學(xué)習(xí)情境一細(xì)菌發(fā)酵制藥(編輯修改稿)
2025-01-18 23:17 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 用碳源限量而氮源豐富的配方。培養(yǎng)溫度一般為 37℃ 。細(xì)菌菌體培養(yǎng)時間一般為 1~2天，產(chǎn)芽孢的細(xì)菌培養(yǎng)則需要5~10天。 ? (1)菌種培養(yǎng)：采取大腸桿菌 ASl375。普通牛肉培養(yǎng)基，接種后于 37℃ 培養(yǎng) 24h。 (2)種子培養(yǎng)。16%玉米漿，接種量 1%一 %， 37℃ 溫度，通氣攪拌培養(yǎng) 4～ 8h。 ? 其過程如下： ? 試管 → 三角瓶 → 搖床 → 種子罐 LOGO 液體培養(yǎng)法（三角瓶搖床振蕩或轉(zhuǎn)式培養(yǎng)） LOGO 生產(chǎn)車間種子制備 ? ⑴種子罐的作用： ? 主要是使菌體，接入發(fā)酵罐能迅速生長，達(dá)到一定的菌體量，以利于產(chǎn)物的合成。 ? ⑵種子罐級數(shù)的確定 ? 種子罐級數(shù) ：是指制備種子需逐級擴(kuò)大培養(yǎng)的次數(shù)，取決于： ? ①菌種生長特性、菌體繁殖速度； ? ②所采用發(fā)酵罐的容積。 ? 細(xì)菌 ：生長快，種子用量比例少，級數(shù)也較少，二級發(fā)酵。 ? 茄子瓶 → 種子罐 → 發(fā)酵罐 LOGO 確定種子罐級數(shù)需注意的問題 ? 種子級數(shù)越少越好，可簡化工藝和控制，減少染菌機(jī)會 ? 種子級數(shù)太少，接種量小，發(fā)酵時間延長，降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率，增加染菌機(jī)會 ? 雖然種子罐級數(shù)隨產(chǎn)物的品種及生產(chǎn)規(guī)模而定。但也與所選用工藝條件有關(guān)。如改變種子罐的培養(yǎng)條件，加速了孢子發(fā)芽及菌體的繁殖，也可相應(yīng)地減少種子罐的級數(shù)。 LOGO 二、種子質(zhì)量的控制 ? (一 )影響孢子質(zhì)量的因素及控制 ? 影響孢子質(zhì)量的因素通常有：培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)時間和冷藏時間等。 ? 1 、 培養(yǎng)基 ? （ 1）培養(yǎng)基所用原料要經(jīng)過發(fā)酵試驗(yàn)合格才可使用； ? （ 2）嚴(yán)格控制滅菌后培養(yǎng)基的質(zhì)量； ? （ 3）斜面培養(yǎng)基使用前，需在適當(dāng)溫度下放置一定時間； ? （ 4）供生產(chǎn)用的孢子培養(yǎng)基要用比較單一的氮源，作為選種或分離用的培養(yǎng)基則采用較復(fù)雜的有機(jī)氮源。 LOGO 種齡與接種量 種齡 ：種子培養(yǎng)時間。 一般選擇對數(shù)期，縮短發(fā)酵周期。 接種量 ：移入的種子液體積與接種后培養(yǎng)液體積比。 多數(shù)抗生素的接種量在 7%15%，有時 2025%。依據(jù)具 體的發(fā)酵類型和工藝條件而定。 溫度： 溫度直接影響生長和酶的合成； 最適溫度 。 LOGO ? pH值：對微生物有明顯的影響 各種微生物都有生長的最適 pH。培養(yǎng)基 pH值在發(fā)酵時要受菌體代謝的影響。 調(diào)節(jié)方法 (1) 酸堿溶液中和 (2) 緩沖溶液 (3) 生理緩沖劑 LOGO ? 通氣攪拌 攪拌： 促進(jìn)氧的溶解，營養(yǎng)物質(zhì)與代謝產(chǎn)物的分散。 通氣： 通氣量的多少以 溶解氧 來衡定。 LOGO ? 泡沫 危害 ： 影響微生物對氧的吸收。 消泡方法： （ 1） 消泡劑：天然動植物油、石油化工礦物油；改性油，表面活性劑（有機(jī)硅聚合物）； （ 2） 機(jī)械消泡： （ 3）改變培養(yǎng)基成分。 LOGO ? 染菌的控制 ? 染菌原因 ： 設(shè)備、管道、閥門漏損、發(fā)酵罐結(jié)構(gòu)“死角”、 滅菌不徹底 、空氣凈化不好、 無菌操作不嚴(yán) 、菌種不純； ? 種子罐級數(shù) ? 種子罐級數(shù)越少，越有利于簡化工藝，便于控制，減少染菌。 LOGO 任務(wù) 4 發(fā)酵罐的使用和維護(hù) LOGO 一、發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu) 空氣預(yù)處理器 電動閥 電磁流量計 空氣預(yù)濾器 空氣精濾器 蒸汽過濾器 pH 電極 電動閥（夾套進(jìn)冷水） 電動閥（夾套進(jìn)熱水） 通風(fēng)管 1消沫電極 1消沫器 1攪拌器 1檢測溫度的電熱偶 1 DO電極 16擋板 17電機(jī) 1減速器 1接種孔 出水閥 2夾套 2冷凝水排除閥 2取樣與放料閥（三向閥門） 圖 16 100L全自動實(shí)驗(yàn)罐結(jié)構(gòu)示意圖 LOGO 二、發(fā)酵罐的使用 ? （一）空氣過濾器的滅菌操作 ? 滅菌前的準(zhǔn)備 ? 啟動蒸汽發(fā)生器 將自來水引入水處理裝置進(jìn)行除雜、軟化處理，處理后留入貯水灌，然后開啟自動控制開關(guān)進(jìn)行加熱，蒸汽壓力達(dá)到 。 ? 啟動冷凍機(jī) 將自來水引入冷凍機(jī)，開啟冷水機(jī)電源開關(guān)制冷。當(dāng)冷水溫度達(dá)到 10℃ 時，可供空氣預(yù)處理使用。 ? 啟動空氣壓縮機(jī) 啟動前，先關(guān)閉空氣管路上所有閥門，然后打開空氣壓縮機(jī)電源開關(guān)，啟動空氣壓縮機(jī)。當(dāng)空氣壓縮機(jī)的壓力達(dá)到
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