20xx屆-二輪-基因工程-專題卷-(江蘇版)-資料下載頁
2025-04-05 05:44本頁面
【正文】 應(yīng)適量添加四環(huán)素和XGal。②若用EcoRⅠ完全酶切上述①中獲得的重組質(zhì)粒,并進(jìn)行電泳觀察,可出現(xiàn)四種長度不同的片段,分析重組質(zhì)粒, kb、 kb、 kb。15. (2018江蘇南通、泰州一模)乙型腦炎和偽狂犬病是豬的兩種常見傳染病。如圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)能同時預(yù)防這兩種病疫苗的流程圖,其中PrM為乙型腦炎的特異性抗原基因,PK、gG、gD為偽狂犬病的主要抗原基因,TK為偽狂犬病的毒性基因,pgG為啟動子,BamHⅠ和EcoRⅠ為兩種限制酶,其識別序列及切割位點(diǎn)分別是G↓GATCC、G↓AATTC。請回答下列問題:(1)過程①所需的酶有 和 。下列四種引物中適用于過程①的一對引物是 。P1:539。TTGGATCCATGGAAGGCTCAATCATGTG 339。P2:539。CACAAGCTTAGATGACGTATCCAAGGAG 339。P3:539。TACGGTACCTTAGGGGTTAAGTGGG 339。P4:539。GCGAATTCTAACTGTAAGCCGGAGCG 339。(2)過程②所需的酶有 。過程③中要用Ca2+處理大腸桿菌,其目的是 。(3)重組偽狂犬病毒中不帶TK基因的優(yōu)點(diǎn)是 。(4)將獲得的病毒疫苗注射到豬體內(nèi),一方面病毒中抗原基因在豬細(xì)胞中大量表達(dá),誘導(dǎo)豬獲得 免疫。另一方面 ,使得病毒疫苗具有用量小、作用更持久等優(yōu)點(diǎn)。答案 (1)反(逆)轉(zhuǎn)錄酶 Taq酶 P1和P4 (2)限制酶和DNA連接酶 使大腸桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞 (3)不具毒性,注射后不會引發(fā)豬患病 (4)體液和細(xì)胞(特異性) 病毒在動物體內(nèi)可增殖并長期保留解析 (1)RTPCR是以RNA為模板通過反轉(zhuǎn)錄先合成DNA,再以獲得的目的基因DNA為模板通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。因此,在RTPCR系統(tǒng)中需要加入反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶、脫氧核苷酸等。(2)在擴(kuò)增目的基因時,設(shè)計的一對引物應(yīng)含有目的基因兩端核苷酸序列,而根據(jù)圖中提示PrM基因兩端有BamHⅠ和EcoRⅠ的識別序列,因此對照提供的引物序列,可以確定本研究適用引物是PP4。(2)TK基因是偽狂犬病的毒性基因,因此在疫苗制備中,應(yīng)該去除TK基因,以免引起疫苗接種后動物患病現(xiàn)象的發(fā)生。(3)注射蛋白疫苗(基因工程產(chǎn)物)可引起動物產(chǎn)生體液免疫,但由于疫苗蛋白在動物體內(nèi)存留時間短,需要注射足量疫苗并進(jìn)行加強(qiáng)免疫。如果注射病毒疫苗,病毒作為活生物體,在進(jìn)入動物體內(nèi)后可以不斷增殖和大量表達(dá)抗原基因,會使用病毒疫苗具有使用量小、作用效果好、作用持久等優(yōu)點(diǎn)。9 / 9
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