促紅細胞生成素(編輯修改稿)
2024-10-03 12:07 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ? 10%~80%乙醇胍線性梯度洗脫 ? 檢測并收集含 EPO主峰 ? ELISA測定 ?結(jié)果： 60%乙醇 1mol/L鹽酸胍洗出 EPO 第九頁，共十八頁。 透析 ?透析液： 10倍體積的 10mmol/L (pH )2%蔗糖緩沖液 ?透析次數(shù)： 2 ?時間： 5~6h 第十頁，共十八頁。 第二步：離子交換柱 ?DEAE型離子交換柱 ?流程： ? 10mmol/L ()緩沖液平 ? 上樣 20ml/min〔柱結(jié)合量 20mg/ml〕 ? 10mmol/L ()緩沖液平衡至基線 ? 添加 NaCl入緩沖液，進行截狀梯度洗脫〔 NaCl濃度分別為： 50， 70，125mmol/L〕 ?結(jié)果： ELISA檢測盒說明 75mmol/L洗脫峰中含 EPO 第十一頁，共十八頁。 第三步：分子篩色譜 ?Sephacryl S200 色譜分析 ?流程： ? 上樣體積 80ml ? 流速 2ml/min ? 流動相 20mmol/L 檸檬酸鈉 100mmol/L NaCl 緩沖液 ?結(jié)果：收集的 rHuEPO保存時間約為 45min 比活性約為 *108U/g蛋白；純度 〉 98%〔 SDSPAGE檢測〕 ? 免疫原性檢測： Western b
黨政相關(guān)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1