小麥rubisco單克隆抗體的制備-powerpoint文檔(編輯修改稿)
2025-02-10 23:48 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 胞與經(jīng)綿羊紅細(xì)胞免疫的小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行融合。融合由仙臺(tái)病毒介導(dǎo)，雜交細(xì)胞通過在含有次黃嘌呤（hypoxanthine， H）、 氨基喋呤（ aminopterin， A） 和胸腺嘧啶核苷（ thymidine， T） 的培養(yǎng)基（ HAT） 中生長進(jìn)行選擇。在融合后的細(xì)胞群體里，盡管 未融合的正常脾細(xì)胞 和 相互融合的脾細(xì)胞 是HGPRT+， 但不能連續(xù)培養(yǎng)，只能在培養(yǎng)基中存活幾天，而 未融合的 HGPRT骨髓瘤細(xì)胞 和 相互融合的 HGPRT骨髓瘤細(xì)胞 不能在HAT培養(yǎng)基中存活，只有 骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞形成的雜交瘤細(xì)胞 因得到分別來自親本脾細(xì)胞的 HGPRT和親本骨髓瘤細(xì)胞的連續(xù)繼代特性，而在 HAT培養(yǎng)基中存活下來。實(shí)驗(yàn)的結(jié)果完全像起始設(shè)計(jì)的那樣，最終得到了很多分泌抗綿羊紅細(xì)胞抗體的克隆化雜交瘤細(xì)胞系。 用這些細(xì)胞系注射小鼠后能形成腫瘤，即所謂雜交瘤。生長雜交瘤的小鼠血清和腹水中含有大量同質(zhì)的抗體，即單克隆抗體。? 單抗制備的原理單抗制備的原理單克隆抗體概念單克隆抗體概念? 1975年， Kohler和 Milstein建立了淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，他們把用預(yù)定抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞與能在體外培養(yǎng)中無限制生長的骨髓瘤細(xì)胞融合，形成 B細(xì)胞雜交瘤。這種雜交瘤細(xì)胞具有雙親細(xì)胞的特征，既像骨髓瘤細(xì)胞一樣在體外培養(yǎng)中能無限地快速增殖且永生不死，又能像脾淋巴細(xì)胞那樣合成和分泌特異性抗體。通過克隆化可得到來自單個(gè)雜交瘤細(xì)胞地單克隆系，即雜交瘤細(xì)胞系，它所產(chǎn)生的抗體是針對(duì)同一抗原決定簇的高度同質(zhì)的抗體，即所謂 單克隆抗體 （monoclonal antibody）， 簡(jiǎn)稱 單抗 。單抗與多抗的比較優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn)單抗針對(duì)單一抗原純度高專一性強(qiáng)重復(fù)性好能持續(xù)地?zé)o限量體外繁殖獲得高效價(jià)的單抗往往需要耗費(fèi)較多的人力物力與時(shí)間，因此其價(jià)格也較高 ,適應(yīng)性窄 多抗 識(shí)別的適應(yīng)性寬，制備價(jià)格相對(duì)
電大資料相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1