【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 第七節(jié)：汞一、接觸機(jī)會(huì)①礦的開采與冶煉 ②電器和儀表制造 ③化學(xué)工業(yè)二、代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)（一）動(dòng)力學(xué)過(guò)程 無(wú)機(jī)汞主要是腎、其次肝、腦 有機(jī)汞主要是腦 其次肝、胃 尿汞 生物半減期2~3個(gè)月（二）生物監(jiān)測(cè)指標(biāo) ：反映近期接觸無(wú)機(jī)汞的量 ：用于診斷汞中毒觀察驅(qū)汞療效三、樣品采集、保存 ：①隨機(jī)取一次尿樣 ②加堿NaOH使?jié)舛冗_(dá)到40g/L，4℃可保存2周 樣 ①周末血 ②抗凝 4℃可以保存數(shù)天四、尿汞的測(cè)定——冷原子吸收法（一）堿性氯化亞錫還原法：在堿性條件及有Cd存在條件下，高濃度的SnCl2將有機(jī)汞及無(wú)機(jī)汞還原成元素，用測(cè)氯儀測(cè)定 ①汞標(biāo)準(zhǔn)液 ②基體尿液 正常人混合尿 ③NaOH液 ④DL半胱氨酸 將上述標(biāo)準(zhǔn)系列液加1滴磷酸三酯，加SnCl2CdSO4液立即通入空氣測(cè)定（載氣）：①磷酸三酯 消泡②Cd2+催化作用③DL半胱氨酸起穩(wěn)定劑的作用，防止無(wú)機(jī)汞吸附揮發(fā)；還可使有機(jī)汞不分解④測(cè)定讀數(shù)：讀取最大吸光度值（二）酸性SnCl2還原法：用KMnO4和濃H2SO4分解尿樣，使汞都轉(zhuǎn)化成Hg2+，用SnCl2還原成Hg，吹空氣導(dǎo)入測(cè)汞儀：尿液和標(biāo)準(zhǔn)系列液同樣用KMnO4和濃H2SO4分解：1）KMnO4和濃H2SO4加入的順序：先加KMnO4液再加濃H2SO4 2）測(cè)定前先對(duì)氣路系統(tǒng)進(jìn)行凈化；加SnCl2（酸性）測(cè)定空白水、吹氣觀察到儀器的響應(yīng)值為零為止 每次測(cè)定都使響應(yīng)值為0再測(cè)第二份第三章：非金屬化合物及其代謝產(chǎn)物 第一節(jié)：CO一、代謝及生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)： 呼吸道：進(jìn)入機(jī)體與血紅蛋白結(jié)合形成碳氧血紅蛋白（HbCO）形式導(dǎo)致機(jī)體組織缺O(jiān)2CO+Hb219。HbCO： 血液中HbCO形式 呼出氣 約有1%被氧化成CO2 1）血中碳氧血紅蛋白 2）呼出氣中CO三、樣品的采集與保存：1）采集班中（3h后）或班末呼出氣2）收集終末呼出氣：1）采集班中（3h后）或接觸最高濃度時(shí)的血2）抗凝3）密閉保存 4℃ 11周 4）最好取靜脈血 5）受試者不抽煙四、血中碳氧血紅蛋白的測(cè)定——分光光度法+原理：1）血中血紅蛋白的四種成分：Hb、HbOHbCO、HbMetSO2）HbCO，HbMet190。Na190。190。190。174。Hb 3）測(cè)定Hb和HbCO吸光度，最大吸收波長(zhǎng)分別為223432nm和420nm測(cè)定方法：1）摩爾吸光系數(shù)的測(cè)定：用吸光系數(shù)代替（1）過(guò)飽和HbO2液的制備，血樣用水和Tris液適量稀釋通入O2 30min（2）飽和HbO2液的制備：取（1）中2份通入N2（3）飽和HbCO液制備 ?。?）中2份，通入CO 10min（4）HbCO和Hb液制備 在（2）和（3）的溶液中加Na2S2O4固體（2）174。Hb（3）174。Hb，HbCO（5）分別測(cè)定420nm和430nm吸光度作為吸光常數(shù)（有四個(gè)值）SO2）血樣測(cè)定 稀釋血樣190。Na190。190。190。174。224HbHbCO 分別測(cè)420nm和430nm的吸光度3．計(jì)算 ：碳氧血紅蛋白（%）=A430K2A420K4A420(K2K4)A430(K1K3)A420：血樣在420nm吸光度 ；A430血樣在430nm吸光度 KK2是HbCO在420nm、430nm的吸光常數(shù) KK4是Hb在420nm、430nm的吸光常數(shù)：（1）所用氮?dú)夂脱鯕鈶?yīng)為高純度氮和高純度氧，不純氮和氧氣中含微量的CO，能干擾測(cè)定結(jié)果（2）連二亞硫酸鈉遇水易分解，在空氣中容易被氧化失效，應(yīng)以小瓶分裝使用，避免接觸空氣和水分（3）測(cè)定吸光系數(shù)必須采用新鮮血液，一次測(cè)定值在儀器波長(zhǎng)穩(wěn)定的情況下可以使用一段時(shí)間，但還應(yīng)定期核檢。（4）測(cè)試液應(yīng)盡量避免接觸空氣，及時(shí)測(cè)定，否則會(huì)造成結(jié)果偏低第二節(jié)CS2二、代謝及生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)（一）代謝吸收：呼吸道、皮膚生物轉(zhuǎn)化1）吸收后約70~90%轉(zhuǎn)化為多種代謝產(chǎn)物2）目前，接觸者中尿中已確認(rèn)的有3種：TTCA、2巰基2噻唑啉酮5，硫脲（其中TTCA研究較少，生減期為2h）3）排出： ~30%以原形從呼吸道排出%以原形從尿中排出（二）生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)尿中TTCA：班末尿呼出氣中CS2,目前研究較少三、樣品采集與保存四、尿中TTCA的測(cè)定——HPLC法樣品的處理：A、取離心后的尿樣 B、稀HCL酸化：乙醚提取C、離心分層，去上層醚液于試管中D、40℃用N2吹干加20ul甲醇定容說(shuō)明：A、尿樣經(jīng)離心后取上層尿液，易于分離B、此法從國(guó)外引進(jìn)，將原來(lái)的梯度洗脫改為等度洗脫。國(guó)外的梯度洗脫是用兩種配比的流動(dòng)相切換洗脫C、TTCA純品需自己純化五、呼出氣中CS2測(cè)定（一）GC法樣品處理：（1）、呼出氣中CS2濃度在測(cè)定范圍內(nèi)不需要處理，直接進(jìn)樣（2）、呼出氣中CS2低于測(cè)定濃度范圍需富集，用Tenron GC管富集色譜條件：固定相：OV17；檢測(cè)器：火焰光度檢測(cè)器說(shuō)明：（1）采集終末呼出氣，最后呼出的100ml（2）TenronGC管：2,6二苯基對(duì)苯醚的多孔聚合物，用于捕集/熱解吸（3）富集測(cè)定要求做富集空白測(cè)定：用180ml氣體（沖洗氣）注入空白Tenron GC管中，熱解吸后測(cè)定（二）檢氣管法：快速檢測(cè)法根據(jù)檢氣管中形成色帶長(zhǎng)度，粗略估計(jì)濃度特點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單、快速、成本低、精度差，相對(duì)偏差達(dá)20%30%以上 第四章芳香烴及其代謝產(chǎn)物 第一節(jié)苯一、代謝及生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)吸收：主要是呼吸道，其次是皮膚代謝與排泄1）吸入的苯約50%以上以原形從肺中排出，約10%以原形儲(chǔ)存在有機(jī)組織中2）約40%進(jìn)入血液循環(huán)，在肝中代謝，代謝產(chǎn)物50%70%的苯酚，6%為間苯二酚，2%為對(duì)苯二酚，還有極少量的粘糖酸等都以結(jié)合態(tài)從尿中排出 3）有極少量的苯以原形從尿中排出生物檢測(cè)指標(biāo)：1）尿酚A、因正常人尿中很有酚且個(gè)體差異大B、尿酚不是特異性指標(biāo) C、僅用于群檢2）呼出氣中的苯：在測(cè)定尿酚以后，測(cè)定呼出氣中苯作為確認(rèn)試驗(yàn) 3）尿苯：1993年有人提出用尿苯作苯接觸的生物接觸指標(biāo)，目前，還沒納入生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)二、呼出氣中苯的測(cè)定——GC法（一）原理：用塑料袋或采樣管收集呼出氣，呼出氣用N2吹入活性炭管吸附（78℃）280℃熱解吸，用載氣（N2）導(dǎo)入色譜儀，F(xiàn)ID檢驗(yàn)，通過(guò)六通閥切換完成（二）苯標(biāo)準(zhǔn)氣的配制：注入20ul苯于100ml玻璃配氣瓶中，臨用時(shí)從中抽取一定體積注入另一配氣瓶中稀釋成20ng/ml的苯標(biāo)準(zhǔn)氣（三）測(cè)定 ： 1）取苯標(biāo)準(zhǔn)氣（、）和樣品分別注入呼吸氣的采樣管中2）將采集管37攝氏度恒溫2h3）一端與六通閥連接，一端接N4）吹入冷阱（78℃）中的活性炭管5）熱解吸導(dǎo)入色譜儀三、尿酚的測(cè)定——GC法原理：尿樣加鹽酸加熱（90℃水?。┧猓儆靡颐演腿”椒幽驑硬杉c保存：班末尿50ml4℃2周樣品處理與測(cè)定： 1），1ml濃鹽酸于具塞試管中，90℃水浴1h2）、3）取上層醚液注入GC儀標(biāo)準(zhǔn)曲線：苯酚標(biāo)準(zhǔn)系列液用3ml乙醚提取色譜條件（1）液晶柱分離分離苯酚和鄰間對(duì)甲酚。（2）FFAP柱，分離苯酚和對(duì)甲酚說(shuō)明：（1）3ml乙醚萃取要避免乙醚揮發(fā)，分層后不是3ml，加乙醚補(bǔ)至3ml（2）可用內(nèi)標(biāo)志法定量四、甲苯、二甲苯（一）代謝及生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)1）代謝(1)甲苯 ①約15%~25%以原型呼出約1%從尿中排出②約80%代謝甲苯→[O]苯甲酸→馬尿酸馬尿酸排出的半減期為2~3人。(2)二甲苯①約5%原形從肺中呼出②60%~80%生物轉(zhuǎn)化主要終產(chǎn)物是甲基馬尿酸2）生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)(1)甲苯①尿中馬尿酸非特異性對(duì)群體判斷有一定的定義②呼出氣體中甲苯作為確認(rèn)(2)二甲苯 ：尿中馬尿酸正常人尿中無(wú)甲基馬尿酸特異性指標(biāo)（二）、尿中馬尿酸的測(cè)定—比色法（喹啉 苯磺酰氯比色法）（1）原理（2）樣品采集兩天后班末尿，按100+1體積比加氯仿（3）樣品處理與測(cè)定（4）注意事項(xiàng) ：試劑加入順序不能顛倒日光對(duì)顯色有破壞作用要避光放置（加入苯磺酰氯后）第四節(jié) 乙苯一、代謝及生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)（一）代謝與排泄只有少部分以原形從呼吸道排出。70%以上代謝后隨尿排出，主要代謝產(chǎn)物為扁桃酸60%苯酰甲酸25%（二）監(jiān)測(cè)指標(biāo)：呼出氣體中乙苯尿中扁桃酸（非特異性）二、生物監(jiān)測(cè)方法：呼出氣體中乙苯的測(cè)定GC法與呼出氣中笨的測(cè)定類似尿中扁桃酸的測(cè)定 HPLC法內(nèi)標(biāo)法定量 內(nèi)標(biāo)物 4羥基苯甲酸第五章 芳香族硝基和氨基化合物第一節(jié) 苯胺一、代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)吸收：主要通過(guò)呼吸道吸收，很容易經(jīng)皮膚吸收代謝 ①主要代謝途徑：苯胺—苯基羥胺—對(duì)氨基酚②接觸24h后，有15~60%轉(zhuǎn)化為對(duì)氨基酚、以結(jié)合態(tài)隨尿排出生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)：尿中對(duì)氨基酚二、尿中對(duì)氨基酚的測(cè)定（一）鹽酸萘乙二胺分光光度法原理：①尿中對(duì)氨基酚經(jīng)水解。萃取分離②重氮化偶合顯色。重氮化試劑：亞硝酸鹽偶和顯色劑：鹽酸萘乙二胺操作要點(diǎn)(1)樣品處理：①鹽酸酸化沸水浴水解約1人 ②萃取先用NaOH調(diào)中性，用乙酸乙酯萃取，再用鹽酸溶液反萃取。(2)重氮化偶合反映 ①重氮化，酸性條件下加過(guò)量的亞硝酸鹽、反應(yīng)10min②除過(guò)量的NaNO2液加氨基磺酸胺溶液至無(wú)色氣泡產(chǎn)生止放10min③偶合反應(yīng)顯色：加鹽酸萘乙二胺生成紫紅色(3)比色定量580nm 尿空白管作參比，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量說(shuō)明：(1)尿樣應(yīng)采集班末或班后尿，采樣前要詢問(wèn)受檢者是否服用藥物(2)重氮化反應(yīng)，NaNO2過(guò)量才能完全重氮化 但NaNO2對(duì)偶和顯色有干擾(3)重氮化反應(yīng)應(yīng)在盡量低溫條件下進(jìn)行，而偶合反應(yīng)在60176。為宜，水浴加熱前，偶合劑加入后充分混合（二）HPLC法1樣品處理：(1)水解，同上法(2)萃?、傧仍谒嵝詶l件下用乙酸乙酯萃取 ②再在中性條件下用乙酸乙酯萃取對(duì)氨基酚(兩次萃取除雜質(zhì))說(shuō)明：P96 用磷酸氫二鉀（弱堿）調(diào)節(jié)PH值第二節(jié)：硝基苯一、代謝產(chǎn)物和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)吸收：很容易從皮膚吸收，主要從呼吸道吸收。代謝：代謝產(chǎn)物有硝基酚和氨基酚還有少量苯胺，對(duì)硝基酚13—16%，對(duì)氨基酚10%。排出：①代謝產(chǎn)物與葡萄糖醛酸和硫酸結(jié)合，隨尿排出。②少量以原形級(jí)微量本案隨呼出氣排出。生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)尿中對(duì)硝基酚（特異性）二、尿中對(duì)硝基苯酚的測(cè)定P98（一）、鄰甲酚分光光度法原理：①尿樣經(jīng)酸水解。②苯取 先用混合有機(jī)溶劑取，再用氫氧化銨溶液反萃取。③還原用三氯化鈦將其還原成對(duì)氨基酚。④鄰甲酚顯色藍(lán)色600nm比色定量。樣品處理：1）水解 鹽酸酸化沸水浴1h。2）萃取 先用異戊醇—石油醚—乙醚萃取，再用3mol/L氯水反萃取。顯色測(cè)定 ①先加鄰甲酚，再加三氯化鈦溶液。②立即振搖至黃色沉淀變成淡黃色沉淀，過(guò)濾③30min后600nm測(cè)定吸光度。（二）HPLC法樣品處理 1）水解同上法。2）萃取 二氯甲烷萃取3次定容至20ml。說(shuō)明1）尿液采集后，盡快加鹽酸，10c以下運(yùn)輸。2）流動(dòng)相配比和流速可根據(jù)儀器性能調(diào)整。第三節(jié)：三硝基甲苯TNT2,4,6—三硝基甲苯 1）經(jīng)氧化還原化合等途徑代謝。2）以還原代謝途徑為主，主要代謝物4—硝基—2，6—二硝基甲苯。3）各種代謝產(chǎn)物以結(jié)合態(tài)隨尿排出。4—A —Ao樣品處理：1）鹽酸酸化沸水浴1h。2）萃取代謝 加固體碳酸氫鈉調(diào)PH7—8用甲苯萃?。驑?ml，甲苯1ml）：1）檢測(cè)器 ECD2）固定相：OV—17（固定液）3）柱溫 220℃程序升溫效果更好200℃（）10℃/min220℃5℃/min240℃第六章：鹵代烴化合物及其