【正文】 型 最適的反應(yīng)溫度為 4℃ ，但在室溫反應(yīng)良好，所以常規(guī)的 ABO定型試驗僅在室溫進(jìn)行。 A型人血清中含有抗 B抗體， B型人血清中含有抗 A抗體， O型人血清中含有抗 A抗體和抗 B抗體， AB型人血清中不含 ABO抗體。 3. 受血者配血試驗對的血液標(biāo)本必須是輸血前 3天采集的。 （二）標(biāo)本的接收 輸血科技師接收血樣標(biāo)本時，應(yīng)認(rèn)真核對受血者的相關(guān)信息，盡可能了解受血者有無輸血史、藥物史、妊娠史等情況。 主要程序： 患者的病史和標(biāo)本等的檢查、核對及處理 。ABO血型和 RhD血型定型；紅細(xì)胞同種抗體篩查和堅定；交叉配血試驗；血小板輸注前的抗體檢查和配合試驗；不規(guī)則抗體的篩選和鑒定；交叉配血結(jié)果的報告和發(fā)血等。 如果有輸血史，這有必要進(jìn)一步了解最后一次輸血的日期，若 3個月內(nèi)輸過血，那么供血者的紅細(xì)胞沒有完全代謝消失，可能依然存在于血液循環(huán)中，導(dǎo)致血型定型試驗中出現(xiàn)混合凝集的結(jié)果。 4. 若受血者使用右旋糖酐、 PVP等治療，應(yīng)注意洗滌被檢紅細(xì)胞。 正定型 ：用抗 A及抗 B試劑與被檢紅細(xì)胞反應(yīng)，檢測紅細(xì)胞 表面是否存在 A抗原或 B抗原。 (1)定型方法：正、反定型的試管離心方法目前仍被認(rèn)為是最可信賴的 ABO定型方法 。 第四，血清必須通過 HIV， HCV， HBV等檢查或經(jīng)病毒滅活。一般抗 AB試劑對 Ax型紅細(xì)胞可增加凝集反應(yīng)的強(qiáng)度。 4)異?；蛐停?ABO亞型的檢查中， A、 B抗原可能為弱抗原，難以檢出。 8)紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象：紅細(xì)胞因遺傳或獲得性的表面異常，發(fā)生多凝集現(xiàn)象。 12)異常的血漿蛋白：受檢者血漿中異常的白蛋白、球蛋白比例和高濃度的纖維蛋白原等導(dǎo)致緡錢狀形成，造成假凝集現(xiàn)象。 ? 16)年齡因素：免疫系統(tǒng)尚未健全的嬰兒、由母親被動獲得抗體的嬰兒，或抗體水平下降的老人，試驗時可出現(xiàn)異常的結(jié)果。 Rh血型鑒定方法有：玻片法、試管法、微量板法、微柱凝膠法等，試管法最為經(jīng)典。 ? 3)標(biāo)本抗凝不當(dāng)，受檢過程中出現(xiàn)凝血或小的纖維蛋白凝塊，誤判為陽性。 紅細(xì)胞血型檢測 18 二、受血者和供血者 ABO和 Rh定型 ? (2)可能出現(xiàn)假陰性的原因 ? 1)受檢細(xì)胞懸液濃度太高，與抗血清比例失調(diào)。 ? 5)抗血清保存不當(dāng)，導(dǎo)致失效。 紅細(xì)胞血型檢測 20 三、不規(guī)則抗體篩選和鑒定 一、 概念：不規(guī)則抗體是指血清中抗 A、抗 B以外的其他血型抗體，也稱意外抗體。 紅細(xì)胞血型檢測 21 三、不規(guī)則抗體篩選和鑒定 二、不規(guī)則抗體的篩查方法 抗體篩選試驗的原則是讓受檢的血清與已知血型的試劑紅 細(xì)胞即篩選紅細(xì)胞起反應(yīng)，以發(fā)現(xiàn)在 37℃ 中有反應(yīng)的抗體 1. 鹽水介質(zhì)法：主要用于 IgM類抗體的篩查。 4. 酶法：能暴露隱蔽抗原，增強(qiáng)一些稀有抗原檢測。 一旦抗體被檢出，應(yīng)作抗體鑒定試驗，以確定其特異性。 ，結(jié)果不明確 （ 1）分析結(jié)果： ① 是否符合劑量效應(yīng) ② 譜細(xì)胞是否新鮮 （ 2）改變試驗方法： ①使用高靈敏度的方法重復(fù)試驗 ②添加試劑后重復(fù)實驗 ③帶抗體增強(qiáng)后重復(fù)試驗 紅細(xì)胞血型檢測 24 三、不規(guī)則抗體篩選和鑒定 ，自身細(xì)胞陰性 （ 1）強(qiáng)度不一致：可能存在混合抗體 （ 2）強(qiáng)度一致： ?抗體可能為專于 O細(xì)胞反應(yīng)的抗體 （如： 抗 I、抗 H、抗 HI） ?可能針對高頻抗原的抗體 ?可能針對譜細(xì)胞的抗體 ，自身細(xì)胞陽性 （ 1）存在自身抗體 （ 2）同種和自身抗體同時存在 （ 3）冷凝集：在冷凝集素的作用下存在凝集紅細(xì)胞 紅細(xì)胞血型檢測 25 三、不規(guī)則抗體篩選和鑒定 （ 4）假凝劑：在干擾因子的作用下一可造成紅細(xì)胞假凝集 （ 5）酶引起的多凝集 （ 6）補(bǔ)體的影響 ，自身細(xì)胞陽性 可能是自身抗體或 C?陽性 紅細(xì)胞血型檢測 26 三、不規(guī)則抗體篩選和鑒定 四、抗體篩查和鑒定的影響因素 ?篩查細(xì)胞不包括低頻率抗原，不能檢出低頻率抗原。 紅細(xì)胞血型檢測 28 四、交叉配血試驗 （一）要求和內(nèi)容 交叉配血的要求： 主側(cè)配血要求： 絕對不可以有凝集或溶血現(xiàn)象。 盡可能確保對人和一個病人來說，輸了供血者的血不會引起有害反應(yīng)，并且使紅細(xì)胞在輸注后能保持最長的存活時間。 （三）影響因素 ① 離子干擾 ②溫度 ③操作不規(guī)范 ④ 離心不當(dāng) 紅細(xì)胞血型檢測 33 第二節(jié) 鹽水介質(zhì)實驗技術(shù) ? 鹽水介質(zhì)試驗技術(shù)常用于血型鑒定、血清中 IgM類抗體的篩查和鑒定、鹽水介質(zhì)的交叉配血等。 特點(diǎn)：簡單、快速、易學(xué)，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。 常用對的酶：菠蘿酶，無花果酶，木瓜酶 紅細(xì)胞血型檢測 37 第三節(jié) 酶處理實驗技術(shù) ? 酶介質(zhì)配血方法 患者 獻(xiàn)血者 主側(cè) 次側(cè) 主次側(cè) 均加酶 紅細(xì)胞血型檢測 38 第三節(jié) 酶處理實驗技術(shù) 37℃ 水浴 30分鐘 ? 37 ℃ 離心 看結(jié)果 陽性 陰性 ? 紅細(xì)胞血型檢測 39 第三節(jié) 酶處理實驗技術(shù) 結(jié)果的判斷 （ 1）陽性對照管凝集，陰性對照管凝集，被檢管凝集為陽 性，不出現(xiàn)凝集判定為陰性。 紅細(xì)胞血型檢測 41 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術(shù) 抗球蛋白試驗原理圖 紅細(xì)胞血型檢測 42 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術(shù) 二、分類及應(yīng)用 抗球蛋白試驗 直接 間接 致敏紅細(xì)胞的不完全抗體、補(bǔ)體 血清中的不完全抗體 應(yīng)用 HDN的診斷、 AIHADE的診斷、藥物誘發(fā)型溶血病的診斷 交叉配血及血型鑒定、器官移植、等 紅細(xì)胞血型檢測 43 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術(shù) 抗球蛋白配血方法 患者 獻(xiàn)血者 主側(cè) 次側(cè) 37 ℃ ? 37℃ 水浴 30分鐘 三洗 紅細(xì)胞血型檢測 44 第四節(jié)抗球蛋白實驗技術(shù) 抗球蛋白方法配血方法 加抗球蛋白 離心