【正文】 A b o x B 基因外啟動(dòng)子 O CT PS E T A T A 圖 1 2 2 3 真核 RN A Po l Ⅲ 的 基因內(nèi)啟動(dòng)子和基因外啟動(dòng)子 I 型： II 型 III型 RNA pol Ⅲ 啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)和功能 因子 結(jié)構(gòu) 功能 TFⅢ A 38Kda, 有 9個(gè)鋅指 結(jié)合 1型內(nèi)部 啟動(dòng)子 (5SrRNA基因 )的 C框 ， 使 TFⅢ C結(jié)合 C框下游，輔助 TFⅢ B定位結(jié)合 TFⅢ B 含 TBP和另外二種蛋白 定位因子 ，使 PolⅢ 結(jié)合在起始位點(diǎn)上 TFⅢ C 5個(gè)亞基 結(jié)合 I 、 II啟動(dòng)子的 保守框，輔助 TFⅢ B定位 TFⅡ D 含 TBP亞基 結(jié)合 III啟動(dòng)子的 TATA框，確定選擇 PolⅢ PBP 次近端結(jié)合蛋白 結(jié)合 III啟動(dòng)子的 次近端序列元件 PSE， 和 TFⅡ D 共同輔助 TFⅢ B定位結(jié)合 3型啟動(dòng)子 OCT1 結(jié)合 八聚體 OCT元件 ，增加轉(zhuǎn)錄效率 1 型內(nèi)部啟動(dòng)子 2 型內(nèi)部啟動(dòng)子 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) boxA boxC boxA boxB TFIIIA TFIII C TFIII C TFIII B TBP TFIII C TFIII B pol III pol III 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) OCT PSE TATA OCT1 PBP TFⅡ D TFⅢ B RNA pol Ⅲ 3型基因外部啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng) TBP RNA pol II TFIID TAFs TBP Pol III 啟 動(dòng) 子 TFIIIB TFIIIC TBP RNA pol III Pol I 啟 動(dòng) 子 RNA pol I SL1 UBF1 TBP Pol II 啟 動(dòng) 子 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) TATA ? TBP 的作用 ★ TBP是 Ⅲ B,Ⅱ D,SL1的亞基，和特異 DNA序列及 RNA Pol結(jié)合，使 Pol 結(jié)合在正確的位點(diǎn)上 ? TBP ，又稱定位因子， 類似于原核的 ζ因子 。 ? TFⅡ I 具有識(shí)別 Inr序列的功能 。 ? 參與的轉(zhuǎn)錄因子有： TFⅡ A、 TFⅡ B、TFⅡ D、 TFⅡ E、 TFⅡ F、 TFⅡ H、TFⅡ I、 TFⅡ J、 TFⅡ S等。 ? 轉(zhuǎn)錄起始過程需要很多 轉(zhuǎn)錄因子（ transcription factor, TF ）參與，按一定順序與 DNA形成復(fù)合物，協(xié)助 RNA pol定位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。 3 終止： 轉(zhuǎn)錄終止受 DNA模板上的信號順序決定。 ? RNApol II還不清楚是否有明確的終止元件。C的序列， 3’ 端有 4個(gè) U。 ? 終止區(qū)域富含 RNA的二級結(jié)構(gòu) ，也可能有 終止因子 存在。 第三節(jié) 終止子 ? 1 原核生物的終止子 ? 2 真核生物的終止子 2 真核生物的終止子 （ Terminator) ? 真核 mRNA的 3’端不是轉(zhuǎn)錄終止而是轉(zhuǎn)錄后切割加工產(chǎn)生的。 ? (3) 3’端寡聚 U數(shù)量不定； ? (4) 靠與 ρ的共同作用而實(shí)現(xiàn)終止 。 內(nèi)部終止子 /不依賴 ρ因子 /強(qiáng)終止子 (1) 一個(gè) 反向重復(fù)序列 ， 可形成莖環(huán)結(jié)構(gòu) ， 阻止RNA pol的前進(jìn)； (2) 莖區(qū)域 內(nèi)富含 GC， 使莖環(huán)不易解開； (3) 3’ 端上有 6個(gè) U， 和模板形成的連續(xù) UA配對較易打開 ， 便于 RNA釋放 。 兩種終止子： ? 強(qiáng)終止子 /內(nèi)部終止子 －－無需其它任何因子的幫助就可以終止核心酶 。 ? 作用： ? 在 DNA模板的特異位點(diǎn)處終止 RNA的合成。 RNApolⅡ 的啟動(dòng)子 RNApol I的啟動(dòng)子 RNApol III的啟動(dòng)子 2 真核生物的啟動(dòng)子 RNApol Ⅲ 啟動(dòng)子 ? 1）基因內(nèi)啟動(dòng)子 /下游啟動(dòng)子 /內(nèi)部控制區(qū) 由 RNApol Ⅲ 識(shí)別 Ⅰ 型 ： 5S rRNA基因啟動(dòng)子 Ⅱ 型： tRNA基因啟動(dòng)子 ? 2）基因外啟動(dòng)子 由 polⅡ 或者 pol Ⅲ 轉(zhuǎn)錄 III型： snRNA基因 基因內(nèi)啟動(dòng)子 起始位點(diǎn) b o x A b o x C 基因內(nèi)啟動(dòng)子 b o x A b o x B 基因外啟動(dòng)子 O CT PS E T A T A 圖 1 2 2 3 真核 RN A Po l Ⅲ 的 基因內(nèi)啟動(dòng)子和基因外啟動(dòng)子 I 型： II 型 III型 基因外啟動(dòng)子的上游保守序列元件： ? TATA框： 起始轉(zhuǎn)錄 ? 次近端序列元件（ proximal sequence element, PSE）：刺激啟動(dòng)子作用，增加轉(zhuǎn)錄效率； ? 八聚體 OCT元件 ：增加轉(zhuǎn)錄效率。 ? 上游控制元件（ upstream control element, UCE）： 180到 107，增加核心元件轉(zhuǎn)錄起始效率。 小結(jié) 與原核生物啟動(dòng)子的比較： （ 1）多種元件： TATA框， GC框， CAAT框，OCT等； （ 2）不同元件的組合情況： 位置、序列、距離和方向都不完全相同； （ 3）需轉(zhuǎn)錄因子參與轉(zhuǎn)錄的全過程 ：轉(zhuǎn)錄因子先和啟動(dòng)子結(jié)合，再與 RNA聚合酶一起形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物，開始轉(zhuǎn)錄的過程。 大腸桿菌 RNA聚合酶全酶所識(shí)別的啟動(dòng)子區(qū) T82T84G78A65C54A45 T80A95T45A60T96 保守序列 1 原核生物的啟動(dòng)子 2 真核生物的啟動(dòng)子 第二節(jié) 啟動(dòng)子 2 真核生物的啟動(dòng)子 三種 RNApol → 三種轉(zhuǎn)錄方式 三種啟動(dòng)子 → 三類基因， Ⅰ 類 Ⅱ 類 Ⅲ 類 RNApolⅡ 的啟動(dòng)子 RNApol I的啟動(dòng)子 RNApol III的啟動(dòng)子 RNApolⅡ 的啟動(dòng)子 ? 通用型啟動(dòng)子（無組織特異性） ? 結(jié)構(gòu)最復(fù)雜 ? 位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的上游 ? 有多個(gè)短序列元件組成 （ 1） 帽子位點(diǎn)（ cap site）： 轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn) 與 ， 多為 A （ 2） TATA框 （ Hogness 框或 GoldbergHogness 框） 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： ? 位于－ 30處 ? 一致序列為 T82A97T93A85A63（ T37） A83A50（ T37） 功能： ? 定位轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) （類似原核的 Pribnow框） , 也稱為選擇子（ selector） ? TATA是絕大多數(shù)真核基因的正確表達(dá)所必需的 （ 3） CAAT框（ CAAT box） 結(jié)