20xx人教版高中生物選修3專題1第1節(jié)dna重組技術(shù)的基本工具(編輯修改稿)
2024-12-23 22:43 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 或平末端 。 (5)實(shí)質(zhì)：使特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開 。 知識(shí)貼士： ① 若限制酶切割后形成的是黏性末端 ， 則形成的兩個(gè)黏性末端是反向重復(fù)序列 。 ② 大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列為 6個(gè)核苷酸組成 ， 例如EcoRI、 SmaI限制酶識(shí)別序列由 6個(gè)核苷酸組成 ， 也有少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由 5或 8個(gè)核苷酸組成 。 2． DNA連接酶 (1 ) 分類??????????? E coli DNA 連接酶????? 來源：大腸桿菌作用：使黏性末端之 間連接T4DNA 連接酶??????? 來源： T4噬菌體作用：既能連接黏性末端 也能連接平末端， 但后者效率低 (2) 實(shí)質(zhì)：恢復(fù)被限制酶切開了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。 以下是兩種限制酶切割后形成的 DNA片段 ， 分析回答問題 。 ① GC ? ② AA T TC ? ③? GC ④? CT T AA CG ? G ? ? CG ? G (1) 其中 ① 和 ________ ____ 是由一種限制酶切割形成的____________ 末端，兩者要重 組成一個(gè) DNA 分子，所用 DNA連接酶通常是 ________ 。 (2) _______ _ 和 ______ __ 是由另一種限制酶切割形成的____________ 末端，兩者要形成重組 DNA 片段，所用 D NA 連接酶通常是 ____________ 。 [解析 ] 分析以上 4個(gè) DNA片段 ， 可清楚分析出 ①③ 為平末端 ， 連接酶應(yīng)用 T4DNA連接酶； ②④ 為黏性末端且相同 ， 連接時(shí)應(yīng)用 EcoliDNA連接酶 。 [答案 ] (1)③ 平 T4DNA連接酶 (2)② ④ 黏性 EcoliDNA連接酶 已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性 DNA分子上有 3個(gè)酶切位點(diǎn) ， 如右圖中箭頭所指 。 如果該線性 DNA分子在 3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷 ， 則會(huì)產(chǎn)生 a、 b、 c、 d四種不同長度的 DNA片段 。 現(xiàn)有多個(gè)上述線性 DNA分子 ， 若在每個(gè) DNA分子上至少有 1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷 ， 則從理論上講 ， 經(jīng)該酶酶切后 ， 這些線性 DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的 DNA片段種類數(shù)是 ( ) A． 3 B． 4 C． 9 D． 12 [答案 ] C [解析 ] 每一種限制性內(nèi)切酶切割 DNA后會(huì)留下特征性的黏性末端 ， 同時(shí)一次切割后 ， 會(huì)把 DNA分割成兩個(gè)片段 ， 且不同的限制酶切后的片段不一樣 ， 如果將題圖中的三個(gè)切割位點(diǎn)自左至右依次標(biāo)為甲 、 乙 、 丙 ， 只在甲處切 ， 可產(chǎn)生兩個(gè)片段 ， 即 a和右邊的 b＋ c＋ d段 ， 如果只在乙處切 ， 就有 a＋ b和 c＋ d段 ， 如果只在丙處切 ， 就有 a＋ b＋ c和 d段 ， 在甲 、 乙兩處同時(shí)切 ， 就有 a、 b和 c＋ d段 ， 在乙 、 丙處同時(shí)切 ， 就有 a＋ b和c、 d段 ， 在甲 、 丙兩處同時(shí)切 ， 就有 a、 b＋ c、 d段三種片段 ，在甲 、 乙 、 丙三處同時(shí)切 ， 就有 a、 b、 c、 d四種片段 。 所以本題應(yīng)該選 C。 3． “ 分子運(yùn)輸車 ” ——載體 (1)作用：一是用它作為運(yùn)載工具 ， 將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中去；二是利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量的復(fù)制 (稱為克隆 )。 (2)作為載體必須具備的條件： ① 具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn) ， 該切割位點(diǎn)必須位于載體本身必需的基因序列之外 。 ② 能夠自我復(fù)制或整合
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