[其它課程]dna重組技術(shù)的基本工具(編輯修改稿)
2025-05-10 22:52 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 桿菌 （ Escherichia coli R） 練習(xí)：流感嗜血桿菌的 d菌株( Haemophilus influenzae d )中先后分離到 3種限制酶，則分別命名為 : HindⅠ 、 HindⅡ 和 HindⅢ ⒊作用特點(diǎn)（特異性） 識別 特定 核苷酸序列，并且使每條鏈中 特定部位 的兩個(gè)核苷酸之間的 磷酸二酯鍵 斷開。 T 磷酸二酯鍵 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A Go back 限制酶 DNA解旋酶 區(qū)別 限制性內(nèi)切酶與 DNA解旋酶有什么區(qū)別？ 切割特定的核苷酸序列的 磷酸二酯鍵 將 DNA兩條鏈的 氫鍵打開形成兩條單鏈 大多數(shù)限制酶的識別序列由 6個(gè)核苷酸組成，少數(shù)的識別序列 由 5或 8個(gè)核苷酸組成 . 想一想限制酶所識別的 序列有什么特點(diǎn)？ 反向?qū)ΨQ、重復(fù)排列 的。 ： 產(chǎn)生黏性末端或平末端 黏性末端 黏性末端 EcoRⅠ ? 什么叫黏性末端？ 被限制酶切開的 DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè) 伸出的核苷酸 ，它們之間正好 互補(bǔ)配對 ，這樣的切口叫 黏性末端 。 SmaⅠ 平末端 平末端 ? 要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性 (平 )末端？ 要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性 (平 )末端。 ? 如果把兩種來源不同的 DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？ 會產(chǎn)生 相同的黏性 (平 )末端 ，然后讓兩者的黏性 (平 )末端 黏合 起來，就似乎可以合成重組的 DNA分子了。 思考 ? 二、 “ 分子縫合針 ” —— DNA連接酶 ①作用 : 把切下來的 DNA片段拼接成新的 DNA，即將 脫氧核糖和磷酸 連接起來 . ②作用原理： 催化磷酸二酯鍵形成 可把黏性末端之間的 縫隙“縫合” 起來， Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵 T4 DNA連接酶 還可把 平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低 T4DNA連接酶 ③類型： 類型 EcoliDNA連接酶 T4DNA連接酶 來源 功能 大腸桿菌 T4噬菌體 恢復(fù) 磷酸
研究報(bào)告相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1