【正文】 nfection） ? 干擾現(xiàn)象（ Interference） ? 缺陷病毒 （ defective virus ）： 病毒遺傳變異的突變或基因工程操作，使 病毒基因 不完整 或 基因位點(diǎn) 改變 ，影響了病毒復(fù)制或成熟的一個(gè)或幾個(gè)基因功能，不能復(fù)制出完整的具有感染性的病毒顆粒。消 除細(xì)胞表面受體阻止病毒與受體接觸，或特異抗體 穿入（ Peration） ? 吞飲 （ pinocytotic vacuole） – 無包膜病毒 被宿主細(xì)胞吞噬，進(jìn)入胞內(nèi) ? 融合 （ fusion) – 有包膜病毒 的包膜與宿主細(xì)胞膜直接融合，病毒核衣殼進(jìn)入細(xì)胞 ? 直接穿入 脫殼 : 在 溶酶體酶 作用下脫殼 , 釋放基因組核酸。 eg. 犬類不感染麻疹 , 而人不感染犬瘟病毒 * 一種細(xì)胞上 不可能 具有全部病毒受體，只有細(xì)胞表面存 在該病毒受體時(shí)，才能發(fā)生感染。 ② 受體結(jié)合 :病毒表面接觸蛋白 +易感細(xì)胞 受體 特異 , 不可逆 。 病毒的增殖 ? 活細(xì)胞 –敏感細(xì)胞 ? 復(fù)制 ( replication)： – 以病毒基因?yàn)槟０?, 藉 DNA多聚酶或 RNA多聚酶及其它因素的作用 , 指令細(xì)胞停止合成細(xì)胞的蛋白質(zhì)與核酸 ， 轉(zhuǎn)為復(fù)制病毒的基因組 ， 轉(zhuǎn)錄 、 轉(zhuǎn)譯出相應(yīng)的病毒蛋白 ， 最終釋放出子代病毒 。 病毒粒子的觀察方法 ? 電子顯微鏡 （ Electron microscopy） – Resolution problem: EM resolution is 5nm an atom is about nm diameter, an alpha helix motif is 1nM diameter,DNA is2nm in diameter. ? X線晶體衍射 （ X ray crystallography） ? 超過濾法 ? 超速離心法 X ray crystallography 三、病毒的培養(yǎng)與增殖 Culture and Replication of Viruses 病 毒 的 培 養(yǎng) 方 式 ? 動(dòng)物 （ Animals） ? 雞胚 （ Embryonated eggs） ? 組織培養(yǎng) （ Organ and tissue culture） Organ culture 胚胎 Embryo culture Cell culture : 原代細(xì)胞 傳代細(xì)胞 雙倍體細(xì)胞 常用的培養(yǎng)細(xì)胞 類型 名稱原代細(xì)胞培養(yǎng) 恒河猴腎細(xì)胞培養(yǎng)，人胚腎、肺等細(xì)胞培養(yǎng)，雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞株 WI38 （人胚肺細(xì)胞株）， HL 8 （恒河猴胚細(xì)胞株）傳代細(xì)胞系 Hela 細(xì)胞， Detroi t 細(xì)胞 （胸骨髓細(xì)胞系），Chang C/I/L/K （人結(jié)膜 C ，腸 I ，肝 L 與腎K 細(xì)胞系）， V ero （綠猴腎細(xì)胞系）， BHK 21（幼地鼠腎細(xì)胞系）? 細(xì)胞病變 (Cytopathic effect, CPE) ? 包涵體 （ Inclusion Bodies） 病毒在培養(yǎng)細(xì)胞的 細(xì)胞效應(yīng) 正常 BHK21 CPE // BHK21 狂犬病毒包涵體 —— 內(nèi)基小體 （ Negri body） 巨細(xì)胞病毒包涵體 病毒數(shù)量和感染性 測(cè)定 蝕斑試驗(yàn) ID50 或 TCID50 病毒感染雞胚、動(dòng)物或細(xì)胞后，引起 50% 發(fā)生死亡或病變的 最小量 。 ? 功能 – 保護(hù) 病毒核酸， 免受核酸酶的破壞 – 參與 病毒感染細(xì)胞的 過程 ? 病毒表面蛋白 +宿主細(xì)胞膜受體 – 具有 抗原性 核殼粒 的排列方式 ? 螺旋 對(duì)稱型（ helical symmetry） ? 20面體 立體對(duì)稱型（ icosahedral symmetry） ? 復(fù)合 對(duì)稱型（ plex symmetry） 五鄰體 六鄰體 六鄰體 五鄰體 纖突 頂球 RNA /DNA 殼粒 病毒包膜（ viral envelope） ? 是包繞在病毒核衣殼外面的 脂質(zhì)雙層膜 ? 主要成分是 蛋白質(zhì) 、 多糖 及 脂類 ， 常以 糖蛋白 或 脂蛋白 形式存在 ? 蛋白質(zhì) 是由 病毒基因 編碼，多糖、脂類 來自 宿主細(xì)胞 膜 、核 膜 或空泡 膜 包膜特性與功能 ? 有 包膜的病毒以“ 出芽 ”（ budding） 方式釋放時(shí)獲得 ? 包膜 子粒 （ peplomere） 或 刺突 （ spike） 賦予 病毒特殊功能，如血凝素（ HA） 和神經(jīng)氨酸酶（ NA） ? 包膜病毒 對(duì) 脂溶劑 （如乙醚、氯仿） 敏感 ， 能被消除包膜而失活（ ？？ ） —— 鑒定 ；它還與病毒的 入侵途徑 相關(guān) （ 有 －呼吸道； 無 －抗膽汁，腸道 ） 。 ? 編碼 病毒結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白 – 大 型病毒的核酸分子量相對(duì)大， 能 編碼病毒的全部結(jié)構(gòu)蛋白和病毒復(fù)制所需的許多 酶 – 小 病毒的核酸分子小， 可能不 編碼這些酶，因此復(fù)制時(shí)要宿主細(xì)胞提供 病毒核酸的特性 ? 具有 感染性 – 將 提純的病毒核酸 （如腸道病毒 RNA） 如 轉(zhuǎn)至活細(xì)胞內(nèi) ，即可 啟動(dòng) 病毒復(fù)制而感染細(xì)胞，并從可感染細(xì)胞中 獲得 子代完整病毒顆粒。 分節(jié)段 RNA 177。 ? 測(cè)量單位 為 納米 （ nm,為 1/1000?m） 50 nm 小型病毒 50 nm 150 nm 中等大小病毒（大多數(shù)） 150nm 大型病毒（最大 300 nm） ? 多數(shù)病毒 呈 球形或近似球形，桿狀，絲狀，少數(shù)可為子彈狀、磚塊狀，噬菌體可呈蝌蚪狀。 ? 病毒的重要性 1 多 70% 急性傳染 2 高 發(fā)病率高 死亡率高 一生 200次 3 新 不斷出現(xiàn)新的疾病 老年性癡呆與朊病毒 瘋牛病 4 致 畸 5 轉(zhuǎn) 化 腫瘤 HPV HSV— 子宮頸癌 HBV— 肝 EBV— 鼻咽癌 6 無 藥 無特效治療藥物 主要內(nèi)容 ? 病毒的基本性狀 ? 病毒的感染與免疫 ? 病毒感染的檢測(cè)與防治 病毒的基本性狀 ? 病毒的大小與形態(tài) ? 病毒的結(jié)構(gòu)（ 核酸 與 蛋白質(zhì) ） ? 病毒的培養(yǎng)與增殖 ? 病毒的遺傳與變異 ? 病毒的分類 特性 病毒 細(xì)菌 真菌 濾菌器 + 177。病毒體內(nèi) 缺乏 產(chǎn)生能量的 酶 系統(tǒng) , 只 能 寄生 在 活 細(xì)胞內(nèi) , 依靠宿主細(xì)胞提供原料和酶系統(tǒng) , 以 復(fù)制方式 進(jìn)行增殖。醫(yī)學(xué)微生物學(xué) Medical Microbiology 病原學(xué)教研室： 王 玉 Tel: 622 2493。 Email: 病 毒 學(xué) 總 論 思 考 題 ? 什么是病毒？ ? 病毒區(qū)于細(xì)菌、真菌的特征是什么？ ? 感染病毒的分離增殖方式有哪幾種？ ? 病毒感染的檢測(cè)方法有哪幾種？ ? 病毒感染的防治措施是什么？ 病毒與病毒學(xué) 病毒（ Virus） 是一種體積小， 非 細(xì)胞形態(tài)的微生物 , 其基因組 只 含有 一種 類型的核酸 (DNA或 RNA)。 病毒學(xué)（ Virology） 就是研究 病毒的 本質(zhì) 、 病毒與宿主 相互作用 和 規(guī)律 的一門生命科學(xué)。 — 結(jié) 構(gòu) 非細(xì)胞 原核細(xì)胞 真核細(xì)胞 細(xì)胞壁 — + + 核酸類型 DNA或 RNA DNA＋ RNA DNA＋ RNA 人工培養(yǎng) — + + 增殖方式 復(fù)制 二分裂 有性或無性 抗生素 — + + 干擾素 + — — 一、病毒的大小與形態(tài) 病毒粒子（ virion） ? 完整 的 成熟 病毒顆粒，具有 典型 的形態(tài)結(jié)構(gòu)，并具有 感染性 。 微生物的大小比較 葡萄球菌 (1000nm） 牛痘病毒 300 250nm A B C D E F G 立克次體 450nm 衣原體 390nm A、 大腸桿菌噬菌體 ( 65 95nm ) B、 腺病毒 (70nm ) C、 脊髓灰質(zhì)炎病毒 (30nm ) D、 乙腦病毒 ( 40nm ) E、 蛋白分子 (10nm ) F、 流感病毒 ( 100nm ) G、 煙草花葉病毒 Calici Virus HIV Rhinovirus VSV: Vesicular stomatitis virus Bacteriophage T4 Ebola Virus 二、病毒的結(jié)構(gòu) ? 基本結(jié)構(gòu) – 核心 Viral core – 衣殼 Capsid ? 輔助結(jié)構(gòu) – 包膜 Envelope – 其他 ? 病毒體 Virion – 核衣殼 Nucleocapsid 病毒體結(jié)構(gòu)模式圖 殼粒 衣殼 核心（核樣物） 核衣殼 包膜 包膜病毒