【文章內(nèi)容簡介】 ? 7. 國內(nèi)外新技術(shù)、新方法等的不定期培訓(xùn)。 培訓(xùn)的實施細則 ? 1. 理論培訓(xùn) : ? (l) 培訓(xùn)目標 : ① 熟悉本實驗室的各項規(guī)章制度和操作規(guī)范 ,形成初步的實驗室工作概念。②了解本實驗室從事工作的特點以及各種微生物的危害評估文件。 ? (2) 培訓(xùn)方式 : 講解。 ? (3) 培訓(xùn)內(nèi)容 : ① 本實驗室各項成文的規(guī)章制度 :生物安全防護、廢棄物處理、安全制度、衛(wèi)生制度、責(zé)任制度、試劑定購制度、儀器使用制度等。②實驗室的各項規(guī)章制度和生物安全管理手冊。 ? (4) 考核 : 由本實驗室三位工作人員組織對理論學(xué)習(xí)的書面考試和面試工作。書面考試注重其掌握的準確程度 ,面試主要測試其熟練程度和靈活應(yīng)變能力。考核本合格者須重新學(xué)習(xí) ,不能進入下一步的培訓(xùn)。 培訓(xùn)的實施細則 ? 2. 常規(guī)技能培訓(xùn) : (l) 培訓(xùn)目標 : ① 熟練基本實驗操作和儀器的使用；②初步培養(yǎng)實驗的基本觀念和良好的實驗習(xí)慣。 (2) 培訓(xùn)方式 : 現(xiàn)場實驗。 (3) 培訓(xùn)內(nèi)容 : ① 衛(wèi)生打掃 : 實驗室地面、實驗臺面、超凈臺面、垃圾處理以及打掃得先后順序；工作休息區(qū)的衛(wèi)生打掃。 ②實驗室常規(guī)操作技術(shù) :包括無菌觀念、平板的制備、劃線分離、顯微鏡觀察、菌落接種、活化、菌體收集、菌（毒）種保存等。 ③ 小型儀器的使用：微量移液器和移液管的使用、 pH計和試紙、天平、混勻器、微波爐、電磁爐、水浴鍋等。 ④玻璃儀器的清洗 : 量筒、燒杯、三角瓶等。 ⑤大型儀器的使用 : 普通冰箱和低溫冰箱 (存放和處理樣品 )、 高壓鍋、離心機、液氮罐、生物安全柜、生化培養(yǎng)箱、電泳設(shè)備、超凈臺、 PCR 儀、搖床、超聲破碎儀、顯微鏡等。 ⑥消毒和滅菌方法 : 物理滅菌（紫外、過濾、灼燒、高壓 )法、化學(xué)滅菌 (熏蒸、酒精、消毒液 ) 法等。 ⑦辦公用品使用的培訓(xùn) : 電話、傳真機、電腦、打印機等。 五、 實驗 室 設(shè)備 ? 選擇設(shè)備時應(yīng)符合一些基本原則，即： ? 在設(shè)計上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸 ? 建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求 ? 設(shè)備裝配后應(yīng)無毛刺、銳角以及易松動的部件 ? 設(shè)備的設(shè)計、建造與安裝應(yīng)便于操作、易于維護、清潔、清除污染和進行質(zhì)量檢驗。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。 ? 需要詳細咨詢設(shè)備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格，以確保設(shè)施具備必要的安全特性。 基本生物安全設(shè)備 ? 移液輔助器 —— 避免用口吸的方式移液。有不同設(shè)計的多種產(chǎn)品可供使用。 ? 生物安全柜，在以下情況使用： ? —— 處理感染性物質(zhì)；如果使用密封的安全離心杯，并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣，則這類材料可在開放實驗室離心 ? —— 空氣傳播感染的危險增大時 ? —— 進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時（包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動物鼻腔接種以及從動物或卵胚采集感染性組織）。 ? 一次性塑料接種環(huán)，也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán)，以減少生成氣溶膠。 ? 螺口蓋試管及瓶子。 ? 用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或其他適當(dāng)工具。 ? 一次性巴斯德塑料移液管，盡量避免使用玻璃制品。 ? 在投入使用前，像高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進行驗收。應(yīng)參照生產(chǎn)商的說明書定期檢測。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項（ 1） ? 生物安全柜分為 I、 II、 III個不同等級。 ? I級能夠保護工作人員和周圍環(huán)境，但不能切實保護操作樣本，因此生物安全柜 I級不能用于食品微生物檢驗的無菌操作。 ? II級生物安全柜在設(shè)計上不但能提供個體防護，而且能保護工作臺面的物品不受空氣的污染，其有四種不同的類型（ A A B1和 B2型），可用于操作危險度II級和 III級的感染性物質(zhì)。 ? III級生物安全柜則可提供更高級別的生物安全保護。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項（ 2） ? 生物安全柜使用要點： （ 1）使用者應(yīng)熟知生物安全柜的使用方法和局限性； （ 2）使用前后，工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑擦拭消毒，生物安全柜風(fēng)機應(yīng)至少運行 5min完成凈化后使用； （ 3）使用中不能打開玻璃觀察檔板，應(yīng)穿個體防護服； （ 4）生物安全柜內(nèi)盡量少放置器材或標本、不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)； （ 5）放入生物安全柜的物品應(yīng)采用 70％酒精來清除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M行實驗，以吸收可能濺出的液滴； （ 6）耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及移液適宜于盛放盤不應(yīng)放在生物安全柜的外面；（ 7）在工作臺面上的操作應(yīng)按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行； （ 8）在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火，可使用電熱式接種環(huán)滅菌器，最好使用一次性無菌接種環(huán)； （ 9）盡可能避免雙臂頻繁進出生物安全柜，否則會干擾空氣屏障的完全性，影響防護； （ 10）一旦發(fā)生生物學(xué)危害物品溢出，應(yīng)在生物安全柜運行狀態(tài)下清理，使用有效的消毒劑，盡可能減少氣溶膠，所有接觸溢出的物品都要進行消毒或高壓滅菌。 （ 11）每年應(yīng)對生物安全防護效果進行測試，定期維護。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項（ 3） ? 離心機 離心機是最常用的實驗室儀器，最易導(dǎo)致實驗室污染。掌握正確的離心機使用技術(shù)十分重要。 (1)在使用實驗室離心機時，儀器良好的機械性能是保障微生物安全的前提條件。 (2)應(yīng)按照操作手冊來操作離心機。 (3)離心機放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個子工作人員也能夠看到離心機內(nèi)部，以正確放置十字軸和離心桶。 (4)離心管和盛放離心標本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成，或最好為塑料制品，并且在使用前應(yīng)檢查是否破損。 (5)用于離心的試管和標本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊 (最好使用螺旋蓋 )。 (6)離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行。 (7)離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對，并在裝載離心管后正確平衡。 (8)操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。 (9)空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸餾水或乙醇 (異丙醇， 7 O％ )來平衡。 (1 O)對于危險度 3級和 4級的微生物，必須使用可封口的離心桶 (安全杯 )。 (11)當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會導(dǎo)致漏液。 (1 2)應(yīng)當(dāng)檢查離心機內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯，應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范。 (1 3)應(yīng)當(dāng)檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細微裂痕。 (1 4)每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染。 (1 5)使用后應(yīng)當(dāng)將離心桶倒置存放使平衡液流干。 (1 6) 良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護，以防止感染性氣溶膠和可擴散粒子的產(chǎn)生。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項（ 4） ? 移液管、移液器 (1)應(yīng)使用移液設(shè)備，嚴禁用口吸取。 (2)所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。 (3)不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。 (4)感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。 (5)不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。 (6)刻度對應(yīng) (mark— to— mark)移液管不需要排出最后一滴液體，因此最好使用這種移液管。 (7)污染的移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑