【正文】 測樣品。 靜態(tài)法是將待萃取的樣品“浸泡”在超臨界流體內(nèi)，經(jīng)過一段時間后，再把含有被萃取溶質(zhì)的超臨界流體送至吸收管。它沒有動態(tài)法那樣快速，但適合于萃取那些與樣品基體較難分離或在超臨界流體內(nèi)溶解度不大的物質(zhì)，樣品基體較為致密，超臨界流體不易滲透的樣品。 循環(huán)法其本質(zhì)是動態(tài)法和靜態(tài)法的結(jié)合。它首先將超臨界流體充滿樣品萃取管，然后用循環(huán)泵使樣品萃取管內(nèi)的超臨界流體反復(fù)、多次經(jīng)過管內(nèi)的樣品進行萃取，最后進入吸收管，因此，它比靜態(tài)法萃取效率高，又能萃取動態(tài)法不適用的樣品，適用范圍廣。 四、應(yīng)用 1. 超臨界流體萃取最適合于固體和半固體樣品的萃取。水在超臨界 CO2中有較高的溶解度（約 ％），除少量液態(tài)樣品可直接萃取外，大多數(shù)液體及氣體應(yīng)首先進行固相吸附或膜預(yù)處理，然后再按固態(tài)樣品方式進行萃取。 2. 超臨界流體特別適合于萃取烴類及非極性脂溶化合物。如醚、酯、酮及其他分子量達 300～ 400道爾頓的化合物。能進行族選擇性萃取。 3. 可萃取金屬離子。可將金屬離子衍生為金屬螯合物后再進行萃取。 4. 與其他儀器分析方法聯(lián)用。目前使用最普遍且較成熟的聯(lián)用技術(shù)是與氣相色譜聯(lián)用。 5. 其他應(yīng)用。 A、 SCCO2幾乎可以萃取各種油類，制取低含油量食品時，使 SCCO2從中通過，則含油量可降低到符合食品衛(wèi)生要求的范圍。用 SCCO2脫除尼古丁的香煙 ,，現(xiàn)在美國大量試銷。 B、用 SCF可從植物中提取有效成分，從長春花中提取長春堿和羥基長春堿 (用于治療急性淋巴細胞性白血病 )。 第五節(jié) 微波萃取 微波萃?。?Microwave Aided Extraction，MAE）是指在微波能的作用下，用溶劑將樣品基體中的待測組分溶出的過程。五十年代就開始利用微波干燥加工，直到 1975年才首次用在分析化學(xué)中。微波萃取法由于設(shè)備簡單、萃取時間短、選擇性好、回收率高、試劑用量少、污染低、可用水作萃取劑、可同時處理多個樣品等優(yōu)點。 一、基本原理 微波是指波長在 1mm至 1m之間，頻率在30MHz至 300000MHz之內(nèi)的電磁波。它介于紅外線和無線電波之間。微波萃取的特點可涉及兩個方面： 1. 微波輻射能穿透萃取介質(zhì)，可到達物料的內(nèi)部， 由于吸收微波能，內(nèi)部溫度迅速上升，增大被分離物質(zhì)在介質(zhì)中的溶解度； 2. 微波所產(chǎn)生的電磁場加速被萃取部分成分向萃取溶劑界面擴散， 用水作溶劑時，在微波場下，水分子高速轉(zhuǎn)動成為激發(fā)態(tài)，這是一種高能量不穩(wěn)定狀態(tài)，或者水分子汽化，加強萃取組分的驅(qū)動力；或者水分子本身釋放 能量回到基態(tài)，所釋放的能量傳遞給其他物質(zhì)分子加速其熱運動，縮短萃取組分的分子由物料內(nèi)部擴散到萃取溶劑界面的時間，從而使萃取速率提高數(shù)倍，同時還降低了萃取溫度，最大限度保證萃取的質(zhì)量。 微波作用的物質(zhì)： （ 1）由極性分子所組織的物質(zhì)，能較好地吸收微波能。水分子呈極強的極性，是吸收微波的最好介質(zhì)，所以凡含水分子的物質(zhì)必定吸收微波。 （ 2）另一類由非極性分子組成，它們基本上不吸收或很少吸收微波，這類物質(zhì)有聚四氟乙烯、聚丙烯、聚乙烯、聚砜等、塑料制品和玻璃、陶瓷等，它們能透過微波，而不吸收微波。這類材料可作為微波加熱用的容器或支承物。 （ 3）金屬導(dǎo)體材料能很好的反射微波，可做其密封材料。 二、微波萃取設(shè)備及萃取步驟 帶有控溫附件的微波制樣設(shè)備，微波萃取用制樣杯（一般為聚四氟乙烯材料）。 微波萃取主要適合于固體或半固體樣品，樣品制備整個過程包括粉碎、與溶劑混合、微波輻射、分離萃取液等步驟，具體如下：準確稱取一定量的待測樣品置于微波制樣杯內(nèi)，根據(jù)萃取物情況加入適量的萃取溶劑 (不超過 50mL)。按微波制樣要求，把裝有樣品的制樣杯放到密封罐中，然后把密封罐放到微波制樣爐里。設(shè)置目標(biāo)溫度和萃取時間，加熱萃取直至加熱結(jié)束。把制樣罐冷卻至室溫，取出制樣杯，過濾或離心分離，制成可進行下一步測定的溶液。 常規(guī)的微波萃取方法是把極性溶劑 (如丙酮 )或極性溶劑和非極性溶劑混合物 (如丙酮 +正己烷 ,或甲醇 +乙酸等 )，與被萃取樣品混合，裝入微波制樣容器 (一般為 PFA杯 )中，在密閉狀態(tài)下，放入微波制樣系統(tǒng)中加熱。根據(jù)被萃取組分的要求，控制萃取壓力或溫度和時間；加熱結(jié)束時，把樣品過濾，濾液直接進行測定，或作相應(yīng)處理后進行測定。一般情況下，微波萃取加熱時間約 5～ 10分鐘，萃取溶劑和樣品總體積不超過制樣杯體積的 1/3。 三、萃取條件的選擇 萃取條件的選擇主要包括萃取溶劑、萃取溫度、萃取時間、溶液 pH值。 1. 萃取溶劑 （ 1）因非極性溶劑不能吸收微波能，所以不能用 100％的非極性溶劑作微波萃取溶劑，一般可在非極性溶劑中加入一定比例的極性溶劑來使用。 如使用正己烷 丙酮 (1:1)混合溶劑從土壤和沉積物中提取多環(huán)芳烴等有機污染物。 （ 2）利用微波能進行萃取分離時，除了要考慮溶劑的極性，還要求溶劑對分離成分有較強的溶解能力，對萃取成分的后續(xù)操作干擾較少。 已見報道用于微波萃取的溶劑有：甲醇，乙醇，異丙醇，丙酮，二氯甲烷，正己烷，異辛烷，乙腈，苯，甲苯等。如應(yīng)用正己烷作溶劑，從薄荷和大蒜等生物物料中微波萃取精油。 有時樣品可含有一定的水分，或?qū)⒏稍锏臉悠酚盟疂櫇窈笤偌尤肴軇┻M行微波萃取輻射，都能取得較好的結(jié)果。有研究表明以異辛烷為萃取劑分離沉積物中的殺蟲劑時，樣品水分為 15%時微波萃取效率最高。 在微波密閉容器中，由于內(nèi)部壓力可達到十幾個大氣壓，因此，溶劑沸點比常壓下的溶劑沸點要高得多，例如在密閉容器中丙酮的沸點提高到 164℃ （常壓下： ℃ ）。因此，用微波萃取可以達到常壓下使用同樣的溶劑達不到的萃取溫度，以提高萃取效率，而又不至于分解待測萃取物，例如，對有機氯農(nóng)藥微波萃取實驗表明，萃取溫度在 120℃可獲得最好的回收率。 3. 萃取時間 微波萃取時間與被測物樣品量、溶劑體積和加熱功率有關(guān)。一般情況下，萃取時間在 1015min內(nèi)。在萃取過程中，一般加熱開始 12min即可達到所要求的萃取溫度。 4. 溶液 pH值 溶液的 pH值也會對微波萃取的效率產(chǎn)生一定的影響，針對不同的萃取樣品，溶液有一個最佳的用于萃取的酸堿度。有文獻考察了從土壤中萃取除草劑三嗪時分別用 NaOH、 NH3NH4Cl、 HAc、NaAc和 HCl調(diào)節(jié)溶劑 pH值對回收率的影響。研究結(jié)果表明：當(dāng)溶劑的 pH值介于 ～ ，除草劑三嗪的回收率最高。 四、特點 與傳統(tǒng)的樣品預(yù)處理技術(shù)如索氏抽提、超聲波萃取相比，微波萃取的主要特點是快速與節(jié)能，而且有利干萃取熱不穩(wěn)定物質(zhì)，可以避免長時間的高溫引起樣品分解，有助于被萃取物質(zhì)從樣品基體上解吸，故特別適合于快速處理大量的樣品。 五、應(yīng)用 微波萃取技術(shù)已應(yīng)用于土壤、沉積物中多環(huán)芳烴、農(nóng)藥殘留、有機金屬化合物、植物中有效成分、害物質(zhì)、霉菌毒素、礦物中金屬的萃取以及血清中藥物，生物樣品中農(nóng)藥殘留的萃取研究。 此外，微波萃取也用于植物中有效成分的萃取、如糧食和牛奶中維生素 B的提取，中藥中皂甙的提取，蔬菜類植物中吡咯雙烷基生物堿的提取等。在臨床上微波萃取主要用于選擇性人血或血清中的藥物等。