牙周病分子生物學ppt課件-資料下載頁
2025-01-05 13:19本頁面
【正文】 GTTCCATTGC3’ Prt C 5’ACAATCCACGAGACCATC3’ 584bp 5’TTCAGCCACACCGAGACG3’ 16Sr DNA 5’AGGCAGCTTGCCATACTGCG3’ 404bp 5’ACTGTTAGCAACTACCGATGT3’ 續(xù)表 細菌 靶基因 序列 長度 Pg 16Sr RNA 5’GCGTATGCAACTTGCCTTAC3’ 518bp 5’GTTTCAACGGCAGGCTGAAC3’ Fn 5047 5’CAAATGCTTGTGTCAATAATACT3’ 5’TTTAGAAGAAATGGTAGAATAAT3’ 50590 5’ATTGTGGCTAAAATTASTAGTT3’ 1Kb 5’ACCCTCACTTTGAGGATTATAG3’ Pi 18Sr RNA 5’CCTAATACCCGATGTCCACA3’ 855bp 5’AAGGAGTCAACATCTCTGTATCC3’ Td TdpA 5’AAGGCGGTAGAGCCGCTCA3’ 311bp 5’AGCCGCTGTCGAAAAGCCA3’ PCR擴增 16SrRNA 基因－病原菌檢測遺傳學分類 rRNA是細胞中最多的一種 RHA， 很多分子組成核蛋白體 (核糖體 )， rRNA分子大小一般用超速離心的沉降系數(shù) S表示， S越大，分子也越大。 ? 16SrRNA基因：細菌染色體上編碼rRNA相對應的 DNA序列 ? 保守區(qū)－穩(wěn)定性（細菌共有，稱“分子化石”） ? 可變區(qū)－特異性（保守區(qū)間有 V1－ V10可變區(qū)，含種屬差異信息，如出現(xiàn) 3個堿基以上差異，便可判定不同屬） ? 多拷貝－敏感性（約 1500個核苷酸，每細菌含 5－ 10個拷貝） ? 16SrRNA編碼基因 ? 保守區(qū)的引物：對所有細菌均適宜的引物 ? 可變區(qū)的引物： PCR擴增，凝膠電泳可鑒別細菌種屬 ? 間隔區(qū)的引物： 16SrRNA和 23SrRNA編碼基因間存在 ，不同種屬間隔區(qū)長度的序列有特異性，可鑒別細菌種屬 優(yōu)點 ? 靈敏度高、特異性強、提高檢測質量 ? 不依賴培養(yǎng)，可直接從標本檢測 ? 可鑒別營養(yǎng)要求復雜，生長緩慢微生物，特別目前不能體外培養(yǎng)繁殖的細菌 ? 能克服表型變異影響：形態(tài)變化、死菌、混雜菌 ? 能鑒定菌種、毒種及亞種（提供不同病原體 DNA分子“指紋”圖，未解釋病因學、流行病學 ? 可檢測細菌對抗生素的耐藥現(xiàn)象 缺點 ? 技術過于苛求，需一定條件和設備 ? 大部分探針需進口，化費較大 應用 ? 牙周細菌分類、分型、快速檢測 ? 評估細菌毒力因子作用 ? 檢測細菌基因異常及異常表達 ? 臨床檢測、流行規(guī)律 小 結 ? 牙周病分子生物學是研究牙周病原體的蛋白和核酸 (DNA, RNA)分子結構，用分子生物學方法追蹤病原體傳播途徑，發(fā)現(xiàn)病原體變異；從宿主基因水平或分子水平闡明牙周病的發(fā)病機制和流行規(guī)律，將宏觀的牙周病發(fā)生發(fā)展規(guī)律與微觀的宿主或病原體基因特征聯(lián)系起來，逐步建立牙周病臨床的分子診斷、分子指征、分子預后乃至基因治療。 ? 細菌分類已從表型特性鑒定深化為基因特征分類，從形態(tài)、生化提高到基因、分子水平。快速、經(jīng)濟、簡便的核酸雜交法給牙周病的病因研究和臨床檢測帶來很大便利。
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