【文章內容簡介】 作 ④紅細胞濃度過高造成凝集減弱或紅 細胞濃度過低造成凝集不易被觀察到 ，抗體特異性難以鑒定 （ 1）抗體篩查假陽性： ①離心不當②試管污染 ③硅膠管引起的凝集 （ 2）譜細胞單一：應采用 3個以上不同供應商的譜細胞系，排查抗體的特異性。 紅細胞血型檢測 28 四、交叉配血試驗 （一）要求和內容 交叉配血的要求： 主側配血要求： 絕對不可以有凝集或溶血現象。 次測配血要求： 供血者血清加受血者紅細胞在允許范圍內，可以有凝集現象，但不可以有溶血 。 凝集 不凝集 紅細胞血型檢測 29 四、交叉配血試驗 ? 交叉配血試驗的內容 患者 獻血者 主側 次側 主側配血 用患者血清與供 者紅細胞進行試驗 次測配血 供血者血清與患 者紅細胞進行試驗 紅細胞血型檢測 30 四、交叉配血試驗 ? 交叉配血的目的 交叉配血試驗是輸血前必要的步驟，主要是檢查受血者血清中有無能破壞供血者紅細胞的抗體。主要目的是為了防止輸血后產生溶血性反應。 盡可能確保對人和一個病人來說，輸了供血者的血不會引起有害反應，并且使紅細胞在輸注后能保持最長的存活時間。 紅細胞血型檢測 31 四、交叉配血試驗 （二）結果的解釋及處理 ，交叉配血相容： 絕大部分標本抗體篩查陰性，交叉配血也是相容的。 ，主側交叉配合試驗陽性 （ 1）復查血型 （ 2）主側凝集類 B抗原 （ 3）血清中可能含有一種 ABO抗體，必要時可以做 ABO亞型鑒定 紅細胞血型檢測 32 四、交叉配血試驗 ，主側交叉配合試驗陽性 （ 1）自身對照試驗陰性：受血者體內有同種不規(guī)則抗體。 （ 2）自身對照試驗陽性：受血者血清內可能有自身抗體或 同時存在不規(guī)則抗體。 （三）影響因素 ① 離子干擾 ②溫度 ③操作不規(guī)范 ④ 離心不當 紅細胞血型檢測 33 第二節(jié) 鹽水介質實驗技術 ? 鹽水介質試驗技術常用于血型鑒定、血清中 IgM類抗體的篩查和鑒定、鹽水介質的交叉配血等。 基本方法 用于 ABO血型和 RhD抗原的定型 特點：簡單、快速，但易污染環(huán)境。 為定型試驗方法，也可于半定量試驗。是輸血 前檢驗最常用的試驗方法。 特點：簡單、快速、易學，結果準確、可靠。 為定性試驗方法。 紅細胞血型檢測 34 第二節(jié) 鹽水介質實驗技術 ? 鹽水介質配血方法 患者 獻血者 主側 次側 離心 看結果 陽性 陰性 紅細胞血型檢測 35 第二節(jié) 鹽水介質實驗技術 紅細胞血型檢測 36 第三節(jié) 酶處理實驗技術 ? 原理：在酶的作用下切斷帶有負電荷的羧基基團的唾液酸，降低 Zeta電位，縮短紅細胞之間的距離。增強 IgG抗體對紅細胞的凝集。 常用對的酶：菠蘿酶，無花果酶，木瓜酶 紅細胞血型檢測 37 第三節(jié) 酶處理實驗技術 ? 酶介質配血方法 患者 獻血者 主側 次側 主次側 均加酶 紅細胞血型檢測 38 第三節(jié) 酶處理實驗技術 37℃ 水浴 30分鐘 ? 37 ℃ 離心 看結果 陽性 陰性 ? 紅細胞血型檢測 39 第三節(jié) 酶處理實驗技術 結果的判斷 （ 1）陽性對照管凝集，陰性對照管凝集，被檢管凝集為陽 性，不出現凝集判定為陰性。 （ 2）陽性對照管不凝集和（或）陰性對照管凝集，實驗失 敗分析原因，重新實驗。 紅細胞血型檢測 40 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 一、基本原理 ? 抗球蛋白試驗（ Coombs實驗）主要用于檢測血清中的不完全抗體如： IgG、 IgA和（或）補體如：C C4。 ? 在鹽水介質中，不完全抗體只能致敏紅細胞，而不能使紅細胞出現可見的凝集反應，加入抗球蛋白試劑后，抗球蛋白分子的 Fab片段與紅細胞表面的受體結合，而產生紅細胞凝集，因此采用此方法可以檢測出血清中是否存在不完全抗體。 紅細胞血型檢測 41 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 抗球蛋白試驗原理圖 紅細胞血型檢測 42 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 二、分類及應用 抗球蛋白試驗 直接 間接 致敏紅細胞的不完全抗體、補體 血清中的不完全抗體 應用 HDN的診斷、 AIHADE的診斷、藥物誘發(fā)型溶血病的診斷 交叉配血及血型鑒定、器官移植、等 紅細胞血型檢測 43 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 抗球蛋白配血方法 患者 獻血者 主側 次側 37 ℃ ? 37℃ 水浴 30分鐘 三洗 紅細胞血型檢測 44 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 抗球蛋白方法配血方法 加抗球蛋白 離心 看結果 陽性 陰性 紅細胞血型檢測 45 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 三、 結果的判斷 直接抗球蛋白試驗： （ 1）陽性對照管凝集，陰性對照管不凝集，被檢管凝集， 判定為陽性。 （ 2）陽性對照管凝集，陰性對照管不凝集，被檢管不凝 集，須做陰性確認后判定結果。 （ 3）陽性對照管不凝集和（或）陰性對照管凝集，結果不 可信不能發(fā)出報告，分析原因后重做試驗。 紅細胞血型檢測 46 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 間接抗球蛋白試驗： （ 1）陽性對照管呈現凝集反應，陰性對照管不呈現凝集反應，被檢管呈現凝集反應為陽性結果，表示被檢者血 清中含有抗體。 （ 2）陽性對照管不凝集和（或）陰性對照管出現凝集，實驗失敗，分析原因重做試驗。 紅細胞血型檢測 47 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術 四、 注意事項 （一）直接抗球蛋白試驗 1. 抗球蛋白血清應按說明書使用最適稀釋度，避免出現前帶現象而誤判為陰性。