農(nóng)殘分析12--農(nóng)藥殘留的酶抑制法與免疫測定(編輯修改稿)
2024-10-02 01:39 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)顏色的吸光度之差就可計算出樣品中農(nóng)藥的含量 . 農(nóng)藥殘留免疫分析方法的建立，一般包括待測農(nóng)藥的選擇、半抗原合成、人工抗原合成、抗體制備和樣品前處理方法等幾個步驟 . 第七頁，共十六頁。 (1)直接 ELISA原理 : 是在抗原與抗體發(fā)生反響后，直接進(jìn)行顯色的非均相固相反響免疫分析方法。 1類 :首先將抗原固定在聚苯乙烯反響板孔內(nèi)壁，然后參加待測抗原和酶標(biāo)記抗體，固相抗原與待測游離抗原競爭有限量的酶標(biāo)記抗體，反響后洗去可溶性的游離抗原與抗體的結(jié)合物，參加酶作用底物，測定固相抗原與抗體結(jié)合物上的酶活性，便可得到待測抗原的量。酶反響活性與待測抗原的量呈負(fù)相關(guān) . 第八頁，共十六頁。 2類 : 首先固定抗體，然后同時參加待測抗原和酶標(biāo)記抗原，待測抗原與酶標(biāo)記抗原競爭有限量的固相抗體，反響后測定固相抗體與酶標(biāo)記抗原結(jié)合物上的酶活性，便可得到待測抗原的量。 酶活性強度與待測抗原呈負(fù)相關(guān)。 (2) 間接 ELISA原理 首先固定抗原，然后參加待測抗原和抗體，固相抗原與待測抗原競爭有限的第一輪抗體，反響后洗去游離的結(jié)合物，再參加酶標(biāo)記的第二抗體 (以第一抗體為抗原的酶標(biāo)記抗體 )，反響后吸取酶標(biāo)記的游離抗體，測定結(jié)合物上的酶活性。酶活性與待測抗原濃度呈負(fù)相關(guān)。 第九頁，共十六頁。 (3)半抗原的制備 抗原是指一切能刺激機體產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細(xì)胞，并能與之結(jié)合發(fā)生特異性免疫反響的物質(zhì)。 抗原具有免疫原性和反響原性。 免疫原
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