20xx屆-二輪-基因工程-專題卷-(江蘇版)(參考版)
2025-04-05 05:44本頁面
【正文】 9 / 9。(3)注射蛋白疫苗(基因工程產(chǎn)物)可引起動(dòng)物產(chǎn)生體液免疫,但由于疫苗蛋白在動(dòng)物體內(nèi)存留時(shí)間短,需要注射足量疫苗并進(jìn)行加強(qiáng)免疫。(2)在擴(kuò)增目的基因時(shí),設(shè)計(jì)的一對(duì)引物應(yīng)含有目的基因兩端核苷酸序列,而根據(jù)圖中提示PrM基因兩端有BamHⅠ和EcoRⅠ的識(shí)別序列,因此對(duì)照提供的引物序列,可以確定本研究適用引物是PP4。答案 (1)反(逆)轉(zhuǎn)錄酶 Taq酶 P1和P4 (2)限制酶和DNA連接酶 使大腸桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞 (3)不具毒性,注射后不會(huì)引發(fā)豬患病 (4)體液和細(xì)胞(特異性) 病毒在動(dòng)物體內(nèi)可增殖并長期保留解析 (1)RTPCR是以RNA為模板通過反轉(zhuǎn)錄先合成DNA,再以獲得的目的基因DNA為模板通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。另一方面 ,使得病毒疫苗具有用量小、作用更持久等優(yōu)點(diǎn)。(2)過程②所需的酶有 。P4:539。P3:539。P2:539。P1:539。下列四種引物中適用于過程①的一對(duì)引物是 。如圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)能同時(shí)預(yù)防這兩種病疫苗的流程圖,其中PrM為乙型腦炎的特異性抗原基因,PK、gG、gD為偽狂犬病的主要抗原基因,TK為偽狂犬病的毒性基因,pgG為啟動(dòng)子,BamHⅠ和EcoRⅠ為兩種限制酶,其識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是G↓GATCC、G↓AATTC。②若用EcoRⅠ完全酶切上述①中獲得的重組質(zhì)粒,并進(jìn)行電泳觀察,可出現(xiàn)四種長度不同的片段,分析重組質(zhì)粒, kb、 kb、 kb。(3)①質(zhì)粒X既有四環(huán)素抗性基因(Tetr),又有藍(lán)色顯色基因(lacZ),便于對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)和篩選。其中啟動(dòng)子與終止子能正常調(diào)控表達(dá)過程,使基因表達(dá)開始或終止。答案 (1)逆轉(zhuǎn)錄 未雜交 雙鏈cDNA (2)啟動(dòng)子和終止子 (3)①X NotⅠ 四環(huán)素和XGal ② kb解析 (1)據(jù)圖可知,圖1為構(gòu)建基因文庫的過程,其中需要單鏈mRNA通過A過程形成雜交雙鏈分子,需要逆轉(zhuǎn)錄酶,D過程需要回收未雜交的含32P的cDNA單鏈,繼而通過人工合成,獲得雙鏈cDNA,并用其構(gòu)建基因文庫。②若用EcoRⅠ完全酶切上述①中獲得的重組質(zhì)粒,并進(jìn)行電泳觀察,可出現(xiàn)四種長度不同的片段, kb、 kb、 。為篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞,培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加 。EcoRⅠ( kb)、NotⅠ( kb)等為限制酶及其切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)之間的距離(1 kb=1 000個(gè)堿基對(duì))。(3)圖2為改造后的目的基因。(2)從圖1構(gòu)建的基因文庫中獲取的目的基因,一般還需進(jìn)行人工改造后才能用于基因表達(dá)載體的構(gòu)建,改造內(nèi)容除了在基因兩端添加限制酶的識(shí)別序列外,還需添加 ,以便其隨載體導(dǎo)入受體細(xì)胞后,
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