transwell是檢測細胞侵襲能力的檢測方法(編輯修改稿)
2024-10-04 09:17 本頁面
【文章內容簡介】 and 5 % CO2, agitate the plate from time to time14. Discard the cell culture inserts and transfer 200 181。l of the TrypsinEDTA solution (now containing the migratory cells from each well into a black flat bottom 96 well plate15. Read fluorescence in a fluorescence plate reader at an excitation wavelength of 485 nm and an emission wavelength of 520 nm從第9步開始計數(shù)侵襲細胞時,這份說明書用的是熒光標記,但這種方法成本高而且繁瑣。我做的時候改為giemsa染色,發(fā)現(xiàn)效果不錯,具體如下:,取出小室,用棉簽小心將膜上表面的細胞擦拭去除。:冰醋酸(3:1固定10min后用10%giemsa染色。(即染成紫紅色的點,未著色的多為細胞碎屑計數(shù)并拍照留念Transwell細胞體外侵襲實驗概述目的:總結并改進細胞體外侵襲實驗的操作經(jīng)驗。方法:采用改進后細胞體外侵襲實驗分別研究不同濃度TNFα刺激下的HCCC29810 膽囊癌細胞體外侵襲能力的強弱。粉防己堿對HUVEC 人類臍靜脈內皮細胞遷移能力的抑制作用。VEGF 對人結腸癌HT229 細胞體外侵襲能力的影響。結果:改進后侵襲試驗定位準確,結果清晰。結論:按照作者建議的方法操作,能夠縮短實驗時間,有助于提高細胞體外侵襲實驗的質量。細胞體外侵襲實驗主要應用于各種細胞因子對惡性腫瘤細胞侵襲和轉移的影響及一些抑制血管生成的新藥研究,但在具體實驗中獲得真實、最佳實驗結果的圖像,并借以說明問題并非簡單。很多研究人員在此方面花費了很多時間和科研經(jīng)費,從刺激實驗用的細胞到蘇木素染色,看似簡單的實驗步驟中有很多環(huán)節(jié)需要研究者注意.材料與方法1. 1Matrigel:Becton Dickinson Compary, 20 ℃保存。Tanswell plate:Costar ,USA , 3422 ,聚碳酯膜微孔直徑為8μm。蘇木素染液,梯度乙醇,二甲苯溶液。1. 2
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