【正文】 似物可以摻入到新合成的 DNA分子中引起錯(cuò)配； ?移碼誘變劑，如 ICR化合物和吖啶類似物等。 ?此外亞硝酸、羥胺等某些抗菌素等亦可引起突變產(chǎn)生。 化學(xué)誘變 ? 轉(zhuǎn)座子插入誘變是近年來(lái)利用分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展起來(lái)的新的體細(xì)胞變異誘導(dǎo)方法。轉(zhuǎn)座子既可直接將外源基因帶入細(xì)胞內(nèi)獲得新性狀，又可以獨(dú)立插入通過(guò)其轉(zhuǎn)座功能誘導(dǎo)變異。 ? 目前，使用較多的轉(zhuǎn)座子體系主要是玉米的 Ac/Ds系統(tǒng)，其主要操作過(guò)程是首先采用基因轉(zhuǎn)化的方法將 Ac/Ds導(dǎo)入受體細(xì)胞，再通過(guò)體細(xì)胞培養(yǎng)或再生植株的自交或測(cè)交使 Ac因子切除，由于轉(zhuǎn)座子插入的隨機(jī)性，即可在切除 Ac的植株中篩選出不同變異。利用這一途徑已在苜宿、馬鈴薯、番茄、甘藍(lán)等多種植物上獲得可利用的體細(xì)胞變異植株。 轉(zhuǎn)座子插入誘變 直接篩選 間接篩選 四 . 突變體的選擇 ? 其方法是用一種含有特定物質(zhì)的選擇培養(yǎng)基，在此培養(yǎng)基上只有突變細(xì)胞能夠生長(zhǎng)，非突變細(xì)胞不能生長(zhǎng)，從而直接篩選出突變體。如抗除草劑、抗鹽堿突變體的篩選，均可直接在培養(yǎng)基中加入一定濃度的除草劑或增加滲透壓的物質(zhì)。目前采用這一途徑，已從多種植物中篩選出可利用的體細(xì)胞變異體。 ? 賈敬芬等以小麥幼胚愈傷組織為材料，在含有 ％ NaCl的 N6培養(yǎng)基上直接篩選出小麥耐鹽系。分析顯示，耐鹽系游離氨基酸含量是供體親本的。 ? 鄭企成等也曾將小麥 “ 京花 1號(hào) ” 花藥經(jīng) γ 射線處理后，再經(jīng) ％ NaCl培養(yǎng)基直接篩選獲得耐鹽再生株系。 ? 李愛(ài)賢等以甘薯 “ 栗子香 ” 為材料誘導(dǎo)胚性細(xì)胞系，從 900個(gè)通過(guò) γ 射線輻射的細(xì)胞團(tuán)中，在含有 ％ NaCl的培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選，獲得 22個(gè)抗鹽愈傷組織，并獲得 20個(gè)抗鹽再生植株。 直接選擇 Moon等將玉米愈傷組織培養(yǎng)在含有 Al3+的培養(yǎng)基上，直接篩選出耐鋁的突變體Cat1006。經(jīng)過(guò) 4代自交，突變系仍有較好的忍耐鋁的能力，與供體近交后代的耐鋁能力表現(xiàn)為中間類型。 ?間接選擇法是一種借助于與突變表現(xiàn)型有關(guān)的性狀作為選擇指標(biāo)的篩選方法。 ?Dorffling等以 Pro類似物羥脯氨酸（ HYP）為選擇劑，獲得了耐 HYP的體細(xì)胞變異系，其抗寒性比供體親本增強(qiáng)，且能穩(wěn)定遺傳。 ?林定波等將錦橙株心細(xì)胞愈傷組織的懸浮細(xì)胞經(jīng) γ射線照射，然后在高濃度脯氨酸培養(yǎng)基中培養(yǎng)篩選，獲得了抗寒體細(xì)胞變異愈傷組織，并再生植株。鑒定顯示，抗寒愈傷組織及其再生植株的抗寒性分別比供體提高 ℃ 和 ℃ ，突變系體內(nèi)的 Pro含量比供體增加了一倍。 間接選擇 五 .體細(xì)胞 變異應(yīng)用 １創(chuàng)造育種材料 培育新品種 ２遺傳學(xué)研究 ４代謝研究 ３發(fā)育生物學(xué)研究 ?據(jù)統(tǒng)計(jì)，誘導(dǎo)突變已被用來(lái)改良諸如小麥、水稻、大麥、棉花、花生和菜豆這些種子繁殖的重要作物。 ?在全世界 50多個(gè)國(guó)家中已發(fā)放了 1000多個(gè)由直接突變獲得的或由這些突變體相互雜交而衍生的品種。 ?這些品種的主要特性包括品質(zhì)改良、增強(qiáng)抗病性、抗逆性等。 創(chuàng)造育種中間材料或直接培育新品種 ?在各國(guó)現(xiàn)有通過(guò)體細(xì)胞誘變選育的谷類作物品種中，品質(zhì)得到不同程度改良的占 ％。 ?意大利選育的硬粒小麥 Creso，品質(zhì)好、產(chǎn)量高、適應(yīng)性強(qiáng)，成為該國(guó)小麥種植主栽品種。 ?通過(guò)射線處理選育的面包小麥 Sharbati So06ra，蛋白質(zhì)含量由原品種的 13％提高到 16％，賴氨酸含量從％提高到 ％。 ?在水稻方面，國(guó)外至少育成了 12個(gè)米質(zhì)優(yōu)良的品種，如日本的美雪錦、賓系酒 18號(hào)、加賀光、富士光、宵錦，美國(guó)的 Calmochi201等等。法國(guó)選育的 Delta，以其良好的籽粒品質(zhì)占該國(guó)水稻總面積的 20％。 ?此外，還有丹麥無(wú)花青素原大麥 Galant，其商業(yè)應(yīng)用價(jià)值在于能保持啤酒的穩(wěn)定性。 ?據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，誘變品種中大約有 1/4是抗病品種，其中 80％左右為抗真菌品種。 ?包括水稻抗稻瘟病、白葉枯病、稻胡麻葉斑病等的突變體，小麥抗銹病、白粉病、根腐病和耐赤霉病的突變體，大麥抗白粉病、病毒病和紋枯病的突變體，玉米抗大小班病和青枯病的突變體；高粱抗絲黑穗病、谷子抗白發(fā)病的突變體；大豆抗灰斑病和病毒病的突變體；菜豆抗黃班病毒病的突變體；馬鈴薯抗黑斑病的突變體，白菜抗霜霉病的突變體；油菜抗花葉病的突變體等（孫光祖， 1995）。 ?耐鹽、抗旱、抗寒變異也已篩選出眾多中間材料，有的已進(jìn)入?yún)^(qū)域試驗(yàn)，有的已用于生產(chǎn)。 ?突變體直接用于基因功能鑒定。突變一旦發(fā)生，即可在表型上與供體顯著不同。 ?突變 DNA序列用作分子標(biāo)記進(jìn)行遺傳研究。 ?利用突變體策略已分離出一些功能基因和抗病基因，如玉米乙醇脫氫酶基因 ADH，赤霉素合成相關(guān)基因 GA GA4，生長(zhǎng)素敏感性基因 AUX AUX番茄抗病基因 Df9等。 遺傳學(xué)研究 ?利用體細(xì)胞突變策略對(duì)植物發(fā)育的基因調(diào)控研究已在模式植物擬南芥和金魚草等植物中廣泛開(kāi)展，并分離出一大批不同發(fā)育階段和組織類型的突變體，包括頂端分生組織、根、開(kāi)花轉(zhuǎn)變、花序、花分生組織、胚胎發(fā)育等的系列突變體。通過(guò)這些突變體研究，不僅建立了器官發(fā)育模式，而且分離鑒定了一大批與發(fā)育有關(guān)的基因，包括維持正常發(fā)育狀態(tài)的基因、促進(jìn)發(fā)育進(jìn)程的基因，以及相關(guān)修飾基因。 發(fā)育生物學(xué)研究 ?以突變體為工具，還從組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)角度分析鑒定了一些基因的表達(dá)與植物發(fā)育的關(guān)系。 ?在煙草、玉米中均通過(guò)質(zhì)體突變體分離鑒定了與植物葉綠體發(fā)育有關(guān)的核基因。玉米黃化突變體pun是一個(gè)在光照下不可逆轉(zhuǎn)的突變體，分析顯示，該突變體為一核單基因隱性突變，該基因的突變擾亂了葉綠體基因編碼的蛋白質(zhì)積累，進(jìn)而使葉綠體膜系統(tǒng)發(fā)育不足，類囊體相關(guān)蛋白不能積累。 ?突變體作為代謝活動(dòng)調(diào)控研究的工具，具有十分便利和高效的優(yōu)勢(shì)。體細(xì)胞突變技術(shù)的不斷成熟，使多細(xì)胞生物大群體突變的建立成為可能。我們可以根據(jù)需要建立某一代謝途徑中每一個(gè)調(diào)節(jié)點(diǎn)的突變體，也可以根據(jù)需要與基因工程相結(jié)合，對(duì)一些關(guān)鍵調(diào)控過(guò)程進(jìn)行修飾和改造，使代謝過(guò)程按照人類需要進(jìn)行。因此而發(fā)展起來(lái)的新型學(xué)科領(lǐng)域稱之為代謝工程。 代謝途徑研究 ? 植物突變體用于代謝研究，早期最經(jīng)典的例子是煙草突變體對(duì)硝酸還原酶的研究。硝酸還原酶缺失突變體有 x和 nia兩種類型，分別通過(guò)影響鉬因子和酶蛋白來(lái)影響硝酸還原酶的活性，兩種突變體細(xì)胞融合子可以互補(bǔ)在只有硝酸鹽的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。 ? 近年來(lái)，通過(guò)體細(xì)胞突變研究激素、次生代謝產(chǎn)物等代謝途徑的研究已有許多報(bào)道。如番茄推遲成熟的突變體Nr，與乙烯應(yīng)答基因突變有關(guān)；玉米胚乳皺縮型突變（ sh）可能涉及到蔗糖代謝的相關(guān)酶基因的突變，分析野生型和突變型的蔗糖合成酶和堿性轉(zhuǎn)化酶活性顯示，野生型的蔗糖合成酶活性比突變系高，而堿性轉(zhuǎn)化酶活性比突變系低。