實(shí)驗(yàn)12小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)(編輯修改稿)
2025-03-17 16:45 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 形成根；生長素與細(xì)胞分裂素的比例小時(shí)則產(chǎn)生苗；而兩種激素的比例適中時(shí)，則產(chǎn)生無結(jié)構(gòu)的愈傷組織。 培養(yǎng)基母液配制 ? 為了使用方便和用量準(zhǔn)確，常將 大量元素 、 微量元素、鐵鹽、有機(jī)物類和激素類 分別配制成比培養(yǎng)基濃度大若干倍的母液。當(dāng)配制培養(yǎng)基時(shí)，只需按預(yù)先計(jì)算好的量吸取母液稀釋即可。 ? 母液應(yīng)保存在冰箱中備用，保存時(shí)間不可過長，當(dāng)母液出現(xiàn)沉淀或霉菌團(tuán)時(shí)，則不能使用。 培養(yǎng)基的制備 —— 母液的配制和保存 (1)大量元素母液 可配成濃度 10倍母液 。 (2)微量元素母液 可配成濃度 100倍的母液 。 (3)鐵鹽母液 可配成 100倍的母液 ， (4)有機(jī)物母液 可配成 100倍的母液 。 (5)激素母液的配制 每種激素必須單獨(dú)配成母液 ，濃度一般配成 ／ ml。 用時(shí)根據(jù)需要取用 。 因?yàn)榧に赜昧枯^少 ， 一次可配成 50ml或 100ml。 MS培養(yǎng)基母液的配制 配制母液時(shí)的注意事項(xiàng) ? 1).各化合物必須充分溶解后才能混合。 ? 2).混合時(shí)注意先后順序，特別要將鈣離子與硫酸根離子，磷酸根離子錯(cuò)開，以免產(chǎn)生硫酸鈣、磷酸鈣等不溶性化合物沉淀。 ? 3).混合時(shí)要慢，邊攪拌邊混合。 培養(yǎng)基的配制、消毒與分裝 100倍微量元素母液(10ml) 10倍大量元素母液(100ml) 調(diào) pH到 100倍鐵鹽母液 (10ml) 培養(yǎng)基 100倍有機(jī)物質(zhì)母液(10ml) 定容到 1000ml 2,4D 2mg/L 6BA 瓊脂粉６ g溶解 分裝（每瓶 30ml) 高壓滅菌 蔗糖３０ g 實(shí)驗(yàn)材料與藥品 ? 小麥籽粒 ? MS培養(yǎng)基 +2mg/L 2,4D+? 70%酒精 ? %NaCLO ? 無菌水 實(shí)驗(yàn)方法 ? 培養(yǎng)基的配制。 ? 小麥籽粒用無菌水浸泡 10小時(shí)。 ? 取材、消毒和接種。 正式接種前 30min，打開超凈工作臺(tái)上的紫外燈和風(fēng)機(jī)， 30min后接種； 上超凈臺(tái)的第一件事是關(guān)閉紫外燈并打開照明燈； 把解剖刀、鑷子、解剖針等器械浸泡在 75％酒精中； 點(diǎn)燃酒精燈； 用 75％的酒精棉球擦拭雙手； 外植體的消毒 ：把麥粒置于 70 %乙醇中浸泡 5min，之后在 %NaClO中消毒 15min，然后用無菌水沖洗 3次。 ? 超凈臺(tái)上操作
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1