【文章內(nèi)容簡介】 作 ④紅細(xì)胞濃度過高造成凝集減弱或紅 細(xì)胞濃度過低造成凝集不易被觀察到 ，抗體特異性難以鑒定 （ 1）抗體篩查假陽性： ①離心不當(dāng)②試管污染 ③硅膠管引起的凝集 （ 2）譜細(xì)胞單一：應(yīng)采用 3個以上不同供應(yīng)商的譜細(xì)胞系，排查抗體的特異性。 紅細(xì)胞血型檢測 28 四、交叉配血試驗(yàn) （一）要求和內(nèi)容 交叉配血的要求： 主側(cè)配血要求： 絕對不可以有凝集或溶血現(xiàn)象。 次測配血要求： 供血者血清加受血者紅細(xì)胞在允許范圍內(nèi)，可以有凝集現(xiàn)象，但不可以有溶血 。 凝集 不凝集 紅細(xì)胞血型檢測 29 四、交叉配血試驗(yàn) ? 交叉配血試驗(yàn)的內(nèi)容 患者 獻(xiàn)血者 主側(cè) 次側(cè) 主側(cè)配血 用患者血清與供 者紅細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn) 次測配血 供血者血清與患 者紅細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn) 紅細(xì)胞血型檢測 30 四、交叉配血試驗(yàn) ? 交叉配血的目的 交叉配血試驗(yàn)是輸血前必要的步驟，主要是檢查受血者血清中有無能破壞供血者紅細(xì)胞的抗體。主要目的是為了防止輸血后產(chǎn)生溶血性反應(yīng)。 盡可能確保對人和一個病人來說，輸了供血者的血不會引起有害反應(yīng)，并且使紅細(xì)胞在輸注后能保持最長的存活時間。 紅細(xì)胞血型檢測 31 四、交叉配血試驗(yàn) （二）結(jié)果的解釋及處理 ，交叉配血相容： 絕大部分標(biāo)本抗體篩查陰性，交叉配血也是相容的。 ，主側(cè)交叉配合試驗(yàn)陽性 （ 1）復(fù)查血型 （ 2）主側(cè)凝集類 B抗原 （ 3）血清中可能含有一種 ABO抗體，必要時可以做 ABO亞型鑒定 紅細(xì)胞血型檢測 32 四、交叉配血試驗(yàn) ，主側(cè)交叉配合試驗(yàn)陽性 （ 1）自身對照試驗(yàn)陰性：受血者體內(nèi)有同種不規(guī)則抗體。 （ 2）自身對照試驗(yàn)陽性：受血者血清內(nèi)可能有自身抗體或 同時存在不規(guī)則抗體。 （三）影響因素 ① 離子干擾 ②溫度 ③操作不規(guī)范 ④ 離心不當(dāng) 紅細(xì)胞血型檢測 33 第二節(jié) 鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)技術(shù) ? 鹽水介質(zhì)試驗(yàn)技術(shù)常用于血型鑒定、血清中 IgM類抗體的篩查和鑒定、鹽水介質(zhì)的交叉配血等。 基本方法 用于 ABO血型和 RhD抗原的定型 特點(diǎn)：簡單、快速，但易污染環(huán)境。 為定型試驗(yàn)方法，也可于半定量試驗(yàn)。是輸血 前檢驗(yàn)最常用的試驗(yàn)方法。 特點(diǎn)：簡單、快速、易學(xué)，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。 為定性試驗(yàn)方法。 紅細(xì)胞血型檢測 34 第二節(jié) 鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)技術(shù) ? 鹽水介質(zhì)配血方法 患者 獻(xiàn)血者 主側(cè) 次側(cè) 離心 看結(jié)果 陽性 陰性 紅細(xì)胞血型檢測 35 第二節(jié) 鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)技術(shù) 紅細(xì)胞血型檢測 36 第三節(jié) 酶處理實(shí)驗(yàn)技術(shù) ? 原理：在酶的作用下切斷帶有負(fù)電荷的羧基基團(tuán)的唾液酸，降低 Zeta電位，縮短紅細(xì)胞之間的距離。增強(qiáng) IgG抗體對紅細(xì)胞的凝集。 常用對的酶：菠蘿酶，無花果酶，木瓜酶 紅細(xì)胞血型檢測 37 第三節(jié) 酶處理實(shí)驗(yàn)技術(shù) ? 酶介質(zhì)配血方法 患者 獻(xiàn)血者 主側(cè) 次側(cè) 主次側(cè) 均加酶 紅細(xì)胞血型檢測 38 第三節(jié) 酶處理實(shí)驗(yàn)技術(shù) 37℃ 水浴 30分鐘 ? 37 ℃ 離心 看結(jié)果 陽性 陰性 ? 紅細(xì)胞血型檢測 39 第三節(jié) 酶處理實(shí)驗(yàn)技術(shù) 結(jié)果的判斷 （ 1）陽性對照管凝集，陰性對照管凝集，被檢管凝集為陽 性，不出現(xiàn)凝集判定為陰性。 （ 2）陽性對照管不凝集和（或）陰性對照管凝集，實(shí)驗(yàn)失 敗分析原因，重新實(shí)驗(yàn)。 紅細(xì)胞血型檢測 40 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 一、基本原理 ? 抗球蛋白試驗(yàn)（ Coombs實(shí)驗(yàn)）主要用于檢測血清中的不完全抗體如： IgG、 IgA和（或）補(bǔ)體如：C C4。 ? 在鹽水介質(zhì)中，不完全抗體只能致敏紅細(xì)胞，而不能使紅細(xì)胞出現(xiàn)可見的凝集反應(yīng)，加入抗球蛋白試劑后，抗球蛋白分子的 Fab片段與紅細(xì)胞表面的受體結(jié)合，而產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集，因此采用此方法可以檢測出血清中是否存在不完全抗體。 紅細(xì)胞血型檢測 41 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 抗球蛋白試驗(yàn)原理圖 紅細(xì)胞血型檢測 42 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 二、分類及應(yīng)用 抗球蛋白試驗(yàn) 直接 間接 致敏紅細(xì)胞的不完全抗體、補(bǔ)體 血清中的不完全抗體 應(yīng)用 HDN的診斷、 AIHADE的診斷、藥物誘發(fā)型溶血病的診斷 交叉配血及血型鑒定、器官移植、等 紅細(xì)胞血型檢測 43 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 抗球蛋白配血方法 患者 獻(xiàn)血者 主側(cè) 次側(cè) 37 ℃ ? 37℃ 水浴 30分鐘 三洗 紅細(xì)胞血型檢測 44 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 抗球蛋白方法配血方法 加抗球蛋白 離心 看結(jié)果 陽性 陰性 紅細(xì)胞血型檢測 45 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 三、 結(jié)果的判斷 直接抗球蛋白試驗(yàn)： （ 1）陽性對照管凝集，陰性對照管不凝集，被檢管凝集， 判定為陽性。 （ 2）陽性對照管凝集，陰性對照管不凝集，被檢管不凝 集，須做陰性確認(rèn)后判定結(jié)果。 （ 3）陽性對照管不凝集和（或）陰性對照管凝集，結(jié)果不 可信不能發(fā)出報(bào)告，分析原因后重做試驗(yàn)。 紅細(xì)胞血型檢測 46 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 間接抗球蛋白試驗(yàn)： （ 1）陽性對照管呈現(xiàn)凝集反應(yīng)，陰性對照管不呈現(xiàn)凝集反應(yīng)，被檢管呈現(xiàn)凝集反應(yīng)為陽性結(jié)果，表示被檢者血 清中含有抗體。 （ 2）陽性對照管不凝集和（或）陰性對照管出現(xiàn)凝集，實(shí)驗(yàn)失敗，分析原因重做試驗(yàn)。 紅細(xì)胞血型檢測 47 第四節(jié)抗球蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù) 四、 注意事項(xiàng) （一）直接抗球蛋白試驗(yàn) 1. 抗球蛋白血清應(yīng)按說明書使用最適稀釋度，避免出現(xiàn)前帶現(xiàn)象而誤判為陰性。