20xx年醫(yī)學(xué)專題—免疫細(xì)胞功能檢測技術(shù)(編輯修改稿)
2024-11-19 04:25 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 和SRBC混合時，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體產(chǎn)生細(xì)胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復(fù)合物,此時能活化補體導(dǎo)致溶血。上述直接法和間接法都只能檢測抗RBC抗體的產(chǎn)生細(xì)胞，而且需要事先免疫，難以檢測人類的抗體產(chǎn)生情況?！ 。?）被動溶血空斑試驗：是指抗體形成細(xì)胞產(chǎn)生的Ig與SRBC上的抗原結(jié)合，在補體參與下出現(xiàn)溶血反應(yīng)。方法是將吸附有已知抗原的SRBC、待檢B細(xì)胞、補體及適量瓊脂糖液混合，傾注平皿，溫育1～3小時后，形成肉眼可見的溶血空斑。這種非紅細(xì)胞抗體性溶血空斑試驗可檢測SRBC上抗原相應(yīng)的抗體形成細(xì)胞，因此應(yīng)用范圍較廣 ：溶血空斑試驗主要用于測定藥物和手術(shù)等因素對體液免疫功能的影響，評價免疫治療或免疫重建后機體產(chǎn)生抗體的能力?！ 。ㄈ┟嘎?lián)免疫斑點試驗（ELISPOT） ?。河每乖还滔噍d體，加入待檢的抗體產(chǎn)生細(xì)胞，即可誘導(dǎo)抗體的分泌。分泌的抗體與包被抗原結(jié)合，在抗體分泌細(xì)胞周圍形成抗原抗體復(fù)合物，使細(xì)胞吸附于載體上，加入酶標(biāo)記的第二抗體與細(xì)胞上的抗體結(jié)合，通過底物顯色反應(yīng)的深淺，可測定出生成的抗體量，并可在鏡下計數(shù)著色的斑點形成細(xì)胞?！ ≡摲椒瓤蓹z測抗體分泌細(xì)胞，又可檢測抗體分泌量。其優(yōu)點是穩(wěn)定、特異、抗原用量少；可同時檢測不同抗原誘導(dǎo)的不同抗體分泌，并可定量；可檢測組織切片中分泌抗體的單個細(xì)胞?！ 。ㄋ模w內(nèi)實驗 B細(xì)胞功能減低或缺陷，可表現(xiàn)為體內(nèi)Ig和血型抗體量下降或缺如。常用于體內(nèi)抗體產(chǎn)生的特異性抗原有白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素、多價肺炎鏈球菌菌苗等。將適量抗原皮下或肌內(nèi)注射免疫，并于免疫前及免疫后3周分別采血，分離血清，測定受檢者免疫前后相應(yīng)抗體的效價，判斷受檢者體內(nèi)B細(xì)胞的功能?！ ∪?、NK細(xì)胞活性測定 NK細(xì)胞具有ADCC，能直接殺傷腫瘤細(xì)胞，故將單個核細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞共同培養(yǎng)，腫瘤細(xì)胞存活率低，NK細(xì)胞的活性則高。測定人NK細(xì)胞活性的靶細(xì)胞多用K562細(xì)胞株，而測定小鼠NK細(xì)胞活性則常采用YAC1細(xì)胞株?！ ◇w外檢測NK細(xì)胞活性的方法有形態(tài)學(xué)法、酶釋放法、放射性核素釋放法、化學(xué)發(fā)光法、流式細(xì)胞術(shù)法等。第二節(jié) 吞噬細(xì)胞功能檢測技術(shù) 大吞
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