或免疫調(diào)節(jié)提呈的新型微載體系統(tǒng) 。 （二） 藥物防治 金剛烷胺 , 阿糖腺苷 , 無環(huán)鳥苷 , 羥丙氧甲基鳥嘌呤 疊氮脫氧胸苷 (AZT), 干擾素 干擾素誘生劑 , 中草藥 抗病毒藥物類型 ? 化學(xué)藥物 ? 基因制劑 ? 天然藥物 抗病毒化學(xué)藥物的作用機(jī)制 ? 阻斷 病毒 脫殼 ? 阻斷 病毒 核酸合成 – 核苷類似物（ nucleoside analogue）、 核苷酸類似物（ nucleotide analogue） 和非核苷類似物 – 主要應(yīng)用于皰疹病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒 ? 阻斷 病毒 蛋白質(zhì)合成 ? 阻斷 病毒 釋放 抗病毒化學(xué)藥物作用的靶位點(diǎn) 作用靶點(diǎn) 藥物 ?復(fù)制早期 ?由病毒 DNA或 RNA聚合酶介導(dǎo)的核酸合成 ?病毒前體蛋白切割 ?病毒 mRNA翻譯蛋白 ?病毒釋放 ?金剛烷胺 甲基金剛烷胺 ?無環(huán)鳥苷 丙氧鳥苷 脫氧鳥苷 penciclovir famciclovir cidofovir 阿糖腺苷 idoxuridine 3氟胸腺嘧啶 甲酸磷霉素 AZT ddI ddC d4T 3TC nevirapine 病毒唑 拉米夫啶 ?賽科納瓦 英迪納瓦 瑞托納瓦 耐菲納瓦 ?干擾素 fomiversin ?Zanamivir oseltamivir 阻斷病毒核酸合成的藥物 ? 核苷 類似物（ nucleoside analogue） ? 核苷酸 類似物（ nucleotide analogue） ? 非核苷 類似物 ? 主要應(yīng)用 于 皰疹病毒 、 逆轉(zhuǎn)錄病毒 阻斷病毒核酸合成的藥物 靶病毒 分子結(jié)構(gòu) 藥 物 皰疹病毒 逆轉(zhuǎn)錄病毒 其他病毒 核苷類似物 非核苷類似物 核苷類似物 核苷酸類似物 非核苷類似物 核苷類似物物 無環(huán)鳥苷 丙氧鳥苷 cidofovir 阿糖腺苷 碘苷 三氟胸苷 甲酸磷霉素 AZT ddI ddC d4T 3TC Adefovir Nevirapine delavirdine efavirenz 病毒唑