【文章內(nèi)容簡介】 性氨基酸，全分子靜電荷為 3。 ③對角線電泳。 ， SDS 電泳時移動速度取決于分子的大小，分子越小移動的速度越快。 pH 的關(guān)系在于：首先影響酶活性中心氨基酸殘基的 R 基團(tuán)的解離狀態(tài)；其次影響酶的空間構(gòu)象。在 pH4 時酶活性最大，有可能酶的活性中心包含天冬氨酸和谷氨酸；在 pH11 時酶活性最大，有可能呢此酶的活性中心包含精氨酸、賴氨酸。 a, hydrolysis f, reduction of a double bond 水解反應(yīng)，比如降解一個雙鍵 b, Oxidative decarboxylation , g, isomerigation 氧化脫羧， c, phosphorolysis h, dehydration 磷酸水解 d, non oxidative decarboxylation i, condensation 非氧化脫羧 e, thiolysis j, phosphorylation 硫解作用 5. Δ G=*RT*log102/107=*620*5=7130 卡 /mol,7300/7130=1mol 6． T1 核糖核酸酶切割 RNA 后，產(chǎn)生 3’ 磷酸尿嘧啶為末端的單核苷酸或寡核苷酸； 蛇毒磷酸二酯酶切割 DNA/RNA，產(chǎn)生 5’ 單核苷酸 根據(jù)題意，所有 tRNA 3’ 末端堿基序列是 3’ ACC，整體序列為 3’ ACCUUU5’ ，且無插入序列和 EcoRI 位點，此探針與 EcoRI 切割的基因組 DNA 進(jìn)行 Southern 轉(zhuǎn)膜雜交，可能找到 1 條放射性條帶。 當(dāng)用標(biāo)記的 BamHI 作為探針與剛才的 EcoRI 切割的基因組 DNA 片段進(jìn)行 Southern 轉(zhuǎn)膜雜交，由于此探針和原有的 cDNA 雜交，說明 BamHI 片段探針的切點在這一基因序列之內(nèi)，仍然可以得到 1 條放射性條帶。 167。 北京大學(xué) 1999 年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué) 一． 名詞解釋 米氏常數(shù)（ Km）磷酸戊糖途徑 調(diào)節(jié)子 酶輔助因子 cori 循環(huán)與巴斯德效應(yīng) 滾動環(huán)復(fù)制 二． 結(jié)構(gòu)式 TPCK； 尼克酰胺 ； GC 配對 ； IP3 三． 填空 1, 蔗糖是否為還原糖 ________。 2，糖苷鍵的兩種類型 ________和 ________。 3， DNA 的一條鏈 序列為 GTCAATG，那么另一條鏈的序列為 ________。 4， ________常數(shù)表征酶的催化效率。 5，ρ因子的催化活性是 ________和 ________。 6，常見的遺傳缺陷病有 ________， ________， ________， ________；常見的放射性標(biāo)記的同位素是 ________， ________， ________， ________。 7， DNA 復(fù)制過程中動物是以 ________為能源， E. Coli 以 ________為能源。 8，生物體中產(chǎn)能最多的生化反應(yīng)過程是 ________。 9， ________發(fā)現(xiàn) TCA 循環(huán)， ________發(fā)現(xiàn)化學(xué)滲透學(xué)說。 10，真核生物 rRNA 拼接過程中左端的拼接點順序為 ________右端為 ________，切除 ________結(jié)構(gòu)。 11，生長激素是由 ________產(chǎn)生的。 12， E． Coli DNA Pol I 經(jīng)酶切，得到大小片段，其中大片段具有 ________酶活性和 ________酶活性，小片段具有 ________酶活性。 13，必需脂肪酸有 ________和 ________。 四． 回答 1， 作動力學(xué)曲線區(qū)分酶的可逆性抑制與不可逆抑制 ？ 2， 比較 ATP 與 ppi 在磷酸鍵及生物學(xué)功能方面的異同。 3， 真核生物至少需要 31 種 tRNA 才能識別 61 種密碼子，而線粒體中 tRNA只有 22種，為什么？ 4， 闡明衰減子對操縱子的調(diào)控。 5， 糖酵解和糖異生過程中涉及的不可逆反應(yīng)和限速步驟。 五． 計算 3， DNA 半保留復(fù)制。 15NDNA 在 14N 培養(yǎng)基上培養(yǎng)一代后， 14NDNA 與 14N15NDNA 雜交分子之比是多少？ 4， 正常 DNA 的超螺旋密度為 ，在無拓?fù)洚悩?gòu)酶條件下當(dāng)復(fù)制到超螺旋密度為 時，由于正超螺旋的阻力而不能繼續(xù)復(fù)制，求 此時的復(fù)制百分?jǐn)?shù)。 5， 2ADP===ATP+AMP， 已知 [ADP] [AMP] [ATP]求： 1，該反應(yīng)的能荷。 2， Keq（各濃度為平衡態(tài)濃度）。 6， L=T+W,若 a=0,05，則 DNA 可以復(fù)制的百分比。 參考答案： 一、 ：即 Km，是酶的特征常數(shù)，當(dāng)反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時底物的濃度。 ：糖分解代謝途徑之一， 6磷酸葡萄糖首先脫氫、脫羧轉(zhuǎn)變?yōu)?5磷酸核糖，經(jīng)過一系列分子重排，產(chǎn)生不同的磷酸單糖，進(jìn)入糖酵解。 ：受一種調(diào)節(jié)蛋白控制的幾個操縱子構(gòu)成的調(diào)節(jié) 系統(tǒng)。 ：酶分子中非蛋白質(zhì)組成成分，包括維生素和無機(jī)離子等。 5. cori 循環(huán)與巴斯德效應(yīng) ：在耗氧的同時葡萄糖消耗減少，乳酸堆積終止的現(xiàn)象稱為巴斯德效應(yīng)。肌肉厭氧分解產(chǎn)生的乳酸進(jìn)入血液，經(jīng)肝臟轉(zhuǎn)變?yōu)楸釁⑴c糖異生后再變?yōu)槠咸烟?，葡萄糖再次?jīng)過血液送回到肌肉的過程。 6. 滾動環(huán)復(fù)制 ：復(fù)制時首先形成共價閉環(huán)雙鏈，然后正鏈切開，產(chǎn)生游離的 3’ 羥基和 5’ 磷酸末端， 5’ 磷酸末端細(xì)胞膜結(jié)合固定， DNA 聚合酶以環(huán)狀負(fù)鏈為模板，從正鏈的 3’ 羥基末端加入脫氧核苷酸，使新生鏈延長，通過滾動合成新的 正鏈。 二、 TPCK： 尼克酰胺 ：維生素 pp； GC 配對 ： G 和 C 形成 3 個氫鍵； IP3：肌醇三磷酸 三、 ； ， O糖苷鍵； ’ CAGTTAC5’ ； ； ， NTPase 活性； ，苯丙尿酮癥，白化病，糖尿病， 3H,32P,32S,131I,14C； ，三磷酸核苷； ； ， Mitchell； ， CUCUCU，內(nèi)含子；； ， 3’ 5’ 外切核酸酶， 5’ 3’ 外切核酸酶； ，亞麻酸 四、 和 ppi 的比較： ATP 含有 3 個磷酸酯鍵， ppi 有一個， ATP 末端的 2 個磷酸酯鍵水解放出較多的能量，生物需要能量時 ATP 水解， ppi 為無機(jī)物，不具有生物功能。 3.（ 1）線粒體 DNA 編碼的蛋白質(zhì)數(shù)量少于核基因，大部分線粒體蛋白質(zhì)是由核基因編碼的。 （ 2）線粒體的遺傳密碼不同于細(xì)胞核。 4. 衰減子：大腸桿菌色氨酸操縱子中一段 DNA 序列，既是終止信號，也是調(diào)節(jié)信號，只有當(dāng)缺少色氨酸時，該操縱子中的結(jié)構(gòu)基因才能通過衰減子而進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。 色氨酸操縱子 mRNA 的前導(dǎo)區(qū)編碼一個 14 肽， 前導(dǎo)區(qū)的 RNA以 2和 4 配對的形式出現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄停止在終止信號區(qū)。當(dāng)環(huán)境中缺少色氨酸，前導(dǎo)肽不能形成，但有其他氨基酸時， TrptRNA 不能形成，前導(dǎo)肽翻譯到色氨酸密碼子時候停止，前導(dǎo)區(qū)的 3 配對，終止信號不能形成，轉(zhuǎn)錄繼續(xù)。當(dāng)色氨酸存在或者過量時，前導(dǎo)肽正常合成， 4 配對，使得核糖體在區(qū)段 2 之間結(jié)合，轉(zhuǎn)錄終止。 3 個步驟：（ 1）丙酮酸 — 磷酸烯醇式丙酮酸； （ 2） 1， 6二磷酸果糖 — 6磷酸果糖；（ 3） 6磷酸葡萄糖 葡萄糖 五、 和 14N15N 的比值為 0： 2 =（ +） /==% 167。 北師大 20xx 年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué) 一 . 名詞解釋 (2/20) 1. 亞基； 2. 酶的必須基團(tuán)； 3. 修飾核苷； 4. 酵解； 5. 氧化磷酸化 6. DNA 的半不連續(xù)復(fù)制； 7. 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)； 8. 核酸雜交； 9. 分子伴侶； 10. 增強(qiáng)子 二 . 填空 (1/20) 1. 穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體狀態(tài)的因素是蛋白質(zhì)分子上的 ________及 ________. 2. 氫鍵有兩個主要特征 ____________和 _____________. 3. 兩條相當(dāng)伸展的肽鏈或同一條肽鏈的兩個伸展的片斷之間形成氫鍵的二級結(jié)構(gòu)稱為 _______. 4. 使酶具有高催化效應(yīng)的因素有 _________,__________,_________和 _________. 5. tRNA 的分子 339。端的堿基序列是 ___________. 6. 酵母 DNA 按摩爾計含有 %的 T,則 A 為 _______,G 為 ________和 C 為 __________. 7. 真核細(xì)胞核小體的組成是 __________和 ______________ 8. 核 酸變性后可發(fā)生 ___________效應(yīng) . 9. 破壞 a螺旋結(jié)構(gòu)的氨基酸是 _________ 10. 與 mRNA 密碼子 ACG 相對應(yīng)的 tRNA 的反密碼子是 ___________ 11. 內(nèi)含子是指 _____________ 12. 有機(jī)體的 _________代謝和 _____________代謝是密切聯(lián)系在一起的 13. ATP 在細(xì)胞的產(chǎn)能和煦能過程中起著重要的 _________作用 14. 電子傳遞鏈在原核細(xì)胞存在于 _________上 ,在真核細(xì)胞存在于 ________內(nèi)膜上 15. 磷酸果糖 激酶是酵解過程最關(guān)鍵的 _________酶 16. TCA 循環(huán)是生物體內(nèi)糖 ,脂 ,蛋白質(zhì)代謝的 _________ 17. 生物體內(nèi)卵磷脂合成的兩種不同途徑是 ____________和 ____________ 18. 在靈長類動物中 ,嘌呤分解代謝的最終產(chǎn)物是 ______________ 19. 脫氧核苷酸的生物合成是在 _____________的基礎(chǔ)上還原生成的 20. 在真核生物中 DNA 復(fù)制的主要酶是 ____________ 21. 酶的磷酸化和脫磷酸化作用是 __________共價修飾調(diào)節(jié)酶活性 的一種重要方式 . 22. 操縱子包括 _______,__________和 __________. 23. 所有原核生物的終止子在終止點之前均有一個 _____,其產(chǎn)生的 RNA 可形成 _______. 24. 在轉(zhuǎn)錄過程中 RNA 聚合酶全酶的 a因子負(fù)責(zé) __________,核心酶負(fù)責(zé) ________. 25. DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶是與 __________有關(guān)的酶 三 . 問答題 (40 分 ) 1. 用 1mol 酸水解五肽 ,得兩個谷氨酸 ,一個賴氨酸；用胰蛋白酶裂解成兩個碎片 ,在 Ph=7 時電泳 ,碎片之一向陽極 ,另一個 向陰極；碎片之一用 DNP 水解得 DNP谷氨酸；原五肽用胰蛋白酶裂解產(chǎn)生兩個二肽和一個游離的谷氨酸 ,寫出五肽順序 (5 分 ) 2. 簡述如何用酶的競爭性抑制劑的理論來尋找或合成控制代謝的藥物 (5 分 ) 3. 什么是遺傳學(xué)中心法則 ?為什么說阮病毒的發(fā)現(xiàn)是對此法則提出了挑戰(zhàn) ?(5 分 ) 4. 在動物體內(nèi)脂肪酸能轉(zhuǎn)變成糖嗎 ?為什么 ?(4 分 ) 5. 簡述原核生物與真核生物蛋白質(zhì)合成的區(qū)別 (6 分 ) 6. 簡述真核生物的基因表達(dá)調(diào)控 (6 分 ) 7. 1mol C6=C7 14 碳不飽和單烯酸徹底氧化分解生成 CO2 和 H2O 共產(chǎn)生多少 mol ATP?(5 分 ) 8. 大腸桿菌僅在有充足的丙氨酸提供能量的情況下能存活嗎 ?為什么 ? 參考答案： 一、 。 。 5 種正常的核苷酸之外，有些核苷分子發(fā)生甲基化、環(huán)上原子取代后形成的核苷。 ，葡萄糖變成丙酮酸，并釋放能量合成 ATP。 ，伴隨呼吸鏈上的電子傳遞給氧并生成水，合成 ATP。 復(fù)制時，前導(dǎo)鏈的合成是連續(xù)的，后隨鏈的合成是先合成岡崎 片段，然后在連接酶的作用下連接成完整的 DNA 鏈。 DNA 為模板，在 Taq 聚合酶作用下，在引物后快速合成 DNA 過程。 DNADNA、 DNARNA 二種，不同來源的核酸單鏈通過堿基互補(bǔ)形成雙鏈的過程。 。 DNA 中促進(jìn) DNA 轉(zhuǎn)錄的局部序列，屬于基因轉(zhuǎn)錄的順式元件。 二、 、水化層； ，飽和性； 片層； ，酶使底物發(fā)生形變，共價催化，酸堿催化； ’ ACC5’ ； %， %， %； ，組蛋白； ； 、脯氨酸； ； 翻譯后要除去部分在 DNA 中對應(yīng)的序列； ，合成代謝； ； ，線粒體，葉綠體； ； ； ，節(jié)約利用途徑； ； ； 聚合酶α； ； ，結(jié)構(gòu)基因，調(diào)節(jié)元件； ，發(fā)夾結(jié)構(gòu)； ，合成 RNA； 復(fù)制時雙鏈解開 三、 賴 谷 精 谷 ，或者與酶誘導(dǎo)底物形變的結(jié)構(gòu)相似，增大酶的 Km。 應(yīng)用這個原理人們發(fā)現(xiàn)磺胺藥，磺胺藥和維生素 B11 相似。 ： DNA 自我復(fù)制，轉(zhuǎn)錄成 RNA， RNA 指導(dǎo)翻譯蛋白質(zhì)合成。阮病毒的出現(xiàn)挑戰(zhàn)了這個原則，因為阮病毒是蛋白質(zhì)發(fā)生傳染，將正常的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槿畈《尽? ，動物體內(nèi)不存在乙醛酸循環(huán)。正常情況下，乙酰 CoA 進(jìn)入三羧酸循環(huán)產(chǎn)生二氧化碳和水。 5. 原核生物 真核生物 核糖體 70S，轉(zhuǎn)錄和翻譯同時進(jìn)行 80S，轉(zhuǎn)錄和翻譯分開 底物 20 種氨基酸 20 種氨基酸 搬運(yùn) tRNA tRNA 模板和起始密碼