35-dna的重組(編輯修改稿)
2025-02-02 01:12 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 細菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈 DNA分子 F+ F 性鞭毛連接 酶切單鏈 TraD TraI 目 錄 整合 F質(zhì)粒的接合過程 ? 整合在宿主染色體中的 F質(zhì)粒發(fā)生接合轉(zhuǎn)移時，質(zhì)粒轉(zhuǎn)移起點被切開，其前導(dǎo)鏈引導(dǎo)染色體 DNA單鏈轉(zhuǎn)移。 ? 進入受體菌后的單鏈 DNA復(fù)制成雙鏈形式，并可與受體菌染色體發(fā)生位點特異的重組。但往往不能使受體細胞轉(zhuǎn)變?yōu)?F+細胞。 ? 整合的 F因子被切割時，有時切割不精確而帶有部分宿主染色體基因，稱為 F?因子。 F?細胞與 F細胞雜交時，宿主細胞部分染色體基因隨 F?因子一起進入了受體細胞，使受體細胞也變成 F?細胞。細胞基因的這種轉(zhuǎn)移過程稱為性導(dǎo)。 目 錄 (geic transformation) 細菌品系由于攝取了外源 DNA（轉(zhuǎn)化因子）而發(fā)生遺傳性狀改變的現(xiàn)象稱為遺傳轉(zhuǎn)化。 能夠攝取周圍環(huán)境中游離 DNA分子的細菌細胞稱為 感受態(tài)細胞 。雖然在特定生理狀態(tài)下細菌細胞所形成的感受態(tài)是瞬間的，但在自然條件下多種細菌具有攝取外源 DNA的能力 。 例： 溶菌時，裂解的 DNA片段被另一細菌攝取。 目 錄 轉(zhuǎn)化的過程 ? 轉(zhuǎn)化需有多種酶和蛋白因子參與，如： 感受態(tài)因子 、膜聯(lián)結(jié)的 DNA結(jié)合蛋白 、 自溶素 及多種 核酸酶 等。 感受態(tài)因子 可誘導(dǎo)與感受態(tài)有關(guān)的蛋白表達， 自溶素 能使細胞表面的 DNA結(jié)合蛋白和核酸酶暴露。 ? 當外源 DNA與細胞表面的 DNA結(jié)合蛋白結(jié)合后，核酸酶使其一條鏈降解，另一條鏈被攝取，并與 感受態(tài)特異蛋白 結(jié)合轉(zhuǎn)移到染色體，與染色體 DNA重組。有的細菌能攝取雙鏈 DNA。 目 錄 CaCl轉(zhuǎn)化法： 由于有些細菌自然轉(zhuǎn)化效率很低或不發(fā)生轉(zhuǎn)化，基因工程中常采用高濃度的CaCl處理大腸桿菌，增加細胞膜的通透性，誘導(dǎo) 感受態(tài)細胞 的形成，提高重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率。 目 錄 (transduction) ? 普通性轉(zhuǎn)導(dǎo) ：是指宿主基因組任意位置的DNA成為成熟噬菌體顆粒 DNA的一部分而被帶入受體菌。 ? 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) ：某些溫和噬菌體在裝配噬菌體顆粒時，將宿主染色體整合部位的部分 DNA取代噬菌體部分 DNA被切下來，組裝成噬菌體顆粒帶入受體菌。 概念：通過噬菌體將細菌基因從供體細胞轉(zhuǎn)移到受體細胞的過程稱為轉(zhuǎn)導(dǎo) (transduction) 。 類型：兩種：普通性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 目 錄 λ噬菌體的生活史 溶菌生長途徑 (lysis pathway) 溶源菌生長途徑 (lysogenic pathway) 在 有些細菌的種屬中，可發(fā)生由細胞質(zhì)膜融合而導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)移和重組。 目 錄 概念： 在重組酶催化下 ， 在兩個 DNA序列的特異位點之間發(fā)生的重組作用稱為特異 位點 重組 (sitespecific rebination) 三、 特異 位點重組 結(jié)果：取決于重組位點的位置和方向。 ①重組位點以相反方向存在于同一 DNA分子上，發(fā)生倒位重組； ②重組位點以相同方向存在于同一 DNA分子上，形成切除重組； ③重組位點在不同 DNA分子上，發(fā)生整合重組 目 錄 重組位點反方向位于同一 DNA分子 —倒位重組 重組位點同方向位于同一 DNA分子 —切除重組 目 錄 作用： ①某些基因表達調(diào)控； ②發(fā)育中程序性 DNA重排； ③某些病毒和質(zhì)粒復(fù)制循環(huán)過程中發(fā)生的整合 與切除等。 種類： ① λ噬菌體 DNA的整合與切除 。 ② 細菌的特異位點重組； ③ 免疫球蛋白基因的重排； 目 錄 1. λ噬菌體 DNA的整合與切除 目 錄 ? λ噬菌體 DNA與宿主 DNA的 特異重組位點 稱為 附著位點 。 ? 噬菌體 DNA的附著位點為 a
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