dna重組技術的基本工具概述(ppt43頁)(編輯修改稿)
2025-01-26 01:54 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ） 切割磷酸二酯鍵，形成單個的脫氧核苷酸。 目的基因所在 DNA片段 載體 DNA片段 EcoRⅠ EcoRⅠ DNA連接酶 : 把切下來的 DNA片段拼接成新的 DNA. ： 催化 磷酸二酯鍵 形成 ： ⑴ Ecoli DNA連接酶 ⑵ T4 DNA連接酶 “ 分子縫合針 ” —— DNA連接酶 可把黏性末端之間的 縫隙 “ 縫合 ” 起來， Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎？ T4 DNA連接酶 還可把 平末端之間的縫隙 “ 縫合 ”起來，但效率較低 DNA連接酶 DNA聚合酶 連接 DNA鏈 連接部位 相同點 雙鏈 單鏈 在兩 DNA片段之間形 成磷酸二酯鍵 將單個核苷酸加 到已存在的核酸 片段的 3’末端的 羥基上，形成磷 酸二酯鍵 都能形成磷酸二酯鍵 二者都是蛋白質(zhì)類化合物 嘗試寫出下列序列受 EcoRI限制酶作用后的黏性末端 CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT “ 分子運輸車 ” —— 基因進入受體細胞的載體 ： ： ： 質(zhì)粒 、 λ噬菌體的衍生物和動植物病毒等。 將外源基因送入受體細胞。 ⑴ 有 1~多個限制酶切點 ⑵對受體細胞無害 ⑶使導入基因 能在受體細胞中復制、表達 ⑷ 有某些標記基因，便于篩選 ⑶假如目的基因?qū)胧荏w細胞后不能復制或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)基因生物能有預想的效果嗎？ ⑴作為分子運輸車 —— 載體，如果沒有切割位點將會怎樣？ ⑵霍亂菌的質(zhì)粒多個限制酶切點，你會用它來做分子運輸車嗎？ ⑷目的基因有沒有進入受體細胞，如何去發(fā)現(xiàn)？ 作為載體的必要條件 : Go back 質(zhì)粒的特點： 、 結(jié)構(gòu)簡單 、 獨立于細菌擬核 DNA分子外并能 自我復制 的小型 雙鏈環(huán)狀 DNA分子 。 能復制并帶著插入的目的基因一起復制 有切
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