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正文內(nèi)容

放射性免疫藥盒(本科課程,)(編輯修改稿)

2025-03-26 16:01 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 b* +Ab* (過量抗體) 免疫吸附劑 或固相分離 RIA與 IRMA的工作原理主要區(qū)別 RIA IRMA 1 競爭性免疫結(jié)合分析 2 反應體系中有抗原、標記抗原和抗體 3 標記抗原 4 在標準曲線劑量反應體系中結(jié)合率越大,劑量越小,反之,則越大 5 免疫結(jié)合反應慢 1 非競爭性免疫結(jié)合分析 2 反應體系中有固相抗原、抗原與標記抗體 3 標記抗體 4 在標準曲線劑量反應體系中隨結(jié)合率增高劑量值也隨之增大 5 免疫結(jié)合反應快 特點 特異性很強,即使化學結(jié)構(gòu)很接近; 靈敏度高,可達 1014mol/L。 精確度較高,放射性活度探測不易受干擾; 應用范圍較廣,適用于多種化學結(jié)構(gòu); 操作簡單,分析速度快,樣品不需預處理。 3 放射標記免疫分析方法的特點 主要組分 標記物 標準品 抗血清 分離劑 質(zhì)控血清 二、 放射標記免疫試劑盒主要組分的制備技術(shù) (一)標記物的制備技術(shù) 核素 半衰期 衰變方式及 分支比 主要射線及能量 (keV, %) 生產(chǎn)方式 3H β(100) β (100) 6Li(n, a)3H 14C 5730y β+() EC() β 155(100) 14N(n, p)14C 35S β(100) β (100) 35Cl(n, p)35S 57Co IT(100) γ 122() 56Fe(d, n) 57Co 75Se EC(100) γ 136(58) 74Se(n, r)75Se 125I EC(100) γ 2835 124Xe(n, r)125Xe 125I 可用于放射免疫分析的放射性核素 射線易于探測 半衰期適中 易于標記 蛋白質(zhì)的I標記 直接氧化親電法 間接標記法 氯胺 T法( ChloramineT, ChT) 酶促標記法 Iodogen(氯甘尿法 ) BoltonHunter( BH)方法 其它間接標記法 1 125I的標記 2 標記物的分離純化 分離純化方法 離子交換色譜法 凝膠色譜 (Sephadex)法 薄層色譜法 高效液相色譜 (HPLC) 3 標記物的質(zhì)量鑒定 質(zhì)量評價參數(shù) 核素 (125I)利用率 放化純 (≥85%) 比活度 (≥80%) 免疫活性 (過量抗體結(jié)合率 ) 4 標記物的穩(wěn)定性及貯存條件 多肽類標記物通常采用冷凍干燥方法貯存 。 小分子化合物及單抗標記物可以液體狀態(tài)貯存 。 標記物通常在 28℃ 條件下保存,有效期約5周。 (二)抗原和抗體的制備技術(shù) 1免疫原(抗原)的制備 免疫原的
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