dna重組技術(shù)的基本步驟(ppt61頁)(編輯修改稿)
2025-01-26 02:16 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 DNA 合成 下列屬于獲取目的基因的方法的是 ( ) ①利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成 ②從基因組文庫中提取 ③從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù) ⑤利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 隨堂闖關(guān)隨堂闖關(guān)1．在已知基因的核苷酸序列的情況下，獲取目的基因的最方便方法是 A、化學(xué)合成法 B、基因組文庫法 C、 CDNA文庫法 D、聚合酶鏈反應(yīng) 在基因工程中，把選出的一個(gè)目的基因（共1000個(gè)脫氧核苷酸對，其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個(gè)）放入 DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增 4次，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是（ ）個(gè) A. 540 B. 8100 C. 17280 D. 7560 在遺傳工程中，若有一個(gè)控制有利性狀的 DNA分子片段為 ATGTG／ TACAC，要使其數(shù)量增多，可用 PCR技術(shù)進(jìn)行人工復(fù)制，復(fù)制時(shí)應(yīng)給予的條件是 ①雙鏈 DNA分子為模板 ② ATGTG或 TACAC模板鏈 ③四種脫氧核苷酸 ④四種核苷酸 ⑤ DNA聚合酶 ⑥熱穩(wěn)定DNA聚合酶⑦引物 ⑧溫度變化 ⑨恒溫 A．①③④⑦⑧⑨ B．①②④⑥⑦⑧ C．①②⑤⑥⑦ D．①③⑥⑦⑧ D 下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是 ①從基因文庫中獲取目的基因 ②利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ③反轉(zhuǎn)錄法 ④通過 DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．②③ D （ 1）用一定的 _________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出 ____________。 （ 2）用 _________ _切斷目的基因，使其產(chǎn)生 _____ ____________。 （ 3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 ______處，再加入適量 ___________，形成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 限制酶 黏性末端 同一種限制酶 的黏性末端 切口 DNA連接酶 相同 : 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 — 核心 質(zhì)粒 目的基因 限制酶處理 一個(gè)切口 兩個(gè)黏性末端 兩個(gè)切口 獲得目的基因 DNA連接酶 表達(dá)載體 同一種 基因表達(dá)載體的組成 目的基因 啟動(dòng)子 : 終止子 : 標(biāo)記基因等 一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNA片段 。 位于基因的首端。 一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNA片段 。 位于基因的尾端。 啟動(dòng)子的作用： 終止子作用： 使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止 。 標(biāo)記基因作用： 是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基 因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來，如青霉素基因。 是 RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位 ，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì)。 基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的： ，并且可以遺傳給下一代。 。 思考： 作為基因工程表達(dá)載體，只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎？為什么？ 不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用，還需要有其他控制元件，如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是： （ 1） 生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)； （ 2） 通過 cDNA文庫獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄； （ 3） 目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記； （ 4） 為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；
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