microrna轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究及sci論文策略課件(編輯修改稿)
2025-01-19 07:09 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 的細(xì)胞中已有 miRNA的高表達(dá)：大約提升 2~5倍。（ 2）如果目的細(xì)胞中目的 miRNA低表達(dá)或無表達(dá)：大約能提升 50~1000倍。2023年 12月四 . 如何下調(diào) MicroRNAv如何下調(diào) miRNA，實(shí)現(xiàn) lossoffunction研究？（ 1）化學(xué)合成的 miRNA antisens oligo。優(yōu)點(diǎn)：比較經(jīng)濟(jì)；合成時(shí)間較短缺點(diǎn)：作用時(shí)間短；轉(zhuǎn)染效率受限制2023年 12月（ 2）載體形式的 miRNA inhibitor。優(yōu)點(diǎn)：可長期穩(wěn)定作用；轉(zhuǎn)染效率高缺點(diǎn)：構(gòu)建周期較長2023年 12月如何構(gòu)建載體形式的 miRNA inhibitor方法一： miRNA sponge2023年 12月vmiRNA sponge作用效果2023年 12月如何構(gòu)建載體形式的 miRNA inhibitor方法二： miRNA Decoy（ TuD RNAs）2023年 12月2023年 12月vmiRNA Decoy作用效果2023年 12月五 . MicroRNA靶基因驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)promoter 報(bào)告基因 miRNA靶序列CMVpSV40pTKpRlucFlucEGFP全段 3’UTR部分 3’UTRβgal2023年 12月2023年 12月2023年 12月v檢測方法（ 1） miRNA靶標(biāo)載體、 內(nèi)參熒光素酶載體、 miRNA mimics或 miRNA過表達(dá)載體 共轉(zhuǎn)染。（ 2）帶有內(nèi)參熒光素酶的 miRNA靶標(biāo)載體、 miRNA mimics或 miRNA過表達(dá)載體 共轉(zhuǎn)染。 然后做雙熒光素酶檢測實(shí)驗(yàn)。2023年 12月v進(jìn)一步確定目的 miRNA和靶基因之間的關(guān)系（ 1）構(gòu)建含突變靶位點(diǎn)的 miRNA靶標(biāo)載體。 其它步驟同前。（ 2）靶基因表達(dá)檢測： 目的 miRNA上調(diào)或下調(diào)過程中，靶基因
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