【文章內(nèi)容簡介】 容量(r243。ngli224。ng)分析法的特點(diǎn),第九十六頁，共二百三十六頁。,〔二〕容量(r243。ngli224。ng)分析法的計(jì)算,1. 滴定度,2. 百分含量(h225。nli224。ng)的計(jì)算 原料藥,第九十七頁，共二百三十六頁。,〔1〕原料藥，直接(zh237。jiē)滴定法含量測定結(jié)果的計(jì)算：,第九十八頁，共二百三十六頁。,〔2〕原料藥，直接滴定法，有空白(k242。ngb225。i)校正的計(jì)算：,第九十九頁，共二百三十六頁。,〔3〕原料藥，剩余滴定法，有空白試驗(yàn)，含量(h225。nli224。ng)測定結(jié)果的計(jì)算：,第一百頁，共二百三十六頁。,〔4〕原料藥，剩余滴定法，無空白試驗(yàn)，含量測定(c232。d236。ng)結(jié)果的計(jì)算：,第一百零一頁，共二百三十六頁。,光譜分析(ɡuānɡ pǔ fēn xī)法,紫外—可見(kěji224。n)分光光度法 UV—Vis,原子吸收(xīshōu)分光光 度法 AAS,熒光分析法,二、光譜分析法,第一百零二頁，共二百三十六頁。,〔一〕紫外—可見(kěji224。n)分光光度法,根據(jù)物質(zhì)對波長(bōch225。ng)為200～760 nm這一范圍的光吸收特性建立起來的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法。,第一百零三頁，共二百三十六頁。,1. 根本原理,物質(zhì)對單色光吸收強(qiáng)弱(qi225。nɡ ru242。)與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度關(guān)系定律,〔1〕 Lambert Beer定律(d236。nglǜ),第一百零四頁，共二百三十六頁。,〔2〕 吸收系數(shù),C以“g/100ml〞為單位(dānw232。i)的吸收系數(shù)。,其物理意義為：當(dāng)吸光物質(zhì)溶液(r243。ngy232。)濃度為1%〔1g/100ml〕，液層厚度為1cm時(shí)的吸光度。,百分吸收系數(shù),第一百零五頁，共二百三十六頁。,摩爾(m243。 ěr)吸收系數(shù) ?,C以“mol/L〞為單位(dānw232。i)的吸收系數(shù)。,第一百零六頁，共二百三十六頁。,〔1〕定期全面檢定 〔2〕測定前對波長進(jìn)行(j236。nx237。ng)校正 汞燈、氘燈、鈥玻璃,2. 儀器(y237。q236。)的校正和檢定,第一百零七頁，共二百三十六頁。,〔3〕吸光度準(zhǔn)確度的檢定(jiǎnd236。ng) 重鉻酸鉀的硫酸溶液 〔4〕雜散光 碘化鈉和亞硝酸鈉,第一百零八頁，共二百三十六頁。,3. 吸光度(guāngd249。)的測定方法,〔1〕對溶劑(r243。ngj236。)的要求,〔2〕測定波長(bōch225。ng)確實(shí)證,第一百零九頁，共二百三十六頁。,紫外—可見分光光度法測定時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm的石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰波長(bōch225。ng)177。2nm以內(nèi)測試幾個(gè)點(diǎn)的吸光度，或由儀器在規(guī)定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確。除另有規(guī)定外，吸收峰波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長177。2nm以內(nèi)，并以吸光度最大的波長作為測定波長。,第一百一十頁，共二百三十六頁。,〔3〕供試品溶液濃度(n243。ngd249。)應(yīng)使測得的吸光度在0.3～0.7之間。,第一百一十一頁，共二百三十六頁。,4. 在含量(h225。nli224。ng)測定中的應(yīng)用,〔1〕吸收系數(shù)法〔絕對(ju233。du236。)法〕,吸光度(guāngd249。),百分吸收系數(shù),液層厚度，cm，如無特別注明，L=1cm,第一百一十二頁，共二百三十六頁。,〔2〕對照(du236。zh224。o)法,第一百一十三頁，共二百三十六頁。,條件(ti225。oji224。n)：,A. 待測物與對照品在相同 條件(ti225。oji224。n)下測定,B. 待測物與對照品濃度(n243。ngd249。)相近,〔3〕計(jì)算分光光度法,第一百一十四頁，共二百三十六頁。,5. 百分含量(h225。nli224。ng)的計(jì)算 原料藥 〔1〕吸收系數(shù)法,第一百一十五頁，共二百三十六頁。,〔2〕對照(du236。zh224。o)法,第一百一十六頁，共二百三十六頁。,6. 特點(diǎn)(t232。diǎn),UV—Vis 靈敏度高，操作簡便、快速、儀器(y237。q236。)價(jià)格較低廉，因此應(yīng)用廣泛。但由于儀器(y237。q236。)和操作的原因，誤差較容量分析法大，除甾體激素類藥物和某些抗生素外，原料藥盡可能防止使用。,第一百一十七頁，共二百三十六頁。,〔二〕熒光(y237。ngguāng)分析法,物質(zhì)受光照射時(shí)，在吸收某種波長光的同時(shí)又發(fā)射出比原來波長更長的光，激發(fā)光停止照射，光線(guāngxi224。n)隨之消失，這種光稱為熒光。熒光為發(fā)射光。利用熒光的物理特性進(jìn)行定性與定量測定的方法稱為熒光分析法。,1. 熒光(y237。ngguāng)及熒光(y237。ngguāng)分析法,第一百一十八頁，共二百三十六頁。,2. 熒光(y237。ngguāng)激發(fā)光譜與熒光(y237。ngguāng)發(fā)射光譜,以熒光發(fā)射(fāsh232。)光波長為橫坐標(biāo)，發(fā)射(fāsh232。)光強(qiáng)度〔熒光強(qiáng)度〕為縱坐標(biāo),熒光發(fā)射光譜(fā sh232。 ɡuānɡ pǔ)〔熒光光譜〕,第一百一十九頁，共二百三十六頁。,熒光(y237。ngguāng)激發(fā)光譜〔激發(fā)光譜〕,激發(fā)(jīfā)光波長為橫坐標(biāo)，發(fā)射光強(qiáng)度〔熒光強(qiáng)度〕為縱坐標(biāo),第一百二十頁，共二百三十六頁。,3. 熒光(y237。ngguāng)光度計(jì),〔1〕激發(fā)光源 汞燈(ɡǒnɡ dēnɡ)、氙燈,〔2〕單色器 兩個(gè)(liǎnɡ ɡ232。)單色器,〔3〕樣品池 低熒光玻璃或石英池,〔4〕檢測器 光電倍增管，在與激發(fā)光源成直角的方向檢測熒光,第一百二十一頁，共二百三十六頁。,4. 在含量(h225。nli224。ng)測定中的應(yīng)用,當(dāng)激發(fā)光強(qiáng)度、波長、所用溶劑及溫度等條件一定時(shí)，在較稀濃度(n243。ngd249。)范圍內(nèi)藥物的熒光強(qiáng)度與溶液中該物質(zhì)的濃度成正比。,第一百二十二頁，共二百三十六頁。,對照(du236。zh224。o)品比較法,R∝C,供試品溶液試劑空白(k242。ngb225。i)的熒光強(qiáng)度,第一百二十三頁，共二百三十六頁。,片劑含量(h225。nli224。ng)測定結(jié)果的計(jì)算,第一百二十四頁，共二百三十六頁。,片劑(pi224。n j236。)，熒光法,第一百二十五頁，共二百三十六頁。,5. 特點(diǎn) 熒光法最主要(zhǔy224。o)的優(yōu)點(diǎn)是測定靈敏度高，選擇性好。,第一百二十六頁，共二百三十六頁。,利用(l236。y242。ng)物質(zhì)在流動相與固定相兩相中分配系數(shù)差異而得以別離，并在檢測中能檢出其信號，從而到達(dá)別離、分析的一類分析方法。,〔一〕色譜法,三、色譜法,第一百二十七頁，共二百三十六頁。,色譜法是一種物理或物理化學(xué)(w249。 lǐ hu224。 xu233。)別離分析方法。具有高靈敏度、高選擇性、高效能、分析速度快及應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。,第一百二十八頁，共二百三十六頁。,〔二〕常用(ch225。nɡ y242。nɡ)的色譜法,色譜(s232。 pǔ) 分析法,高效(ɡāo xi224。o)液相色譜法 HPLC,氣相色譜法 GC,第一百二十九頁，共二百三十六頁。,1. GC 常用氣—液分配(fēnp232。i)色譜，硅藻土為載體，涂高沸點(diǎn)固定液或化學(xué)鍵和相，常用N2作流動相。,第一百三十頁，共二百三十六頁。,2. HPLC 〔1〕液—固吸附(xīf249。)色譜法 固定相為硅膠等吸附(xīf249。)劑、流動相是烷烴作底劑參加適量極性調(diào)整劑,第一百三十一頁，共二百三十六頁。,〔2〕液—液分配(fēnp232。i)色譜法 固定相幾乎全是化學(xué)鍵合相,第一百三十二頁，共二百三十六頁。,流動相極性小于固定相極性。固定相為氰基或氨基健合硅膠，流動相是烷烴作底劑參加適量極性調(diào)整劑，用于別離溶于有機(jī)溶劑的極性及中等(zhōngděng)極性的分子型物質(zhì),① 正相色譜法,第一百三十三頁，共二百三十六頁。,流動(lid242。ng)相極性大于固定相極性。固定相為十八烷基硅烷健合硅膠〔ODS或C18柱〕或辛烷基硅烷健合硅膠〔C8柱〕，流動相是甲醇—水或乙腈—水，主要用于別離非極性至中等極性的各類分子型化合物,② 反相色譜法,第一百三十四頁，共二百三十六頁。,調(diào)整流動(lid242。ng)相pH值抑制組分解離，用于別離有機(jī)弱酸、弱堿,③ 反相離子(l237。zǐ)對色譜法,流動相中參加離子(l237。zǐ)對試劑，用于別離有機(jī)酸、堿、鹽,④離子抑制色譜法,第一百三十五頁，共二百三十六頁。,〔三〕高效(ɡāo xi224。o)液相色譜法,1. 對儀器的一般(yībān)要求,第一百三十六頁，共二百三十六頁。,指用規(guī)定的對照品對色譜(s232。 pǔ)系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)符合要求。包括理論板數(shù)〔n〕、別離度〔R〕、重復(fù)性和拖尾因子〔T〕等四個(gè)指標(biāo)。,2. 系統(tǒng)(x236。tǒng)適用性試驗(yàn),第一百三十七頁，共二百三十六頁。,〔1〕理論(lǐl249。n)板數(shù),色譜(s232。 pǔ)柱的理論板數(shù)越多，柱效越高。,第一百三十八頁，共二百三十六頁。,〔2〕別離度 藥典(y224。odiǎn)要求 R 應(yīng)1.5,第一百三十九頁，共二百三十六頁。,用對照溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，峰面積RSD應(yīng)≤2.0%；或配制相當(dāng)于80%、100%、120%的對照液，參加(jiār249。)規(guī)定的內(nèi)標(biāo)，分別進(jìn)樣3次，計(jì)算平均校正因子，RSD亦應(yīng)≤2.0%。,〔3〕重復(fù)性,第一百四十頁，共二百三十六頁。,〔4〕拖尾因子,峰高法定量(d236。ngli224。ng)時(shí)T應(yīng)在0.95～1.05之間,第一百四十一頁，共二百三十六頁。,〔1〕內(nèi)標(biāo)法加校正因子測定供試品中主成分(ch233。ng f232。n)含量,方法(fāngfǎ),內(nèi)標(biāo)物+對照品→對照溶液(r243。ngy232。)，進(jìn)樣，測定，計(jì)算校正因子,3. 在含量測定中的應(yīng)用,第一百四十二頁，共二百三十六頁。,供試品+內(nèi)標(biāo)→供試品溶液，進(jìn)樣，測定供試品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積(mi224。n jī)或峰高，計(jì)算含量,第一百四十三頁，共二百三十六頁。,第一百四十四頁，共二百三十六頁。,〔2〕外標(biāo)法測定(c232。d236。ng)供試品主成分含量,供試品→供試品溶液(r243。ngy232。) 對照品→對照品溶液 進(jìn)樣，測定，計(jì)算含量,第一百四十五頁，共二百三十六頁。,缺點(diǎn)：不易準(zhǔn)確控制(k242。ngzh236。)進(jìn)樣量，宜用定量環(huán)進(jìn)樣,第一百四十六頁，共二百三十六頁。,HPLC 主要用于抗生素、生化(shēnɡ hu224。)藥品及含雜質(zhì)干擾測定的化學(xué)藥品。廣泛用于藥物制劑及多