巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子ein3的western印跡畢業(yè)論文-資料下載頁
2024-08-28 15:42本頁面
【導(dǎo)讀】師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的成果。盡我所知，除文中特別加。而使用過的材料。均已在文中作了明確的說明并表示了謝意。不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。全意識到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，涉密論文按學(xué)校規(guī)定處理。合國家技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范。世界上超過90%的天然橡膠是來自巴西橡膠。因此對巴西橡膠樹的研究有著極其重要的經(jīng)濟(jì)價值和戰(zhàn)略作用。特異性乙烯抗體的免疫印跡來檢測刮傷對其乙烯途徑的影響。種不同的方法測定葉片蛋白的濃度，并對其準(zhǔn)確性進(jìn)行對比分析。目前我國天然橡膠資源供需缺口日趨擴(kuò)大、和穩(wěn)定,對世界天然橡膠的安全保障也具有非常重要的意義。植物和糧食等經(jīng)濟(jì)作物來說，橡膠樹的分子生物學(xué)研究起步較晚，研究難度較大，目前，對于天然橡膠的生物合成途徑雖有一定的了解，與橡膠樹
【正文】 巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子 Ein3 的 western 印跡 Sample 0h 1h 4h 6h 12h 24h (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線 （ 3）樣品蛋白濃度（ OD 值代入 y=+） 樣品 蛋白濃度 (μ g/μ l) 上樣量 (μ l) 0h 1h 4h 6h 12h 24h 巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子 Ein3 的 western 印跡 重復(fù)實驗比較分析 三種定蛋白的方法 所用到的牛血清蛋白和樣品蛋白是在同一條件下保存的同一試 管中取得的，因此其蛋白濃度理論上應(yīng)該是相等的，但是從三種方法的結(jié)果來看，不同方法所得的結(jié)果有一定的差距。首先，配置的標(biāo)準(zhǔn)濃度的牛血清蛋白液做標(biāo)準(zhǔn)曲線時， Esen method 和 BCA 法測得的牛血清蛋白相同濃度的 OD 值接近，而 Bradford 法把牛血清蛋白稀釋了 20 倍左右后所得 OD 值與另外兩種方法相差很大，說明稀釋過程中操作不當(dāng)引起了濃度的誤差。相對于 BCA 法而言，Esen method 和 Bradford 法所得樣品的 OD 值比較接近，且 各個處理的濃度變化差異也相差不大。重復(fù)實驗所得數(shù)據(jù)表明 Esen method 的重復(fù)性好，兩次實驗得出的蛋白濃度比較接近，而另兩種方法兩次實驗的結(jié)果差異較大，說明 Esen method 在定植物蛋白濃度時比 BCA 法和 Bradford 法精確。本實驗主要采用的就是 Esen method定蛋白濃度，用 BCA法和 Bradford法可以更好地驗證 Esen method的精確性，同時也可大致確定所提取的橡膠葉片蛋白的濃度。 通過十二烷基硫酸鈉 聚丙烯酰胺凝膠電泳所得的凝膠染色脫色后與雙色預(yù)染寬分子量蛋白 Marker 的說明書中的條帶大小進(jìn)行比對得出橡膠葉片總蛋白的大小介于 40kD55kD 之間。從顯色的明暗程度來說， 0h、 1h、 6h、 12h 的比較明巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子 Ein3 的 western 印跡 顯，而 4h 的比較暗，而且 24h 的觀察不到蛋白的存在。 觀察顯色后的 PVDF 膜，可以看到在 巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子 Ein3 的 western 印跡 [1]E P阿姆利 ,王科 .巴西橡膠的過去和將來 [J].云南熱作科技 ,1980,04:6068. [2]蔣菊生 ,王如松 .中國熱帶北緣橡膠種植生態(tài)工程 [A]..中國科協(xié) 2020 年學(xué)術(shù)年會海南論文集 [C].:,2020:5. [3]黃炎 ,郭慶水 ,徐立新 ,陳守才 .巴西橡膠樹的分子生物學(xué)研究進(jìn)展 [J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) ,2020,02:442445+456. [4]祁棟靈 ,王秀全 ,張志揚(yáng) ,黃月球 .中國天然橡膠產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及其發(fā)展建議 [J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué) ,2020,02:7987. [5]潘延云 ,郭毅 ,趙軍峰 ,孫大業(yè) .乙烯在植物中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) [J].浙江大學(xué)學(xué)報 (農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版 ),2020,04:101108. [6]Reid, M. S. and pratt, H. K. Effects of ethylene on potato tuber respiration. Plant Physiol. 1972, 49: 252255 [7]范思偉 ,楊少瓊 .巴西橡膠的乙烯生理學(xué) [J].熱帶作物研究 ,1991,03:6977. [8]楊少瓊 ,黎仕 劍 .機(jī)械創(chuàng)傷和巴西橡膠樹的應(yīng)激乙烯生成及其對排膠量的影響[J].熱帶作物研究 ,1982,04:1113. [9]Chao Q, Rothenberg M, Solano R, et al. Activation of the ethylene gas response pathway in Arabidopsis by the nuclear protein ETHYLENEINSENSITIVE3 and related proteins. Cell, 1997, 89: 1133–1144 [10]Yamasaki K, Kigawa T, Inoue M, et al. Solution structure of the major DNAbinding domain of Arabidopsis thaliana ethyleneinsensitive3like3. J Mol Biol, 2020, 348: 253–264 巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子 Ein3 的 western 印跡 [1] Toyama H , Nishibayashi E , Saeki M, et required for thecatalyt ic reaction of PqqC/ D which produces pyrroloquinoline quinine[ J] .Biochem Biophys Res Commun , 2020 , 354(1):290295 . [2]Springer A L , Ramamoorthi R, Lidstrom Marye E .Characterization andnucleotide sequence of pqqE and pqqF in Methylobacterium extorquensAM1[ J] .J Bacteriol , 1996 ,178(7):21542157. 。 致 謝 本論文是在翟金玲副教授的悉心指導(dǎo)下完成的。從論文選題、試驗設(shè)計到論文的撰寫等過程，翟老師都付出了大量的時間和精力。長期以來，翟老師不僅在實驗過程中幫助我，在我有疑惑時給予細(xì)心的指導(dǎo)，讓我學(xué)會了很多實驗的方法和技術(shù)，還在學(xué)習(xí)和生活上給予我關(guān)懷和鼓勵。翟老師以認(rèn)真、負(fù)責(zé)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕虒W(xué)態(tài)度讓我受益匪淺。在此向翟金玲副教授致以衷心的感謝和崇高的敬意。 此外，我要特別感謝黃 惜教授和生物技術(shù)研究所的各位老師長期以來對實驗相關(guān)環(huán)節(jié)的耐心指導(dǎo)和熱心幫助。另外，還要感謝王啟超師兄、范玉龍師兄等師兄師姐在我實驗出現(xiàn)困難時的幫助和對此實驗的支持。 巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子 Ein3 的 western 印跡 最后，我要感謝大學(xué)里所有教導(dǎo)我的每一位老師和關(guān)心過我的每一位同學(xué)同學(xué)，感謝在背后默默支持我的家人，感謝你們在我學(xué)習(xí)和成長過程中給予的巨大幫助和鼓舞 。
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