研究生-組織化學(xué)概論2(編輯修改稿)
2025-02-05 12:38 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 1min ? (15) 95%乙醇（ Ⅰ ） 1min ? (16) 95%乙醇（ Ⅱ ） 1min ? (17) 無(wú)水乙醇 1min ? (18) 無(wú)水乙醇 1min ? (19) 二甲苯（ Ⅰ ） 1min ? (20) 二甲苯（ Ⅱ ） 1min ? (21) 二甲苯（ Ⅲ ） 1 min ? (22) 中性樹(shù)膠封固 ? 冷凍切片 HE染色步驟： ? （ 1）冰凍切片固定 10～ 30 s ? （ 2）稍水洗 1～ 2 s ? （ 3）蘇木精液染色（ 60℃ ） 3min ? （ 4）流水洗去蘇木精液 5～ 10 s ? （ 5） 1%鹽酸乙醇 1～ 3 s ? （ 6）稍水洗 1～ 2 s ? （ 7）促藍(lán)液返藍(lán) 5～ 10 s ? （ 8）流水沖洗 15～ 30 s ? （ 9） %曙紅液染色 30s ? （ 10）蒸餾水稍洗 1～ 2 s ? （ 11） 80%乙醇 10 s ? （ 12） 95%乙醇 10 s ? （ 13）無(wú)水乙醇 10 s ? （ 14）無(wú)水乙醇 10 s ? （ 15）二甲苯（ Ⅰ ） 10 s ? （ 16）二甲苯（ Ⅱ ） 10 s ? （ 17）中性樹(shù)膠封固。 ?染色結(jié)果：細(xì)胞核藍(lán)色，胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色 ?注意事項(xiàng)： ? ? ? ，根據(jù)試劑新鮮程度 ? ，分化可以選擇溫水 ? ? ，封片盡量濕封 常用的特殊染色 ? 一、特殊染色的意義 ? HE染色切片中看不到的目的物 ? HE染色切片中一些難以鑒別的病變 ? HE染色切片中不明顯或容易被忽略的 目的物變得明顯易見(jiàn) ? 二、特殊染色的分類(lèi) ? 結(jié)締組織、肌肉組織、神經(jīng)組織、脂類(lèi)物質(zhì)、糖類(lèi)、色素類(lèi)、病理的內(nèi)源性沉著物、病原微生物、內(nèi)分泌、單種細(xì)胞、性染色質(zhì)、骨、血液、造血組織、核酸、酶類(lèi)等 ? 三、特殊染色的命名 ? 按發(fā)明者的姓名命名 ? 按所用染色劑命名 ? 按顯示的目的物命名 ? 采用混合性命名 ? 四、學(xué)習(xí)特染技術(shù)應(yīng)掌握的重點(diǎn) （注意事項(xiàng)） （ 1）染色方法的成敗，應(yīng)該在溫度、濃度、時(shí)間和 PH值等方面找原因。 （ 2）注意特染的應(yīng)用范圍，如某種病變應(yīng)用什么方法染色才能達(dá)到目的，一般先在 HE切片所見(jiàn)的要求去選擇適當(dāng)?shù)奶厝痉椒ǎ环N或多種。 （ 3）必須掌握各種特殊染色的結(jié)果，避免導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論或嚴(yán)重的誤診，如在網(wǎng)染時(shí)把膠元纖維誤以為網(wǎng)狀纖維。 （ 4）盡量要陽(yáng)性切片作對(duì)照，便于選擇特染方法，并與 HE切片作對(duì)照。 （ 5）特染的組織，在其固定、脫水根據(jù)要求選擇。所用的器皿都必須化學(xué)清洗。 ? 三、玻璃器皿的清潔 在病理實(shí)驗(yàn)室可用的玻璃器皿，都必須經(jīng)過(guò)清洗干凈才能使用，清洗的方法依玻璃器皿的新舊而不同。 ? 新購(gòu)玻璃器皿的處理 對(duì)于新購(gòu)買(mǎi)的玻璃器皿應(yīng)先用洗衣粉浸泡洗刷，自來(lái)水沖洗后再用 1—2%鹽酸水溶液浸泡數(shù)小時(shí)后，用自來(lái)水沖洗干凈，必要時(shí)可用少量蒸餾水洗 2次。 ? 使用后玻璃器皿的處理 每次使用后的玻璃器皿都必須及時(shí)徹底清洗干凈，以供下次實(shí)驗(yàn)之用，如輕視這一步驟，可用的玻璃器皿不夠干凈，則會(huì)影響染色效果，甚至導(dǎo)致染色失敗，特別在酶組化和銀離子反應(yīng)操作過(guò)程中更有嚴(yán)格的要求，使用后的玻璃器皿在一般清洗后，還要求用硫酸清洗液浸泡。 ? 硫酸清洗液配制 重鉻酸鉀 80g 自來(lái)水 1000ml 濃硫酸（工業(yè)用） 120m 新配制的清潔液為紅褐色，反復(fù)使用一段時(shí)間后，慢慢變成綠色，說(shuō)明清潔液已失敗，不能繼續(xù)使用應(yīng)重新配制。 ? 玻璃器皿的清洗方法 ① 任何玻璃器皿都必須用自來(lái)水沖洗，然后把殘余藥液或染液洗去。 ② 用毛刷沾洗衣粉擦干凈。 ③ 自來(lái)水沖洗，蒸餾水洗 2次。 ④ 把晾干的器皿輕輕置入清潔液浸泡數(shù)日。 ⑤ 取出器皿，用自來(lái)水把器皿內(nèi)外徹底沖洗干凈，最后用蒸餾水洗 2次。 ⑥ 把玻璃器皿倒置于有孔架上自然晾干或溫箱中烤干，最后存放櫥內(nèi)備用。 糖類(lèi) 單糖 糖類(lèi) 雙糖 淀粉 植物界 多糖 → 纖維素 糖原 → 動(dòng)物組織（動(dòng)物淀粉） 中性粘多糖 粘多糖 酸性粘多糖 ?一、糖原 ?㈠糖原的分布 ?㈡糖原染色的應(yīng)用 ? 診斷糖原累積病 ? 糖尿病的診斷及研究 ? 證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀變性 ? 用于某些腫瘤的診斷與鑒別 ?㈢ 糖原染色的種類(lèi) ? 過(guò)碘酸 — Schiff 反應(yīng)（ PAS） ? 碘染色 ? 胭脂紅染色法 ?㈣ 糖原染色原理 ?㈤ 糖原染色法、過(guò)碘酸 — Schiff反應(yīng)（ PAS） ?二、粘多糖 ?㈠ 分類(lèi)與分布 ? 分類(lèi) ：中性粘多糖 氨基已糖 游離已糖基 酸性粘多糖 氨基已糖 各種酸根 ?分布 : 中性粘多糖 胃粘膜表面上皮 十二指腸腸腺等 酸性粘多糖 呼吸道的杯狀細(xì)胞 消化道的杯狀細(xì)胞 ?（二）粘液物質(zhì)染色的應(yīng)用 ? 證實(shí)及鑒別胃粘膜的腸上皮化生 ? 研究胃癌的組織發(fā)生 ? 粘液病和粘液肉瘤 ? 軟骨粘液樣纖維瘤、粘液胚胎性橫紋肌肉瘤 ? 鑒別粘液表皮樣癌與鱗狀細(xì)胞癌 ? 鑒別粘液腺癌與未分化鱗癌 ?（三）粘液物質(zhì)染色方法 ?阿利新蘭過(guò)碘酸雪夫氏反應(yīng)（ AB/PAS） ? (四 ) 粘液物質(zhì)染色原理 ?（五）粘液物質(zhì)染色 脂類(lèi)染色 一、脂類(lèi)的定義 脂類(lèi)是油脂、類(lèi)脂以及它們的衍生物的總稱(chēng)。脂類(lèi)物質(zhì)簡(jiǎn)稱(chēng)脂質(zhì)。 二、脂類(lèi)的性質(zhì) 脂類(lèi)中最多是真正的脂肪（油），是脂肪酸和甘油形成的。在性質(zhì)上它通常是三個(gè)脂肪酸分子（飽和或不飽和的）與一個(gè)甘油分子相結(jié)合形成的甘油三酯。 絕大多數(shù)自然存在的甘油三酯是混合的甘油三酯，就是說(shuō)它們是含有兩個(gè)或三個(gè)不相同的脂肪酸。還有少部分的簡(jiǎn)單甘油三酯，它們是含有同一種脂肪酸的甘油三酯。 ? ? 脂類(lèi)的比重小于 1，所以比水輕，根據(jù)室溫及其 熔點(diǎn)呈固態(tài)或液態(tài)。熔點(diǎn)取決于兩個(gè)因素：一是脂肪酸的鏈長(zhǎng)（增加而升高）；另外就是脂類(lèi)的飽和程度（增加而升高）。 ?
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