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正文內(nèi)容

發(fā)酵工程原理與技術(shù)第二章(留存版)

  

【正文】 有些微生物的產(chǎn)物對(duì)篩選沒(méi)有任何選擇性?xún)?yōu)勢(shì) 。可用于生產(chǎn)多種酶制劑、抗生素、有機(jī)酸及甾體激素等。還可通過(guò)藻類(lèi)將 CO2轉(zhuǎn)變?yōu)槭?;?guó)外還有從 “ 藻類(lèi)農(nóng)場(chǎng) ”獲得氫能的報(bào)道。也可在液體培養(yǎng)基中,檢測(cè)抗菌活性。 為此 , 菌株應(yīng)定期純化 , 保存優(yōu)良菌種 (復(fù)壯 )。 幾個(gè)應(yīng)注意的問(wèn)題 絕大部分個(gè)體死亡 少數(shù)存活 多數(shù)未變 少數(shù)突變 多數(shù)負(fù)變 少數(shù)正變 多數(shù)幅度小 少數(shù)幅度大 多數(shù)不宜投產(chǎn) 少數(shù)適宜投產(chǎn) 存活率 突變率 正變率 高產(chǎn)率 投產(chǎn)率 ( 4) 變異菌株的篩選 誘變目的 :高產(chǎn)菌株 、 新產(chǎn)物 。 誘導(dǎo)型不能利用乳糖,不長(zhǎng);組成型產(chǎn)酶,能利用乳糖,生長(zhǎng),被富集。 大腸桿菌乳糖操縱子 i基因 P O Lac Z Lac Y lac A 有乳糖時(shí) 調(diào)節(jié)蛋白亞基 調(diào)節(jié)蛋白 阻遏蛋白 RNA聚合酶 i基因 P O Lac Z Lac Y lac A 誘導(dǎo)物乳糖 無(wú)活性的 阻遏蛋白 轉(zhuǎn)錄 翻譯 β 半乳糖苷酶 β 半乳糖苷通透酶 β 半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶 mRNA 沒(méi)有乳糖時(shí) 誘導(dǎo)酶弊端 誘導(dǎo)酶的生產(chǎn)需要誘導(dǎo)物,而且受到誘導(dǎo)物的種類(lèi)、數(shù)量以及分解產(chǎn)物的影響。 提高突變頻率可獲得高產(chǎn)菌株 。 自然突變 互變異構(gòu)效應(yīng) : 五種堿基 第六位上的酮基和氨基 , G 和 T可以酮式或烯醇式出現(xiàn) , A 和 C可以氨基或亞氨基形式出現(xiàn) 。根據(jù)蛋白質(zhì)水解圈的大小判斷蛋白酶的產(chǎn)生能力 。 工業(yè)生產(chǎn)常用的微生物 ?霉菌( mould):喜偏酸性環(huán)境。 發(fā)酵工業(yè)微生物菌種的分離和選育 ?微生物菌種的分離 ?微生物菌種的選育 微生物菌種的分離 ?施加選擇性壓力分離法 ?隨機(jī)分離方法 施加選擇壓力的分離方法 富集培養(yǎng) 供給特殊培養(yǎng)基或加入某些抑制劑。 隨機(jī)分離方法 篩選 藥理活性化合物的篩選 酶靶法: 基本原理:一種化合物如在體外具有抑制代謝過(guò)程的某一關(guān)鍵酶的作用 , 它在體內(nèi)一般也具有相應(yīng)的藥理作用 。 實(shí)際生產(chǎn)中 , 從高產(chǎn)批號(hào)中取樣分離單菌落 ,從中選 出 穩(wěn)定菌株 用于生產(chǎn) 。 幾個(gè)應(yīng)注意的問(wèn)題 突變體的篩選 一般經(jīng)初篩和復(fù)篩 初篩 :一般 定性 , 更多的是通過(guò) 平板 采用變色圈 、 透明圈 、 抑制圈 、 生長(zhǎng)圈或沉淀圈等方法測(cè)定 某變異特性的 存在 , 粗略推算出產(chǎn)量 , 有時(shí)也用液體培養(yǎng) 。 組成型突變株篩選 ② 交替培養(yǎng)法 含誘導(dǎo)物(乳糖)中培養(yǎng) —— 組成型快 —— 不含誘導(dǎo)物(葡萄糖)中培養(yǎng) —— 誘導(dǎo)型失酶 —— 反復(fù)。 誘導(dǎo)酶 適應(yīng)性酶 ,是依賴(lài)于某種底物或底物的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物的存在而合成的酶。 青霉菌選育 :先以氮芥處理很短時(shí)間而不引起突變 ,再用 UV處理 , 可使誘變頻率大為
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