【文章內(nèi)容簡介】 技進步二等獎（ 20xx 年）等 多項國家、省級獎勵。 已完成技術(shù)情況 核心技術(shù) 分子育種技術(shù) 項目申報單位是我國較早開展優(yōu)質(zhì)雞育種的機構(gòu)之一，在優(yōu)質(zhì)雞重要經(jīng)濟經(jīng)濟性狀遺傳本質(zhì)研究的基礎(chǔ)上，培育出了一批具有重要影響力的優(yōu)質(zhì)雞配套系。同時在分子育種方面開展了大量的基礎(chǔ)工作，為本項目的實施打下了堅實的基礎(chǔ)，主要有以下幾方面： 嶺南黃雞不同品系的群體遺傳變異分析。采用嶺南黃雞 A、 B、 E E E惠陽三黃胡須雞（ H）、 xx 麻雞（ Q）和廣西霞煙雞（ S），以及兩個不同雜交群，即嶺南黃雞 B系與 E1 系的 正反雜交后代（ BEE1B）為試驗材料，運用微衛(wèi)星 DNA 標記和 RAPD 標記分析這些品系或品種間的相似系數(shù)、遺傳距離和群體內(nèi)的雜合度，并利用這兩種分子標記的試驗結(jié)果進行聚類分析，研究了嶺南黃雞不同品系間的遺傳變異和親緣關(guān)系。 優(yōu)質(zhì)雞肉用性狀與分子標記的關(guān)聯(lián)檢測。以嶺南黃雞 A 系和xx 麻雞為材料，經(jīng)雜交再互交建立參考家系，共四個父系家系 425個個體，測定親本和 F2代的 10周齡體重等 21 種肉用性狀。從已發(fā)表的遺傳圖譜上選取 25 個微衛(wèi)星標記位點，合成引物對試驗個體進行 PCR 擴增，變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測分型； 同時在 268 種隨機擴增引物中篩選出 21 種試驗效果較好的引物，對全部試驗個體進行RAPD擴增。應(yīng)用 HARVEY統(tǒng)計軟件分析 15 個微衛(wèi)星 DNA 標記和 51 個RAPD標記與 21 種肉用性狀的連鎖關(guān)系。發(fā)現(xiàn) h03 等 6個微衛(wèi)星標記和 12個 RAPD標記與 15 種肉用性狀關(guān)聯(lián)顯著。 雞分子連鎖圖譜的構(gòu)建。用 Crimap 軟件對 51 個標記進行兩點測驗，計算兩兩標記間的重組率和遺傳距離。按 Lod≥ 3 的要求，獲得雞的 5 個連鎖群，共含 32 個標記。 5 個連鎖群共覆蓋雞基因組，標記平均間距為 。 雞肉用性狀基 因位點（ QTL）的定位及效應(yīng)分析。用雞的分子連鎖圖譜，采用區(qū)間作圖分析法，檢測 F2 分離群體中各種產(chǎn)肉性狀的基因位點（ QTL），并進行定位和效應(yīng)分析。在所研究的 17 種性狀中，用 RAPD 標記方法，檢測了 35 個 QTL，單個 QTL 對性狀遺傳變異 的貢獻率介于 %，其中有兩個 QTL（控制雞脛長）的貢獻率超過 20%，并發(fā)現(xiàn)了控制相同性狀的不同 QTL 之間的基因效應(yīng)存在對立現(xiàn)象。用微衛(wèi)星標記檢測方法，發(fā)現(xiàn) 21 個 QTL，其對性狀的貢獻率為 %，其中有 5個在 20%以上。 分子標記輔助選擇效應(yīng)研究 。以嶺南黃雞快長型品系 F 系為試驗材料，采用常規(guī)育種（半同胞家系選擇）與分子標記選擇相結(jié)合選育方法，經(jīng)過兩個世代選育，肉雞 10 周齡體重、胸肌重、腿肌重和胸腿肌率總選擇效應(yīng)分別為 153 克、 克、 克、和 %，分別比零世代提高 %、 %、 %和 %，其中分子標記選擇效應(yīng)為 22克、 、 %，見表 21。 嶺南黃雞分子標記輔助選擇效應(yīng)分析 表 21 項 目 體 重 （克） 胸 肌 重 （克） 腿 肌 重 （克） 胸腿肌率 （ %） 零 世代群體 1601 第一世代常規(guī)育種群體 1687 第一世代常規(guī)育種群 +標記群 1699 第一世代標記輔助選擇效應(yīng) +12 (%) (%) + (%) + (%) 第二世代常規(guī)育種群體 1744 第二世代常規(guī)育種群 +標記群 1754 第二世代標記輔助選擇效應(yīng) +10 (%) + (%) + (%) (%) 同時項目申報單位已從我國動物分子育種研究的權(quán)威機構(gòu)之一—— 中國農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)生物國家重點實驗室引進一批最新的分子育種技術(shù)專利，以進一步保障項目的順利實施。 以數(shù)量遺傳理論為基礎(chǔ)的傳統(tǒng)育種技術(shù) 項目申報單位經(jīng)過多年的優(yōu)質(zhì)雞育種工作，在控制重要質(zhì)量性狀的基因效應(yīng)估計和應(yīng)用，優(yōu)質(zhì)雞生長、產(chǎn)蛋、肉質(zhì)等重要經(jīng)濟性狀的遺傳參數(shù)、育種值估計，品系的選配和雜種優(yōu)勢利用方面擁有豐富的經(jīng)驗 。 配套關(guān)鍵技術(shù) 項目承建單位在優(yōu)質(zhì)雞飼料營養(yǎng)、疾病防治、環(huán)境控制、規(guī)?；a(chǎn)工藝等方面也進行了大量卓有成效的研究工作，為該項目的實施打下了堅實的基礎(chǔ)。 優(yōu)質(zhì)雞飼料生產(chǎn)技術(shù)體系 飼料營養(yǎng)技術(shù)是優(yōu)質(zhì)肉雞產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵技術(shù)之一。十多年來，對各種優(yōu)質(zhì)雞的營養(yǎng)需要與飼料配合進行了系統(tǒng)的研究，研究提出了不同性別、不同生長發(fā)育階段黃羽肉雞飼糧代謝能、粗蛋白質(zhì)、能量 /蛋白比、可消化賴氨酸、蛋氨酸等營養(yǎng)需求參數(shù)。對各種飼料的營養(yǎng)價值（代謝能和可消化氨基酸）進行了評定。制定了黃羽肉雞前期、中期和 后期三套營養(yǎng)需要標準，參與完成了 農(nóng)業(yè)部行業(yè)標準制訂 （ 子專題 ） —— 黃羽肉雞飼養(yǎng)標準修訂 工作。通過系統(tǒng)研究雞熱應(yīng)激及高飼養(yǎng)密度應(yīng)激反應(yīng)機理，提出了相應(yīng)的抗應(yīng)激技術(shù)，研制開發(fā)了“必補 18”等抗應(yīng)激產(chǎn)品，其性能優(yōu)于國內(nèi)外同類優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。在新型安全環(huán)保飼料添加劑研制研究方面，提出了優(yōu)質(zhì)雞產(chǎn)品中無殘留抗生素安全使用技術(shù)；系統(tǒng)研究了有機微量元素在黃羽肉雞中的應(yīng)用效果，提出了低重金屬殘留的優(yōu)質(zhì)黃羽肉雞飼養(yǎng)技術(shù)；系統(tǒng)研究了應(yīng)用植酸酶、飼用酶制劑等安全環(huán)保型添加劑降低畜禽養(yǎng)殖場氮、磷排放的效果，提出了降低畜禽飼養(yǎng)場氮、磷等物質(zhì)排 放的飼養(yǎng)技術(shù)。通過以上 大量研究，初步建立了優(yōu)質(zhì)黃羽肉雞安全飼料生產(chǎn)技術(shù)體系。 科學的家禽生物安全系統(tǒng) 家禽生物安全是優(yōu)質(zhì)肉雞產(chǎn)業(yè)化技術(shù)體系的重要保障措施。針對“研究所 +公司 +農(nóng)戶”的特定生產(chǎn)模式，初步建立了適合一體化養(yǎng)殖企業(yè)的家禽生物安全系統(tǒng)。本家禽生物安全系統(tǒng)包括雞病防疫技術(shù)體系和推廣應(yīng)用管理體系。主要內(nèi)容包括：①種雞場及養(yǎng)戶的場址及雞舍進行合理的規(guī)劃和布局；②養(yǎng)雞生產(chǎn)相關(guān)的各個環(huán)節(jié)包括種雞場→孵化廠→銷售部→解剖室→養(yǎng)雞戶→飼料廠等環(huán)節(jié)的消毒措施；③種雞、肉雞合理免疫程序的制定及疫苗的 使用；④種雞、肉雞免疫監(jiān)測系統(tǒng)的建立及應(yīng)用；⑤雞病準確及時診斷及控制；⑥雞病防治三級管理體系。 優(yōu)質(zhì)雞健康生態(tài)養(yǎng)殖關(guān)鍵技術(shù) 綜合運用現(xiàn)代家禽生產(chǎn)學、養(yǎng)雞場工程設(shè)計和環(huán)境控制技術(shù)等學科的基本原理和研究方法，通過技術(shù)配套、引進、創(chuàng)新等形式，初步建立了符合我國國情的集約化優(yōu)質(zhì)雞健康高效養(yǎng)殖關(guān)鍵技術(shù)體系。主要包括：①利用池塘水面建造雞舍，保證雞場的相對隔離，形成獨特的雞 — 魚生態(tài)系統(tǒng)；②針對 xx、廣西、福建等養(yǎng)殖區(qū)域高溫季節(jié)持續(xù)時間長、常規(guī)防暑降溫措施收效甚微、種雞健康狀況堪憂的不利局面，創(chuàng)造性的在 全開放式種雞舍引入縱向通風工藝，從根本上解決了全開放式種雞舍環(huán)境控制的難題；③飼料中嚴禁使用過量的 Cu、 Zn等金屬元素，減少重金屬對土壤的污染；④飼料中使用植酸酶等，減少磷對土壤和水體的污染；⑤采用“物理吸附 — 化學反應(yīng) — 生物轉(zhuǎn)化”的手段，消除雞糞臭味，變廢為寶，以雞糞為原料生產(chǎn)有機復合肥，將雞糞用于水果蔬菜種植，有效地消除雞糞堆放對環(huán)境的污染。由于 在優(yōu)質(zhì)雞產(chǎn)業(yè)化過程中將環(huán)境控制作為一項重要技術(shù)進行攻關(guān)，有效地利用了種植、養(yǎng)殖之間的再生循環(huán)利用和生態(tài)互補，因而能夠較好地解決養(yǎng)雞業(yè)快速發(fā)展與生態(tài)環(huán)境之間的平衡， 從而促進養(yǎng)雞業(yè)的良性發(fā)展。 產(chǎn)業(yè)化發(fā)展技術(shù) “北繁南養(yǎng)”產(chǎn)業(yè)化模式 該產(chǎn)業(yè)化模式主要運行策略是將父母代種雞放在中國北方內(nèi)陸地區(qū)飼養(yǎng)（主要在河南、山西和河北?。?，生產(chǎn)的商品代種蛋運往南方沿海地區(qū)（主要有 xx、廣西、浙江、上海、江蘇、福建等省市自治區(qū)）孵化、飼養(yǎng)，銷售活雞。因河南等省地處內(nèi)陸中原地區(qū)，地理位置較佳，氣候適宜，飼料和人力資源豐富，成本低，制種成本遠遠低于南方沿海地區(qū)。這種模式生產(chǎn)商品代雛雞，可使制種成本降低10%以上，實現(xiàn)南北資源有效利用和配置?！氨狈蹦橡B(yǎng)”產(chǎn)業(yè)化模式 的建立，對于降低家禽企業(yè)的生產(chǎn)成本和市場風險，提高市場競爭力和經(jīng)濟效益具有重要的現(xiàn)實意義。 “研究所 +公司 +農(nóng)戶”產(chǎn)業(yè)化模式 該模式主要是研究所負責提供良種和配套技術(shù)；公司負責飼養(yǎng)父母代種雞，向農(nóng)戶提供商品代雛雞、飼養(yǎng)技術(shù)，組織回收肉雞銷售或進行深加工；農(nóng)戶負責肉雞生產(chǎn)。通過這種模式，充分發(fā)揮研究所的科技優(yōu)勢、公司的規(guī)?；a(chǎn)優(yōu)勢，組織農(nóng)戶進行大規(guī)模肉雞生產(chǎn)，形成利益共同體，實行產(chǎn)、供、銷一體化，延長產(chǎn)業(yè)鏈，共同抵御市場風險。 近年來，上述技術(shù)、成果經(jīng)過有效的組裝、配套，形成綜合配套生產(chǎn)技術(shù) 體系，用于指導優(yōu)質(zhì)黃羽肉雞產(chǎn)業(yè)化開發(fā)，建立了嶺南黃雞 良種繁育體系和推廣渠道，嶺南黃雞系列配套系及其關(guān)鍵配套技術(shù)得到了大面積推廣， 其全國市場占有率超過了 8%， “嶺南黃”成為了優(yōu)質(zhì)雞市場的第一品牌。 技術(shù)分析 技術(shù)必要性 影響肉雞重要經(jīng)濟性狀的差異主要由遺傳因素造成，此外還受飼料營養(yǎng)、管理等影響。遺傳對于肉雞經(jīng)濟性狀的影響主要表現(xiàn)為以下幾方面： 生長速度的不同，國外快大型品種經(jīng)多年選育，生長迅速，料肉比低，而我國地方雞種則與之相反。 生長速度差異導致了蛋白質(zhì)代謝的不同，生長較慢的雞蛋 白質(zhì)水解酶較多，而快速生長的雞蛋白質(zhì)水解抑制酶較多。家禽屠宰后蛋白質(zhì)的水解與組織蛋白酶的相互作用使得肌肉嫩化，因而快速生長的雞，蛋白質(zhì)的水解能力較低，肌肉嫩化差。 不同品種胴體氨基酸含量的差異與雞肉風味密切相關(guān)。 品種間脂肪沉積不同，優(yōu)質(zhì)雞之所以比國外快大白羽肉雞口感好，主要是由于肌肉氨基酸、系水力、嫩度的差異，肌肉中的脂肪含量及分布也與其它雞不一樣。 不同品種雞在肌纖維方面也存在差異，快速生長的品種一般肌纖維的數(shù)量較多而且具有較多的巨型纖維，因而風味、口感較優(yōu)質(zhì)雞差。顯然上述性狀的遺傳差異正是導致了 快大白羽肉雞與優(yōu)質(zhì)雞的巨大差異。而我國許多優(yōu)秀的地方品種，如北京油雞、 xx 麻雞、三黃胡須雞、浦東雞、固始雞、鹿苑雞、霞煙雞等，都具有人們喜愛的外貌特征，肉質(zhì)鮮美，并適于多種烹調(diào)方法，為我國優(yōu)質(zhì)雞的發(fā)展提供了重要的種質(zhì)保證。但是我國優(yōu)質(zhì)雞對肉質(zhì)的育種主要通過傳統(tǒng)的育種方法，利用地方雞種進行簡單的雜 交改良，很少能夠有針對性的對肉質(zhì)進行選育，造成育種目標的盲目性，并且育種進展非常緩慢。而通過分子育種技術(shù)可以針對特定的性狀進行改良，不僅育種進程加快，而且育種成本將大幅降低。 我國優(yōu)質(zhì)雞肉質(zhì)優(yōu)異、味道鮮美，但與國外快 大白雞相比，存在增重慢、飼料報酬低、產(chǎn)蛋量低、抱性強等，此外在抗病力、群體一致性方面還有待改進。雖然近年來優(yōu)質(zhì)雞育種已經(jīng)取得了有目共睹的成績，但是由于育種技術(shù)的局限，同時使得性狀的選育仍不能達到令人滿意的程度，而基于雞的生理能力，目前我們幾乎到達了一個“選擇平臺”，很難再產(chǎn)生較大的遺傳進展，因此希望能夠通過利用分子育種技術(shù)、基于基因組學信息開展優(yōu)質(zhì)雞的遺傳改良，從而在較短時間內(nèi)，在肉質(zhì)、生長速度、飼料轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)蛋量、抱性、抗病性、群體一致性等方面獲得較大的遺傳進展，培育出綜合生產(chǎn)性能更加優(yōu)越的新配套系，更好 的滿足市場需求。 技術(shù)可行性 傳統(tǒng)育種工作一般包括專門化品系選育和配合力測定等，而專門化新品系的培育通過表型觀察選擇理想重組基因型，一般要求在 35年以上；而配合力測定需要進行大量的雜交組合配套實驗，耗時費力。一方面，有些性狀難以測量，如肉質(zhì)、口感等表型觀測十分困難；另一方面，大多數(shù)重要性狀都是數(shù)量性狀，易受環(huán)境影響，使得選擇的準確性不高。而伴隨著分子生物學的發(fā)展，特別是在人類基因組計劃取得巨大的進展之后，人們意識到利用基因組的信息和方法進行分子育種將導致畜牧業(yè)新的革命性進展，大幅度提高養(yǎng)殖業(yè)的 生產(chǎn)效率，帶來難以估量的高額利潤。西方發(fā)達國家政府、大型育種公司和著名科學家曾經(jīng)預測在 21 世紀初利用動物基因組研究成就改良禽畜品種 的潛力，結(jié)果總結(jié)于表 22。 表 22 動物基因組研究改良動物生產(chǎn)性狀的部分預測 生產(chǎn)性狀 發(fā)達國家水平 預計改良效果 中國目前水平 牛年產(chǎn)奶量 8000 千克 120xx 千克 6000 千克 豬日增重 800 克 /日 1200 克 /日 550 克 /日 豬瘦肉率 60% 70% 54% 與人類基因組研究不同，動物基因組研究的重點在于那些與經(jīng)濟性狀相關(guān)的染色體區(qū)域，其目標是要利用分 子生物學技術(shù)精細定位畜禽中控制重要經(jīng)濟性狀位點在遺傳圖譜和物理圖譜上的位置，并利用這些信息來改良畜禽品種。 在雞的遺傳育種研究中，人們利用現(xiàn)代遺傳育種技術(shù)已經(jīng)有目的地將一些同表型相關(guān)的特定基因集中于商用品系之中，這些基因同生長發(fā)育、能量代謝、生殖生理、疾病和行為等有著特定的聯(lián)系。在對控制這些性狀的遺傳本質(zhì)充分的認識基礎(chǔ)上，一方面可以提高雞的生產(chǎn)水平、減少疾病發(fā)生率；另一方面可以提高產(chǎn)品質(zhì)量。通過選取國內(nèi)外代表性雞種組建資源群體，研究不同品種的種質(zhì)特性差異，并運用基因組學技術(shù)和手段，分析重要或特有性狀的遺傳基 礎(chǔ)，分離克隆相應(yīng)的特有優(yōu)質(zhì)基因，在了解其同性狀相關(guān)生理作用的前提下可以就優(yōu)質(zhì)基因同群體遺傳結(jié)構(gòu)的關(guān)系，制定合理保種方案；鑒別不同性狀的遺傳基礎(chǔ)和遺傳規(guī)律，進行雜種優(yōu)勢利用和“超高產(chǎn)”品種培育等遺傳操作；進行分子育種合理規(guī)劃等。鑒定出與重要性狀緊密連鎖的DNA標記，通過分