20xx人教版高中生物選修3專題1 第1節(jié)《dna重組技術(shù)的基本工具》(文件)
【正文】 分子水平 基本過程 剪切 → 拼接 → 導(dǎo)入 → 表達(dá) 結(jié)果 人類需要的基因產(chǎn)物 知識貼士： 基因工程得以實(shí)現(xiàn)的理論基礎(chǔ)： ① 所有生物的 DNA都是以 4種脫氧核苷酸為基本單位 ， 構(gòu)成獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu) ， 這為不同種生物 DNA拼接成功提供物質(zhì)基礎(chǔ) 。 (3)特點(diǎn)： ① 主要切割外源 DNA， 而對自身的 DNA不起作用 ， 達(dá)到保護(hù)自身的目的； ② 只能識別雙鏈 DNA分子中特定的核苷酸序列； ③ 只能在特定的部位進(jìn)行切割 。 ② 大多數(shù)限制酶的識別序列為 6個(gè)核苷酸組成 ， 例如EcoRI、 SmaI限制酶識別序列由 6個(gè)核苷酸組成 ， 也有少數(shù)限制酶的識別序列由 5或 8個(gè)核苷酸組成 。 ① GC ? ② AA T TC ? ③? GC ④? CT T AA CG ? G ? ? CG ? G (1) 其中 ① 和 ________ ____ 是由一種限制酶切割形成的____________ 末端，兩者要重 組成一個(gè) DNA 分子，所用 DNA連接酶通常是 ________ 。 [答案 ] (1)③ 平 T4DNA連接酶 (2)② ④ 黏性 E 所以本題應(yīng)該選 C。 ③ 帶有標(biāo)記基因 ， 便于篩選 。 現(xiàn)在所用的質(zhì)粒幾乎都是人工改造的 。 而自然存在的質(zhì)粒 DNA分子并不完全具備上述條件 ， 都要進(jìn)行人工改造后才能用于基因工程操作 。 ② DNA連接酶只能在兩個(gè) DNA片段間形成磷酸二酯鍵 ， 而 DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有 DNA片段上 ， 且需要以一條 DNA鏈為模板 。 而限制酶不會(huì)切斷自身 DNA， 是因?yàn)樵谠松锛?xì)胞中 ， 其 DNA分子或者不具備這種限制酶的識別序列 ， 或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識別序列的堿基上 ， 使限制酶不能將其切開 。 若在某目的基因的兩側(cè)各有 1個(gè) EcoR I的切點(diǎn) ， 請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶 EcoR I 切 割 后 所 形 成 的 黏 性 末 端 ：__________________________________________。 [ 解析 ] (1) 質(zhì)粒作為基因表達(dá)載體的 條件之一是要有抗性基因，以便于篩選 ( 鑒別 ) 目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。 [ 答案 ] (1) 篩選 ( 鑒別 ) 目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 (2) 目的基因 — G AA T TC — ?? — G AA TTC — — CT T AA G — ?? — CT T AA G — (3) 磷酸二酯 兩種限 制酶 ( Bam H I 和 Bgl Ⅱ ) 切割得到的黏性末端相同 (4) 能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素 pB R322 質(zhì)粒 。 (4)由題意知：由于與圖三空圈相對應(yīng)的大腸桿菌能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長 ， 而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長 ， 故可推知與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落能抗氨芐青霉素 ， 但不能抗四環(huán)素 。 再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上 ， 使絨布面沾上菌落 ， 然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ， 得到如圖三的結(jié)果 (空圈表示與圖二對照無菌落的位置 )。 (1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因 ， 以便于 _________。 2． 限制酶在原核生物中的作用 原核生物容易受到自然界外源 DNA的入侵 ， 但是 ， 生物在長期的進(jìn)化過程中形成一套完善的防御機(jī)制 ， 以防止外來病原微生物的侵害 。 質(zhì)粒是小型環(huán)狀雙鏈 DNA分子而不是細(xì)胞器 ， 也不會(huì)有堿基 U。 質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能隨受體細(xì)胞 DNA的復(fù)制而復(fù)制 ， 能進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增和表達(dá) 。 ⑤ 大小適中 ， 便于操作 。 (2)作為載體必須具備的條件： ①
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