【正文】 和物理圖譜基礎(chǔ)上，精細(xì)分析各克隆的物理圖譜，將其切割成易于操作的小片段，構(gòu)建 YAC或 BAC文庫(kù)，得到 DNA測(cè)序模板，測(cè)序得到各片段的堿基序列，再根據(jù)重疊的核苷酸順序?qū)⒁褱y(cè)定序列依次排列，獲得人類(lèi)全基因組的序列圖譜。 人類(lèi)基因組計(jì)劃的最終目標(biāo)是獲取人類(lèi)基因組的完整 DNA序列。 隨著遺傳圖譜和物理圖譜的完成，測(cè)序就成為重中之重的工作。 DNA序列分析技術(shù)是一個(gè)包括制備 DNA片段化及堿基分析、 DNA信息翻譯的多階段的過(guò)程。通過(guò)測(cè)序得到基因組的序列圖譜 。 ?序列圖譜 （ sequence map ） 重中之重 ?大規(guī)模測(cè)序基本策略 ? 逐個(gè)克隆法 ：對(duì)連續(xù)克隆系中排定的 BAC克隆逐個(gè)進(jìn)行亞克隆測(cè)序并進(jìn)行組裝 （ 公共領(lǐng)域測(cè)序計(jì)劃 ） ? 全基因組鳥(niǎo)槍法： 在一定作圖信息基礎(chǔ)上 ， 繞過(guò)大片段連續(xù)克隆系的構(gòu)建而直接將基因組分解成小片段隨機(jī)測(cè)序 ， 利用超級(jí)計(jì)算機(jī)進(jìn)行組裝 （ 美國(guó) Celera公司 ） HGP對(duì)醫(yī)學(xué)的影響： ? 發(fā)現(xiàn)新的致病基因。 ? 發(fā)展一些復(fù)雜疾病的早期基因診斷方法，如“腫瘤基因組解剖計(jì)劃”。 ? 通過(guò)基因治療解決傳統(tǒng)方法無(wú)法解決的疑難雜癥。 ? 疾病易感基因的識(shí)別及對(duì)風(fēng)險(xiǎn)人群進(jìn)行生活方式、環(huán)境因子的干預(yù)。 ? 人類(lèi)基因組多樣性與個(gè)體化醫(yī)學(xué)。 HGP對(duì)人類(lèi)的重要意義 所有的疾病，都可以說(shuō)是基因病 “基因病”概念 ： – 基因相關(guān)論：所有疾病都與人類(lèi)基因有關(guān)。 – 基因修飾論：所有藥物都是通過(guò)修飾基因本身 結(jié)構(gòu)、改變基因的表達(dá)調(diào)控、影 響基因產(chǎn)物的功能而起作用的。 – 基因的外調(diào)性。 – 基因的多態(tài)性。 ?人類(lèi)疾病相關(guān)的基因是人類(lèi)基因組中結(jié)構(gòu)和功能完整性至關(guān)重要的信息。 ?單基因病 ： 定位克隆 和 定位候選克隆 的全新思路，導(dǎo)致了亨廷頓舞蹈病、遺傳性結(jié)腸癌和乳腺癌等一大批單基因遺傳病致病基因的發(fā)現(xiàn)，為這些疾病的基因診斷和基因治療奠定了基礎(chǔ)。 多基因疾病： ?心血管疾病、腫瘤、糖尿病、神經(jīng)精神類(lèi)疾?。ɡ夏晷园V呆、精神分裂癥）、自身免疫性疾病，是目前疾病基因研究的重點(diǎn)。 ?健康相關(guān)研究是人類(lèi)基因組計(jì)劃的重要組成部分，并于 1997年相繼提出了： ? 腫瘤基因組解剖計(jì)劃 ? “環(huán)境基因組學(xué)計(jì)劃 HGP對(duì)生物技術(shù)的影響： ?基因工程藥物 ：分泌蛋白（多肽激素，生長(zhǎng)因子，趨化因子，凝血和抗凝血因子等）及其受體。 ?診斷和研究試劑產(chǎn)業(yè) ：基因和抗體試劑盒、診斷和研究用生物芯片、疾病和篩藥模型。 ?對(duì)細(xì)胞、胚胎、組織工程的推動(dòng) ：胚胎和成年期干細(xì)胞、克隆技術(shù)、器官再造。 ?篩選新藥和藥物的靶點(diǎn)，分析藥理過(guò)程。 ?進(jìn)行藥物設(shè)計(jì)，對(duì)基因蛋白產(chǎn)物的高級(jí)結(jié)構(gòu)分析、預(yù)測(cè)、模擬藥物作用“口袋” 。 ?個(gè)體化的藥物治療：藥物基因組學(xué)。 HGP對(duì)制藥業(yè)的影響： 基因組學(xué)、生物信息學(xué)與新藥研制 未來(lái)的藥物研究過(guò)程將是基于 生物信息知識(shí)挖掘的過(guò)程 數(shù)據(jù)處理和 關(guān)聯(lián)分析 發(fā)現(xiàn)藥物 作用對(duì)象 確定靶目標(biāo) 分子 針對(duì)靶目標(biāo) 進(jìn)行合理的 藥物設(shè)計(jì) HGP對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的重要影響： ?生物產(chǎn)業(yè)與信息產(chǎn)業(yè)是一個(gè)國(guó)家的兩大經(jīng)濟(jì)支柱 ?發(fā)現(xiàn)新功能基因的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益 ?轉(zhuǎn)基因食品 ?轉(zhuǎn)基因藥物（如減肥藥，增高藥） 生物的進(jìn)化史，都刻寫(xiě)在各基因組的“天書(shū)”上： ? 草履蟲(chóng)是人的親戚 ——13億年； ? 人是由 300～ 400萬(wàn)年前的一種猴子進(jìn)化來(lái)的； ? 人類(lèi)第一次“走出非洲” ——200萬(wàn)年的古猿； ? 人類(lèi)的“夏娃”來(lái)自于非洲，距今 20萬(wàn)年 ——第二次“走出非洲”？ HGP對(duì)生物進(jìn)化研究的影響： HGP帶來(lái)的負(fù)面作用： ?侏羅紀(jì)公園不只是科幻故事 ?種族選擇性滅絕性生物武器 ?基因?qū)＠麘?zhàn) ?基因資源的掠奪戰(zhàn) ?基因與個(gè)人隱私 HGP進(jìn)展與未來(lái) ?整個(gè)完成的時(shí)間提前到了 2021年，比原計(jì)劃提前了兩年。而原訂于 2021年完成的人類(lèi)基因組的基本構(gòu)圖也提前一年，在 2021年 6月 26日 由美國(guó)總統(tǒng)克林頓與英國(guó)首相布萊爾聯(lián)合宣布完成，這一天也因此成為人類(lèi)歷史上“值得載入史冊(cè)的一天”。 ?后基因組計(jì)劃，即功能基因組計(jì)劃的開(kāi)始。 ?人類(lèi)基因組研究的驚人發(fā)現(xiàn) ?19號(hào)染色體是含基因最豐富的染色體 ， 而 13號(hào)染色體含基因量 最少 。 前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)和定位了 26000多個(gè)功能基因 ， 其中 42%的基 因不知道功能 。 ?人類(lèi)基因組中存在 “ 熱點(diǎn) ” 和大片 “ 荒漠 ” 。 在染色體上有基因成簇 密集分布的區(qū)域 ， 也有大片的區(qū)域只有 “ 無(wú)用 DNA” 。 基因組上 大約有 1/4的區(qū)域是沒(méi)有基因的片段 。 ?％ 的基因包含重復(fù)序列 。 這說(shuō)明那些原來(lái)被認(rèn)為是 “ 垃圾 ”的 DNA也起重要作用 ， 應(yīng)該被進(jìn)一步研究 。 ? 1994年，我國(guó) HGP在吳旻、強(qiáng)伯勤、陳竺、楊煥明的倡導(dǎo)下啟動(dòng)，最初由國(guó)家自然科學(xué)基金會(huì)和 863高科技計(jì)劃的支持下，先后啟動(dòng)了“中華民族基因組中若干位點(diǎn)基因結(jié)構(gòu)的研究”和“重大疾病相關(guān)基因的定位、克隆、結(jié)構(gòu)和功能研究”。 ? 1998年在國(guó)家科技部的領(lǐng)導(dǎo)和牽線下，在上海成立了南方基因中心。 ? 1999年在北京成立了北方人類(lèi)基因組中心。 ? 1999年 7月在國(guó)際人類(lèi)基因組注冊(cè)，得到 完成人類(lèi) 3號(hào)染色體短臂上一個(gè)約 30Mb區(qū)域的測(cè)序任務(wù)，該區(qū)域約占人類(lèi)整個(gè)基因組的 1％。 我國(guó)對(duì) HGP的貢獻(xiàn) ? 基因組 DNA測(cè)序：人類(lèi)對(duì)自身基因組認(rèn)識(shí)的第一步。 ? 后基因組學(xué) 是在完成基因組圖譜構(gòu)建以及全部序列測(cè)定的基礎(chǔ)上 ， 進(jìn)一步研究基因組的基因功能、基因之間相互關(guān)系和調(diào)控機(jī)制為主要內(nèi)容的學(xué)科。 ? 后基因組學(xué)包括： 功能基因組學(xué) ， 蛋白質(zhì)組學(xué) ， 生物信息學(xué) ， 比較基因組學(xué) ， 藥物基因組學(xué) 等內(nèi)容。