發(fā)酵工程原理與技術(shù)第二章(編輯修改稿)
2024-10-08 20:42 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 基礎(chǔ)： 基因突變 。 誘變育種 自然突變： 自然條件下出現(xiàn)的基因突變 。 誘發(fā)突變 ：用各種物理和生物因素 、 化學(xué)因素人工誘發(fā)的基因突變 。 誘變劑處理使菌種發(fā)生突變頻率和變異幅度提高 — 獲得特性優(yōu)良變異菌株的幾率高 。 誘變育種 主要步驟 出發(fā)菌株的誘變處理 和 突變體的篩選。 前進 出發(fā)菌株誘變處理 包括： 出發(fā)菌株的選擇 誘變劑的選擇 誘變劑量和處理時間的確定 返 回 （ 1） 出發(fā)菌株 出發(fā)菌株應(yīng)產(chǎn)量高 、 對誘變劑敏感性大 、 變異幅度廣 。 幾個應(yīng)注意的問題 （ 2） 復(fù)合誘變因素的使用 野生型菌株 用單一誘變因素有時能取得好效果； 老菌種 單一誘變因素重復(fù)使用突變效果不高 ， 可利用復(fù)合因素 、 擴大誘變幅度 ， 提高誘變效果 。 青霉菌選育 ：先以氮芥處理很短時間而不引起突變 ，再用 UV處理 ， 可使誘變頻率大為提高 。 提高突變頻率可獲得高產(chǎn)菌株 。 幾個應(yīng)注意的問題 乙烯亞胺和 UV復(fù)合處理，氯化鋰和 UV復(fù)合處理，都用得較普遍，且有一定成效。 氯化鋰 本身無誘變作用，與一些誘變因子一起使用時能促進突變。 幾個應(yīng)注意的問題 （ 3） 劑量選擇 變異率取決于誘變劑量 ， 變異率和致死率之間有一定關(guān)系 。 用致死率作為選擇適宜劑量的依據(jù) 。 合適劑量 ：同時增加變異幅度與正突變 。 幾個應(yīng)注意的問題 絕大部分個體死亡 少數(shù)存活 多數(shù)未變 少數(shù)突變 多數(shù)負變 少數(shù)正變 多數(shù)幅度小 少數(shù)幅度大 多數(shù)不宜投產(chǎn) 少數(shù)適宜投產(chǎn) 存活率 突變率 正變率 高產(chǎn)率 投產(chǎn)率 （ 4） 變異菌株的篩選 誘變目的 ：高產(chǎn)菌株 、 新產(chǎn)物 。 幾個應(yīng)注意的問題 突變體的篩選 一般經(jīng)初篩和復(fù)篩 初篩 ：一般 定性 ， 更多的是通過 平板 采用變色圈 、 透明圈 、 抑制圈 、 生長圈或沉淀圈等方法測定 某變異特性的 存在 ， 粗略推算出產(chǎn)量 ， 有時也用液體培養(yǎng) 。 復(fù)篩： 對初篩結(jié)果的菌株生產(chǎn)性能作比較精確的 定量 測定 還需通過小型和中型發(fā)酵投產(chǎn)試驗才能用于生產(chǎn) 例子 前進 1 2 3 1 2 3 初篩 對照 (HC0 =HC1+ HC2 + HC3) ( HC1＞ HC0 能力增強 ) ( HC2＜ HC0 能力減弱 ) ( HC3= HC0 能力不變 ) 誘變 1 2 3 3 對照＞ 能力增強＜ 能力減弱能力不變誘變 誘變后的突變株會繼續(xù)變異 ， 低單位菌株在傳代過程中往往占優(yōu)勢 ， 因此復(fù)篩中常常出現(xiàn)產(chǎn)量高低不穩(wěn)的狀態(tài) ，必須進行自然分離 — 誘變育種和雜交育種必須環(huán)節(jié) 。 自然選育和誘變育種交替使用可獲高產(chǎn)菌株
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