【文章內容簡介】 ol I的終止序列是 18bp, 需要輔助因子。 ? RNApol II還不清楚是否有明確的終止元件。 ? 第一節(jié) 轉錄酶 ? 第二節(jié) 啟動子 ? 第三節(jié) 終止子 ? 第四節(jié) 轉錄的機制 ? 第五節(jié) 轉錄產物的后加工 ? 第六節(jié) RNA的剪接 第四節(jié) 轉錄的機制 1 起始： pol與啟動子識別結合后啟動轉錄； 2 延伸： ? 第一個堿基加上后延伸，聚合酶不斷前移。 3 終止： 轉錄終止受 DNA模板上的信號順序決定。 1 轉錄的起始 原核生物轉錄的起始 σ 核心酶 12～ 17bp 35區(qū) 移動到 10區(qū)，使之熔解 酶與 10區(qū)牢固結合 （ β亞基） 真核生物轉錄的起始 ? 三種 RNApol識別不同啟動子。 ? 轉錄起始過程需要很多 轉錄因子（ transcription factor, TF ）參與，按一定順序與 DNA形成復合物，協(xié)助 RNA pol定位于轉錄起始點。 RNA pol Ⅱ 的轉錄起始 ? RNA聚合酶 Ⅱ 與 轉錄因子 TFⅡ X形成轉錄起始復合物，共同參與轉錄起始的過程。 ? 參與的轉錄因子有： TFⅡ A、 TFⅡ B、TFⅡ D、 TFⅡ E、 TFⅡ F、 TFⅡ H、TFⅡ I、 TFⅡ J、 TFⅡ S等。 轉錄因子 轉錄復合體形成 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE TFⅡ D RNA pol Ⅱ 的轉錄起始 封閉型復合物 開放型復合物 人類 Ⅱ 型啟動子的轉錄因子 因子 分子量 功能 RNAPolⅡ ≥500K 依賴模板合成 RNA TFⅡ A 12,19,35K 穩(wěn)定 TFⅡ D和 DNA的結合，激活 TBP亞基 TFⅡ B 33K 結合模板鏈 (10～ +10 ) ，起始 PolⅡ 結合，和 TFⅡ E/F相互作用 TFⅡ D TBP,30K TBP亞基識別 TATA，將聚合酶組入復合體中， TAFs 識別不同啟動子 TFⅡ E 34K(β) 結合在 PolⅡ 的前部，使復合體的保護區(qū)延伸到下游 57K(α) TFⅡ F 74K 大亞基具解旋酶活性（ RAP74） , 38K 小亞基 RAP38和 PolⅡ 結合，介導其加入復合體 TFⅡ H 具激酶活性，可以磷酸化 PolⅡ C端的 CTD，使 PolⅡ 逸出，延伸 TFⅡ I 120K 識別 Inr，起始 TFⅡ F/D結合 TFⅡ J 在 TFⅡ F后加入復合體，不改變 DNA的結合方式 TFⅡ S RNA合成延伸 沒有 TATA框啟動子 的轉錄起始 ? 轉錄因子 參與，其中也包括 TFⅡ D。 ? TFⅡ I 具有識別 Inr序列的功能 。 哺乳動物 RNA Pol Ⅱ 上游轉錄因子結合的元件 元件 保守序列 結合 DNA的長度 轉錄因子 TATAbox TATAAAA ～ 10bp TBP CAAT box GGCCAATCT ～ 22bp CTF/NF1 GC box GGGCGG ～ 20bp SP1 Octamer ATTTGCAT ～ 20bp Oct1 Octamer ATTTGCAT 23bp Oct2 KB GGGACTTTCC ～ 10bp NFKB ATF GTGACGT ～ 20bp ATF 哺乳動物 RNA pol I 啟動子的轉錄因子 因子 結構 功能特點 UBF1 單鏈多肽 結合核心啟動子和上游控制元件 的 沒有種的特異性 SL1 4個蛋白 與細菌 σ因子 相似 ， SL1保證 RNApol TBP 準確定位； 有種的特異性 RNA polⅠ 的轉錄起始 － 170 － 160 － 150 － 140 － 130 － 120 － 110……….. － 60 － 50 － 40 － 30 － 20 － 10 ＋ 1 ＋ 10 ＋ 20 上游控制區(qū) 核心啟動子 － 170 － 160 － 150 － 140 － 130 － 120 － 110……….. － 60 － 50 － 40 － 30 － 20 － 10 ＋ 1 ＋ 10 ＋ 20 上游控制區(qū) 核心啟動子 UBF1 UBF1結合于 G－ C 豐富區(qū) SL1 SL1與 UBF1協(xié)同結合 TBP ? Pol 1 RNApol Ⅲ 的轉錄起始 參與的轉錄因子： ? TFⅢ A、 TFⅢ B、 TFⅢ C 、 TFⅡ D、 PBP、OCT1等。 基因內啟動子 起始位點 b o x A b o x C 基因內啟動子 b o x A b o x B 基因外啟動子 O CT PS E T A T A 圖 1 2 2 3 真核 RN A Po l Ⅲ 的 基因內啟動子和基因外啟動子 I 型： II 型 III型 RNA pol Ⅲ 啟動子的轉錄因子的結構和功能 因子 結構 功能 TFⅢ A 38Kda, 有 9個鋅指 結合 1型內部 啟動子 (5SrRNA基因 )的 C框 ， 使 TFⅢ C結合 C框下游，輔助 TFⅢ B定位結合 TFⅢ B 含 TBP和另外二種蛋白 定位因子 ，使 PolⅢ 結合在起始位點上 TFⅢ C 5個亞基 結合 I 、 II啟動子的 保守框，輔助 TFⅢ B定位 TFⅡ D 含 TBP亞基 結合 III啟動子的 TATA框，確定選擇 PolⅢ PBP 次近端結合蛋白 結合 III啟動子的 次近端序列元件 PSE， 和 TFⅡ D 共同輔助 TFⅢ B定位結合 3型啟動子 OCT1 結合 八聚體 OCT元件 ，增加轉錄效率 1 型內部啟動子 2 型內部啟動子 轉錄起始點 轉錄起始點 boxA boxC boxA boxB TFIIIA TFIII C TFIII C TFIII B TBP TFIII C TFIII B pol III pol III 轉錄起始點 OCT PSE TATA OCT1 PBP TFⅡ D TFⅢ B