【文章內(nèi)容簡介】 組織切片的樣品，應(yīng)連帶部分健康組織。淋巴結(jié)、心、肝、脾、肺、腎，不論有無病變，一般均應(yīng)采取。3．合理采樣 動(dòng)物群體發(fā)病，至少采取5頭（只）動(dòng)物的病料。每一種樣品應(yīng)有足夠的數(shù)量，除確保本次實(shí)驗(yàn)用量外，以備必要的復(fù)檢用。4．無菌采樣 樣品采集全過程應(yīng)無菌操作，尤其是供微生物學(xué)檢查和血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的樣品。采樣部位、采樣用具、盛放樣品的容器均需滅菌處理。5．安全采樣 在采樣過程中，采樣人員要注意安全，防止感染；同時(shí)防止病原擴(kuò)散而造成環(huán)境污染。第三篇：動(dòng)物檢疫學(xué)考題及答案名詞解釋1動(dòng)物檢疫按照國家法規(guī)對(duì)各種動(dòng)物及其產(chǎn)品進(jìn)行的疫病檢查。通過動(dòng)物檢疫，對(duì)可疑或已證實(shí)的疫病對(duì)象實(shí)行強(qiáng)制隔離，或作出適當(dāng)處理，目的是防止動(dòng)物傳染病的傳播，保障畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民健康。2國境檢疫又稱進(jìn)出境檢疫、口岸檢疫。包括進(jìn)境檢疫、出境檢疫、過境檢疫、攜帶及郵寄檢疫和運(yùn)輸工具檢疫。3藍(lán)舌?。˙T）是由藍(lán)舌病病毒一起反芻動(dòng)物的一種急性、非接觸性傳染病。以高熱，口腔、鼻腔、胃腸道黏膜水腫、潰瘍性炎癥以及舌、齒齦充血、瘀血呈青紫色等為主要特征。4炭疽 是由炭疽桿菌引起的各種家禽、野生動(dòng)物和人共患的一種急性、熱性、敗血性傳染病。以敗血癥變化、脾臟顯著腫大、血液凝固不良、皮下和漿膜下有出血性膠樣侵潤為特征。5豬瘟（CSF)是由豬瘟病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性和高度致死性傳染病。以高熱稽留和廣泛性出血、梗死、壞死等為特征。又被稱為古典豬瘟或爛腸瘟。6個(gè)體檢疫 個(gè)體檢疫是指對(duì)群體檢疫中檢出的可疑病態(tài)動(dòng)物進(jìn)行系統(tǒng)的個(gè)體臨診檢查。其目的在于初步鑒定動(dòng)物是否患病、是否為檢疫對(duì)象，然后在根據(jù)需要進(jìn)行必要的實(shí)驗(yàn)室檢疫。7馬傳染性貧血 馬傳染性貧血病簡稱馬傳貧(EIA),由反錄病毒科慢病毒亞科中的馬傳染性貧血病病毒引起的馬、騾、驢傳染病。其特征主要為間歇性發(fā)燒、消瘦、進(jìn)行性衰弱、貧血、出血和浮腫；在無燒期間則癥狀逐漸減輕或暫時(shí)消失。8豬水皰?。⊿VD)是由豬水皰病病毒引起豬的一種傳播迅速、流行性強(qiáng)、發(fā)病率高的急性接觸性傳染病。以蹄、口、鼻鏡和乳頭周圍皮膚出現(xiàn)水皰為特征。9非洲豬瘟(ASF)是由非洲豬瘟病毒引起的急性、高傳染病性和高致死病性疾病，曾被稱為東非豬瘟和疣豬病。以高熱、高死亡率、短病程、皮膚發(fā)紺和內(nèi)臟器官廣泛性出血為主要特征。10非洲馬瘟(AHS)是由非洲馬瘟病毒引起馬屬動(dòng)物的一種急性或亞急性傳染病。在臨床上以發(fā)熱、肺和皮下組織水腫及臟器出血為特征。11牛瘟（RP)是由牛瘟病毒引起牛的一種急性、烈性、敗血性、高度接觸性傳染病，又被稱為東方牛疫或“爛腸瘟”、“膽脹瘟”、“百葉干”等俗名。本病以黏膜特別是消化道黏膜變性壞死、出血性素質(zhì)、病程短、死亡率高為主要特征。12牛傳染性胸膜肺炎 即牛肺疫（CBP)，是由絲狀支原體絲狀亞種引起牛的接觸性、地方性傳染病。以肺小葉間質(zhì)淋巴管漿液滲出性纖維素性炎和漿液纖維素性胸膜肺炎為主要特征。13牛海綿狀腦?。˙SE）亦即瘋牛病，是由癢病相關(guān)因子引起牛的一種致死性傳染病。以潛伏期長，發(fā)病突然，病程緩慢且呈進(jìn)行性，精神狀態(tài)失常，共濟(jì)失調(diào)，后肢癱瘓，感覺過敏，腦灰質(zhì)海綿狀水腫和神經(jīng)元細(xì)胞空泡化為特征。病牛最終死亡。14癢病 是由一種朊病毒（即羊癢病因子）引起綿羊和山羊的慢性進(jìn)行性、致死性的傳染性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其俗稱為“驢跑病”、“瘙癢病”、“震顫病”或“搖擺病”。以潛伏期長、劇癢、中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性、共濟(jì)失調(diào)及高死亡率為特征。15禽流行性感冒（高致病性禽流感）禽流行性感冒（簡稱禽流感）又稱真性雞瘟，歐洲雞瘟，是由A型流感病毒引起禽類的一種急性、高度致死性的傳染病。其特征是發(fā)熱、頭面水腫、呼吸系統(tǒng)癥狀和敗血癥。填空國內(nèi)檢疫范圍中需檢的動(dòng)物指家畜，家禽和人工飼養(yǎng)、合法捕獲的其他動(dòng)物。國內(nèi)檢疫馬、牛一類疫有：口蹄疫，牛瘟，牛海綿狀腦病，非洲馬瘟, 牛肺疫，牛結(jié)節(jié)珍外檢主要包括進(jìn)境檢疫，出境檢疫，過境檢疫，攜帶或郵寄檢疫及運(yùn)輸工具檢疫等。簡答題禽流感的主要病理變化答：1頭部嚴(yán)重水腫；腿鱗部皮膚出血；胰腺出血或有壞死；腺胃、肌胃出血；5全身皮膚、漿膜、黏肌肉、心肌出血點(diǎn)明顯雞新城疫的主要病理變化答：（1）腺胃有紅色乳頭狀突出或有出血線（2）腸道壞死，有圓形腐爛（3）脾臟：有白色小壞死點(diǎn)，腫大或不腫大，又出血（4）呼吸道有出血，有痰液（5）全身癥狀，出血?？谔阋叩闹饕±碜兓穑簭难装Y紅腫發(fā)展為水皰，繼而形成爛斑和潰瘍，有的成為黑棕色痂塊乳房潰爛出血性腸炎、急性心肌炎犬瘟熱的主要臨床癥狀答：雙相熱型發(fā)熱。呼吸道炎癥：眼、鼻有水樣分泌物；氣管、肺出現(xiàn)炎癥。消化道炎癥：干嘔、腹瀉。皮膚出現(xiàn)水皰。足墊角質(zhì)化。咬肌間愈性顫抖。豬瘟的主要臨床癥狀（p120121）答：分為典型豬瘟和非典型豬瘟典型豬瘟：最急性型：突然高熱稽留，難診斷急性型：（1）體溫升高、呼吸困難、食欲下降、精神萎靡；（2）拉稀、便秘、嘔吐；（3）眼臉粘封，眼結(jié)膜炎；（4）神經(jīng)癥狀：口吐白沫、抽搐；（5）小豬仔惡寒、鉆草窩；（6）母豬有臨產(chǎn)表現(xiàn)（7）皮膚多有點(diǎn)狀出血。亞急性型：癥狀同急性但緩和慢性型：貧血消瘦、生產(chǎn)力下降非典型或溫和型豬瘟：癥狀緩和，不表現(xiàn)特征性癥狀；體溫不規(guī)則交替上升，消瘦，貧血，結(jié)膜發(fā)炎、全身衰弱，運(yùn)動(dòng)失調(diào)，便秘和腹瀉交替出現(xiàn)，皮膚出現(xiàn)紫斑、疹塊或壞死痂皮，有的關(guān)節(jié)腫大，病程長，病死率低，不死者常成為僵豬。6羊藍(lán)舌病的主要臨床癥狀答：發(fā)熱，病初體溫高達(dá)41℃左右，稽留25d。舌發(fā)烏，黏膜發(fā)紺，呈藍(lán)紫色，腫大。嘴巴：上、下唇高度水腫，并蔓延至面部、耳根、頸部。眼、鼻：眼睛紅腫，鼻有黏液膿性分泌物，流鼻涕。乳房：有炎癥、腫脹、紅腫、乳汁減少蹄腫脹，有跛行。腸道：腹瀉，便中常帶血豬鏈球菌病的主要病理變化。答：最急性型：口、鼻流出泡沫樣液體,氣管、支氣管充血,充滿帶泡沫液體。急性型：1皮膚有出血點(diǎn),皮下組織廣泛出血,鼻粘膜充血、出血,肺腫大、水腫、出血。2全身淋巴結(jié)腫大出血。脾腫大呈暗紅色或蘭紫色,柔軟,質(zhì)脆。3胃和小腸粘膜有不同程度的充血和出血。心內(nèi)膜、心耳有彌漫性的出血點(diǎn)。4腎腫大,被膜下可見出血點(diǎn),胸腹腔有大量積液,有時(shí)有纖維素滲出。5有神精癥狀的,大腦膜充出血,嚴(yán)重的淤血,少數(shù)腦膜下積液,白質(zhì)和灰質(zhì)有明顯的小點(diǎn)出血。6脊髓也有類似變化。關(guān)節(jié)腔內(nèi)有液體滲出。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)試以Elisa方法檢測某豬場的豬瘟血清抗體水平（簡述實(shí)驗(yàn)步驟）答：被檢血清豬場育肥豬在接種豬瘟疫苗后30d隨機(jī)采血，血樣經(jīng)處理后獲取血清(血液冷凝，3000r／MIN離心5min，取上清液)試驗(yàn)方法1在血清稀釋板中按1：40的體積稀釋待檢血清(195μL樣品稀釋液中加5μL待檢血清)。此外，陽性對(duì)照和陰性對(duì)照也按1：40稀釋。2取預(yù)包被的檢測板(根據(jù)樣品多少，可拆開分次使用)，將稀釋好的待檢血清取100μL加入到檢測板孔中。陰性對(duì)照和陽性對(duì)照各設(shè)2孔，每孔100μL。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)，置37℃溫育30min。3甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗板5次，200μL/孔，每次靜置3min倒掉，再在干凈吸水紙上拍干。4每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗100μL，置37℃溫育30min。5洗滌5次，方法同上。每次均在干凈吸水紙上拍干。6每孔先加底物液A一滴(50μL)、再加底物液B一滴(50μL)，混勻，室溫(18℃25℃)避光顯色10min。7每孔加終止液1滴(5OμL)，10min內(nèi)測定結(jié)果(測定前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下)。8測定OD值以空白孔調(diào)零，在酶標(biāo)儀上測定各孔的光密度(OD630)值，所用波長為630nm。9判斷標(biāo)準(zhǔn)用豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒檢測的陰性對(duì)照平均OD630值必須小于0．3，陽性對(duì)照平均OD630值必須大于或等于1．0試驗(yàn)才成立。當(dāng)樣品檢測的OD630值大于0．35時(shí)判為陽性，小于0．35時(shí)判為陰性。如何檢測禽流感病毒的血凝效價(jià)答：根據(jù)血凝試驗(yàn)結(jié)果配制4HAU抗原。（即1HAU抗原除以4）HAU是血凝單位取96孔V形酶標(biāo)板，用移液器在第1~12孔各加入25 μL PBS緩沖液。在第1孔加入25 μL被檢血清，充分混勻后移出25 μL加至第2孔，依次類推，倍比稀釋至第12孔，棄去25 μL。按以上步驟加入陽性血清和陰性血清（各做兩份），作對(duì)照孔。在第1~12孔各加入25 μL 4單位抗原，置于微量振蕩器上輕輕混勻，室溫2025℃下靜置30 min。每孔加入25 μL 1%的雞紅細(xì)胞懸液。置于微量振蕩器上輕輕混勻，室溫（2025℃）靜置40 min后觀察結(jié)果，若環(huán)境溫度過高，可于4℃條件下進(jìn)行，紅細(xì)胞將呈明顯的紐扣狀沉到孔底。結(jié)果判定：只有陰性對(duì)照孔血清滴度不大于2 log2，陽性對(duì)照孔誤差不超過1個(gè)滴度，試驗(yàn)結(jié)果才有效。將酶標(biāo)板作45176。傾斜，以完全抑制紅細(xì)胞凝集的最大稀釋倍數(shù)判為該血清的血凝抑制滴度。當(dāng)被檢血清效價(jià)大于等于4log2，判為禽流感抗體陽性。答：引物合成：合成一對(duì)引物P1TRA…ACC/P2AGT…TTG，用于擴(kuò)增CSFV NS5B區(qū)599bp目的片段。病毒RNA的提取與RT—PCR：取140μL樣品，用QIAamp Viral RNA Kit提取試劑盒提取病毒RNA。最后提取的RNA用50μL AVE洗脫。反轉(zhuǎn)錄體系為30μL，內(nèi)含10μL RNA、6μL 5 X RT bufer、3μLdNTP Mixture(10mmoL／L)、3μL50μmol／L 9mer隨機(jī)引物、10UAMV和20URNA酶抑制劑，補(bǔ)去離子H2O至總體積為30μL。42℃水浴1h，然后70℃10min。制備好的cDNA置于20℃保存?zhèn)溆?。PCR反應(yīng)體系為30μL：3μLcDNA、3μL10PCRbuffer、／L dNTP、上下游引物P1和P2各1μL(10μmol／L)、(5U／μL)EXTaqDNA聚合酶、用去離子H20補(bǔ)至30μL。PCR程序?yàn)椋?4℃5min；94℃30S，57℃30S，72℃40S，30個(gè)循環(huán)；72℃10min。反應(yīng)結(jié)束后取PCR產(chǎn)物用0．8％瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳，凝膠成像系統(tǒng)分析結(jié)果。綜述題目如何對(duì)雞場的新城疫進(jìn)行檢疫與防控（列舉檢疫流程，檢疫方法，防控方法）答：檢疫流程： 查明疫病背景：通過詢問獸醫(yī)人員或檢查疫病記錄，是否有與新城疫病例接觸史，周圍 2km范圍內(nèi)是否發(fā)生過新城疫。查清免疫狀況：通過查驗(yàn)免疫證明或查詢其他資料，核查被檢禽群是否已按規(guī)定注射合格疫苗。群體臨診檢查：首先作靜態(tài)檢查，讓禽群處于靜止?fàn)顟B(tài)，觀察營養(yǎng)狀況、精神狀態(tài)、呼吸、糞便、鼻及口腔分泌物有否異常。然后觀察禽只運(yùn)動(dòng)狀況，有否跛行、共濟(jì)失調(diào)、痙攣等異常現(xiàn)象病理解剖檢查：對(duì)臨診疑似病例，應(yīng)全部或抽樣解剖檢疫方法：1病毒分離與鑒定：病料經(jīng)無菌處理后通過尿囊腔接種911日齡的非免疫雞胚或SPF雞胚。收獲尿囊液做血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。2血清學(xué)試驗(yàn)：血凝抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA、免疫熒光抗體技術(shù)、瓊脂雙擴(kuò)散試驗(yàn)等。3分子生物學(xué)方法 RTPCR技術(shù)可用于直接檢測病毒。防控方法：1加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和獸醫(yī)衛(wèi)生，注意飼料營養(yǎng)，減少應(yīng)激，提高雞群的整體健康水平2全進(jìn)全出和封閉式飼養(yǎng)制，提倡育雛、育成、成年雞分場飼養(yǎng)方式3嚴(yán)格防疫消毒制度，杜絕強(qiáng)毒污染和入侵4建立科學(xué)的免疫程序，充分考慮母源抗體水平，疫苗種類及毒力，最佳劑量和接種途徑，雞種和年齡5堅(jiān)持定期的免疫監(jiān)測，隨時(shí)調(diào)整免疫計(jì)劃，使雞群始終保持有效的抗體水平6對(duì)發(fā)病雞群