上海師范大學(xué)植物生理學(xué)實驗-資料下載頁
2025-05-11 04:26本頁面
【正文】 5 6 7 8 9 10 OD470 種子活力的快速測定 （氯化三苯基四氮唑法， TTC法） ? 實驗原理 – 凡有生命力的種子胚部，在呼吸作用過程中都有氧化還原反應(yīng)，而無生命活力的種胚則無此反應(yīng)。當(dāng) TTC 滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為氫受體被脫氫輔酶（ NADH 或 NADPH ）上的氫還原時，便由無色 TTC 變?yōu)榧t色的 TTF。 種子活力的快速測定 （氯化三苯基四氮唑法， TTC法） ? 實驗器材與試劑 – 實驗儀器 ? 恒溫箱，燒杯，培養(yǎng)皿，鑷子，刀片 – 實驗試劑 ? % TTC 溶液 – 實驗材料 ? 大麥、小麥、秈谷或粳谷的種子 種子活力的快速測定 （氯化三苯基四氮唑法， TTC法） ? 實驗步驟 – 浸種 ? 將待測種子在 30～ 35 ℃ 溫水中浸種，以增強種胚的呼吸強度。 – 顯色 ? 取吸脹種子 100 粒，用刀片沿種子胚的中心線縱切為兩半，將其中的一半置于培養(yǎng)皿中，加入適量的 % TTC 溶液覆蓋種子。然后置于 30 ℃ 恒溫箱中 1 h。觀察結(jié)果。 ? 將另一半在沸水中煮 5 min 殺死胚，作同樣染色處理，作為對照觀察。 種子活力的快速測定 （氯化三苯基四氮唑法， TTC法） ? 實驗步驟 – 計算活種子的百分?jǐn)?shù)。 ? 實驗結(jié)果 – 煮沸殺死的種子胚部均為白色。 – 未煮沸殺死的種子胚部大部分為紅色，少數(shù)為白色。 – 活種子的百分率為： 種子活力的快速測定 （紅墨水法） ? 實驗原理 – 凡活細(xì)胞的原生質(zhì)膜具有選擇性吸收物質(zhì)的能力，而死的種子胚細(xì)胞原生質(zhì)膜喪失這種能力，于是染料便能進入死細(xì)胞而染色。 種子活力的快速測定 （紅墨水法） ? 實驗器材與試劑 – 實驗儀器 ? 恒溫箱，燒杯，培養(yǎng)皿，鑷子，刀片 – 實驗試劑 ? 5 % 紅墨水 – 實驗材料 ? 大麥、小麥、秈谷或粳谷的種子 種子活力的快速測定 （紅墨水法） ? 實驗步驟 – 浸種 ? 將待測種子在 30～ 35 ℃ 溫水中浸種，以增強種胚的呼吸強度。 – 顯色 ? 取吸脹種子 100 粒，用刀片沿種子胚的中心線縱切為兩半，將其中的一半置于培養(yǎng)皿中，加入 5 % 紅墨水淹沒種子。染色 10～ 15 min。 ? 倒去紅墨水，用水沖洗種子，至沖洗液無色，觀察結(jié)果。 種子活力的快速測定 （紅墨水法） ? 實驗步驟 – 將另一半在沸水中煮 5 min 殺死胚，作同樣染色處理，作為對照觀察。 – 計算活種子的百分?jǐn)?shù)。 ? 實驗結(jié)果 – 煮沸殺死的種子胚與胚乳均染上紅色。 – 未煮沸殺死的種子胚部大部分為白色或淺紅色，少數(shù)為紅色。 – 活種子的百分率為： 植物生長調(diào)節(jié)劑對植物插條不定根發(fā)生的影響 ? 實驗原理 – 用植物生長調(diào)節(jié)劑（生長素類）處理插條，可以促進細(xì)胞恢復(fù)分裂能力，誘導(dǎo)根原基發(fā)生，促進不定根的生長。 植物生長調(diào)節(jié)劑對植物插條不定根發(fā)生的影響 ? 實驗器材與試劑 – 實驗儀器 ? 電子天平，燒杯，移液管，量筒等 – 實驗試劑 ? 1000 mg/L 吲哚乙酸溶液 – 實驗材料 ? 各種植物材料 植物生長調(diào)節(jié)劑對植物插條不定根發(fā)生的影響 ? 實驗步驟 – 用 1000 mg/L 吲哚乙酸溶液配制 100 mg/L、 200 mg/L、 300 mg/L 吲哚乙酸溶液。 – 從室外取植物材料，自莖頂端或枝條上端向下10～ 15 cm 處剪去植物下部分，去除花，保留1～ 2 片葉片（如葉面積較大，可保留半張葉）。 植物生長調(diào)節(jié)劑對植物插條不定根發(fā)生的影響 ? 實驗步驟 – 將插枝基部 2～ 3 cm 浸泡在吲哚乙酸溶液中（每種溶液中浸 5 枝），并以蒸餾水作對照，8 h 后取出枝條，插入砂質(zhì)苗床中培養(yǎng)，注意控制溫度和濕度。 – 20 d 后，統(tǒng)計各處理枝條不定根發(fā)生的數(shù)目，觀察根的粗細(xì)和長度，以了解不同濃度吲哚乙酸在一定處理時間下對生根的影響。 植物生長調(diào)節(jié)劑對植物插條不定根發(fā)生的影響 ? 實驗結(jié)果 – 各吲哚乙酸溶液處理的插條生根情況（平均每株根數(shù)、平均根長、粗細(xì)）好于對照。 高溫和低溫對植物的傷害 ? 實驗原理 – 植物組織受到高溫或低溫傷害時，由于膜的功能受損或結(jié)構(gòu)破壞而透性增大，細(xì)胞內(nèi)各種水溶性物質(zhì)不同程度地外滲。將植物組織浸入無離子水中，水的電導(dǎo)率將因電解質(zhì)的外滲而加大。膜傷害愈重，電解質(zhì)外滲愈多，電導(dǎo)率的增加也愈大。故可用電導(dǎo)率儀測定外液的電導(dǎo)率而得知植物受傷害程度。 高溫和低溫對植物的傷害 ? 實驗器材與試劑 – 實驗儀器 ? 電導(dǎo)率儀，恒溫水浴鍋，打孔器，注射器，試管，移液管，恒溫箱，冰箱等 – 實驗試劑 ? 去離子水 – 實驗材料 ? 植物離體葉片 高溫和低溫對植物的傷害 ? 實驗步驟 – 取正常生長的植株葉片若干，用水洗凈并用吸水紙吸干葉表面水分，將一份放在－ 20 ℃ 左右的溫度下冷凍 30 min，另一份放在 40 ℃ 左右的溫度下處理 30 min，第三份裹入潮濕的紗布中在室溫下作對照。 – 將處理葉片與對照葉片用去離子水沖洗 2 次，再用潔凈濾紙吸凈表面水分，每組葉片取葉圓片 20 片，分別放入注射器內(nèi)，各加 10 mL 去離子水，抽氣使葉片沉入水中。 高溫和低溫對植物的傷害 ? 實驗步驟 – 將葉片及去離子水分別倒入 3 個試管中，在室溫下保持 1 h，期間要多次搖動試管。 – 用電導(dǎo)率儀測定 3 組的初電導(dǎo)率（ κ1）。測定后，將試管置沸水浴中 10 min，取出冷卻至室溫，并平衡 20 min，搖勻，測終電導(dǎo)率（ κ2）。 高溫和低溫對植物的傷害 ? 實驗結(jié)果 – 按下式計算相對電導(dǎo)率 相對電導(dǎo)率 L = κ1 /κ2 相對電導(dǎo)率的大小表示細(xì)胞受傷害的程度。由于對照也有少量電解質(zhì)外滲，故可用下式計算傷害度 高溫傷害度 = （ L高 － L常 ） /（ 1－ L常 ） 低溫傷害度 = （ L低 － L常 ） /（ 1－ L常 ） 高溫和低溫對植物的傷害 ? 實驗結(jié)果 – 如用蒸餾水實驗，相對電導(dǎo)率計算可用下式 相對電導(dǎo)率 L = （ κ1 － κ0） / （ κ2 － κ0 ） κ0 為實驗用蒸餾水的電導(dǎo)率
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