單核增生李斯特氏菌檢測概述-中加動物健康推廣服務(wù)項目-(編輯修改稿)
2025-02-24 23:25 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 檢測程序 鑒定 ? 藍(lán)色菌落檢驗（ Henry illumination） ? 典型運動：相差顯微鏡，輕微旋轉(zhuǎn)或翻跟頭 動力試驗： 7天，傘形生長 ? 過氧化氫酶 試驗：陽性 ? 革蘭氏染色 ：陽性短桿菌 ? 溶血試驗 ：穿刺接種血平板 ? 硝酸鹽還原試驗： 5天，陰性 ? 糖發(fā)酵試驗 ：葡萄糖、麥芽糖和七葉靈，李斯特菌屬反應(yīng)均為陽性，除格氏李斯特甘露醇陰性，李斯特其他種甘露醇陰性， 木糖 和 鼠李糖 最有檢測意義 動力試驗 血平板 單核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 36h， 35℃ 培養(yǎng) 血平板 無害李斯特氏菌 ATCC 33090 36h， 35℃ 培養(yǎng) 血平板 伊氏李斯特氏菌 ATCC 19119 24h， 35℃ 培養(yǎng) 單核增生李斯特氏菌檢測流程 25g樣品 +225ml BLEB基礎(chǔ)（加入丙酮酸鈉） 加入萘啶酮酸、鹽酸吖錠黃、放線菌酮 30℃ 4hr 劃線接種 OXA平板 30℃ 24hr和 48hr 科瑪嘉李氏菌顯色培養(yǎng)基 TSAYE分純 35℃ 24hr48hr 35℃ 24hr 過氧化氫酶試驗、革蘭氏染色、溶血試驗、糖發(fā)酵試驗（木糖、鼠李糖） API Listeria 35℃ 2448hr 報告結(jié)果 35℃ 1824hr 方法名稱 一次增菌 二次增菌 分離 鑒定 快速方法 SN 0184 1993 加工 MBP 30℃ ， 1824h EB 30℃ ， 24/48h MMA/ OXA （ 35℃ ， 2448h） 藍(lán)色菌落；典型運動；過氧化氫酶；革蘭氏染色；溶血試驗；尿素酶試驗；硝酸鹽還原； MRVP；三糖鐵；糖發(fā)酵；動力試驗；協(xié)同溶血 *；血清學(xué)檢驗 *；小鼠毒力試驗 * 無 未加工 EB （ 30℃ ， 24/48h） GB/T 2023 EB （ 30177。 1℃ ， 48h） MMA （ 30177。 1℃ ， 2448h） 藍(lán)色菌落；三糖鐵；動力試驗；染色鏡檢（革蘭氏染色、典型運動）；生化特性（溶血反應(yīng)、硝酸鹽還原、尿素酶、 MRVP、糖發(fā)酵）；小鼠毒力試驗；協(xié)同溶血 無 LB1 （ 30177。 1℃ ，24h） LB2 （ 30177。 1℃ ，24h） FDA BLEB+Phy （ 30℃ ， 4h） BLEB+Phy+三種抑菌劑 （ 30℃ ，20/44h） OXA/PALOM/MOX/LPM+七葉靈 +Fe3+ 推薦 BCM /ALOA / RapidL39。mono /CHROMagar Listeria 藍(lán)色菌落 *；典型運動或動力試驗；過氧化氫酶；革蘭氏染色；溶血試驗；硝酸鹽還原 *；糖發(fā)酵；協(xié)同溶血；血清學(xué)檢驗；小鼠毒力試驗 * 篩選、鑒定都可以使用快速方法 USDA UVM （ 30177。 2℃ ，22177。 2h） FB （ 35177。 2℃ ，2648177。 2h） MOX （ 35177。 2℃ ， 2648177。 2h） 初步鑒定：純菌菌落形態(tài)；典型運動； 生化鑒定： MICROID174。 Listeria或Api174。 Listeria或 BAM等方法中的傳統(tǒng)生化反應(yīng)；協(xié)同溶血 遺傳鑒定：核糖體 RNA檢測； PFGE* 篩選用的快速方法必須經(jīng)過確認(rèn)后才可使用 鑒定中用到 MICROID174。 、 Api174。、GenProbe AccuProbe174。、 GENETRAK174。 各官方方法比較 各官方方法比較 方法名稱 一次增菌 二次增菌 分離 鑒定 快速方法 CFIA MFHPB30 LEB（ UVM） （ 30℃ ，24/48h） MFB （ 35℃ ， 2448h） OXA+LPM或MOX或PALCOM 典型運動或動力試驗；溶血試驗；甘露醇；木糖；鼠李糖；快速鑒定試劑盒 *；過氧化氫酶 *；革蘭氏染色 *；協(xié)同溶血 *；血清學(xué)試驗 * 作為鑒定的可選步驟，允許使用快速方法，如Vitek或 API、Micro ID Listeria、Listera Accuprobe? ISO 112901:1996（ E） 半量 Fraser肉湯 （ 30℃ ，24177。 2h） Fraser肉湯 （ 35或 37℃ ，48177。 2h） OXA和PALCOM （ 35或 37℃， 2448h，） PALCOM平板微需氧或好氧條件培養(yǎng) 藍(lán)色菌落 *；過氧化氫酶；革蘭氏染色；動力試驗或典型運動 *；溶血試驗；糖發(fā)酵
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