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正文內(nèi)容

bsl-2實(shí)驗(yàn)室生物安全管理手冊(cè)(編輯修改稿)

2024-12-19 11:20 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 部位的腔壁是否被沾染或弄臟。如污染明顯,應(yīng)重新評(píng)估離心操作規(guī)程。 13.應(yīng)當(dāng)每天檢查離心轉(zhuǎn)子和離心管套是否有腐蝕或細(xì)微裂痕。 14.每次使用后,要清除離心管套、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染。 15.使用后離心管套應(yīng)當(dāng)?shù)怪么娣攀蛊胶庖毫鞲伞? 16.當(dāng)使用離心機(jī)時(shí),可能噴射出可在空氣中傳 播的感染性顆粒。如果將離心機(jī)放置在傳統(tǒng)的前開(kāi)式的 I 級(jí)或Ⅱ級(jí)生物安全柜內(nèi),這些粒子由于運(yùn)動(dòng)過(guò)快而不能被安全柜內(nèi)的氣流截留。而在Ⅲ級(jí)生物安全柜內(nèi)封閉離心時(shí),可以防止生成的氣溶膠廣泛擴(kuò)散。但是,良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護(hù),以防止感染性氣溶膠和可擴(kuò)散粒子的產(chǎn)生。 3。 3. 8 勻漿器\搖床\攪拌器和超聲處理器操作的使用 1.實(shí)驗(yàn)室不能使用家用 (廚房 )勻漿器,因?yàn)樗鼈兛赡苄孤┗蜥尫艢馊苣z,必須配備并使用實(shí)驗(yàn)室專用攪拌器和消化器 (stomacher)。 2. 蓋子、杯子或瓶子應(yīng)當(dāng)保持正常狀態(tài),沒(méi) 有裂縫或變形。蓋子應(yīng)能封蓋嚴(yán)密,襯墊也應(yīng)處于正常狀態(tài)。 3.在使用勻漿器、搖床和超聲處理器時(shí),容器內(nèi)會(huì)產(chǎn)生壓力,含有感染性物質(zhì)的氣溶膠就可能從蓋子和容器間隙逸出。由于玻璃可能破碎而釋放感染性物質(zhì)并傷害操作者,使用塑料容器,尤其是聚四氟乙烯 (po1ytetranuoroe thylene, PTFE)容器。 4.使用勻漿器、搖床和超聲處理器時(shí),必須用一個(gè)結(jié)實(shí)透明的塑料箱覆蓋設(shè)備,使用結(jié)束后消毒??赡艿脑挘@些儀器可在生物安全柜內(nèi)覆蓋塑料罩進(jìn)行操作。 5.操作結(jié)束后,在生物安全柜內(nèi)打開(kāi)容器。 6.使用超聲處 理器的人員應(yīng)進(jìn)行聽(tīng)力保護(hù)。 3。 3. 9 組織研磨器的操作使用 1.使用玻璃研磨器時(shí)應(yīng)戴手套,并用一塊具有吸收性的軟物包住研磨器。塑料 (聚四氟乙烯 )研磨器更加安全。 2.操作和打開(kāi)組織研磨器時(shí)應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。 3. 3. 10 冰箱與冷柜的維護(hù)和使用 1.冰箱、低溫冷柜和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔,應(yīng)清理出所有在儲(chǔ)存過(guò)程中破碎的安瓿和試管等物品。清理時(shí)應(yīng)戴厚橡膠手套并進(jìn)行面部防護(hù),清理后要對(duì)內(nèi)表面進(jìn)行消毒。 2.儲(chǔ)存在冰箱內(nèi)的所有容器應(yīng)當(dāng)清楚地標(biāo)明內(nèi)裝物品的學(xué)名、儲(chǔ)存日期和儲(chǔ)存者的姓名。未標(biāo)明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高 壓滅菌并丟棄。 3.應(yīng)當(dāng)保存一份凍存物品的清單。 4.除非采用有效防爆措施,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液并冰箱門上應(yīng)明確標(biāo)示 3. 3. 11 裝有凍干感染性物質(zhì)安瓿的開(kāi)啟操作 當(dāng)打開(kāi)裝有凍干物的安瓿時(shí)必須小心,因?yàn)槠鋬?nèi)部可能處于負(fù)壓,瞬間進(jìn)入的空氣可能使一些物質(zhì)擴(kuò)散進(jìn)入空氣。安瓿應(yīng)該在生物安全柜內(nèi)打開(kāi),建議按下列步驟打開(kāi)安瓿: 1.首先清除安瓿外表面的污染。 2.如果管內(nèi)有棉花或纖維塞,可以在管上靠近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡。 3.用一團(tuán)酒精浸泡的棉花將安瓿包起來(lái)以保護(hù)雙手,然后手持安瓿從標(biāo)記的銼痕處 打開(kāi)。 4.將頂部小心移去并按污染物處理。 5.如果塞子仍然在安瓿上,用消毒鑷子除去。 6.緩慢向安瓿中加入液體來(lái)重懸凍干物,避免出現(xiàn)泡沫。 3. 3. 1 感染性物質(zhì)保存安瓿的存放 裝有感染性物質(zhì)的安瓿不能浸入液氮中,因?yàn)檫@樣會(huì)造成有裂痕或密封不嚴(yán)的安瓿在取出時(shí)破碎或爆炸。如果需要低溫保存,安瓿應(yīng)當(dāng)儲(chǔ)存在液氮上面的氣相中。此外,感染性物質(zhì)應(yīng)儲(chǔ)存在低溫冰柜或干冰中。當(dāng)從冷凍儲(chǔ)存器中取出安瓿時(shí),實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)當(dāng)進(jìn)行眼睛和手的防護(hù)。以這種方式儲(chǔ)存的安瓿在取出時(shí)應(yīng)對(duì)外表面進(jìn)行消毒。 3. 3. 13 樣品的收集、標(biāo)記 和運(yùn)輸 1.始終遵循常規(guī)預(yù)防措施;所有操作均要戴手套 2.應(yīng)當(dāng)由受過(guò)培訓(xùn)的人員來(lái)采集病人或動(dòng)物的血樣。 3.在靜脈抽血時(shí),應(yīng)當(dāng)使用一次性的安全的抽真空設(shè)備取代傳統(tǒng)的針頭和注射器,因?yàn)檫@樣可以使血液直接采集到帶塞的運(yùn)輸管和/或培養(yǎng)管中。用完后自動(dòng)廢棄針頭。 4.裝有樣品的試管應(yīng)置于適當(dāng)容器中運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)也應(yīng)這樣說(shuō)明書(shū)應(yīng)當(dāng)分開(kāi)放置在防水袋或信封內(nèi)。 3. 3. 14 顯微觀察的薄膜和涂片 用于顯微觀察的血液、唾液和糞便樣品在固定和染色時(shí),并不必殺死涂片上的所有微生物和病毒。應(yīng)當(dāng)用鑷子拿取 這些東西,恰當(dāng)儲(chǔ)存,并經(jīng)清除污染和/或高壓滅菌后再丟棄。 3. 3. 15 自動(dòng)化儀器 (超聲處理器、渦旋混合器 )的操作 1.為了避免液滴和氣溶膠的擴(kuò)散,這些儀器應(yīng)采用封閉型的。 2.排出物應(yīng)當(dāng)收集在封閉的容器內(nèi)進(jìn)一步高壓滅菌和/或廢棄。 3.在每一步完成后應(yīng)根據(jù)操作指南對(duì)儀器進(jìn)行消毒。 3. 3. 16 動(dòng)物組織處理操作 1.組織樣品應(yīng)當(dāng)采用福爾馬林固定小塊樣品,如針頭活檢樣品,能夠在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)固定和消毒,但是較大樣品則可能需要幾天時(shí)間。 2.應(yīng)當(dāng)避免冰凍切片。如果必須進(jìn)行冰凍切片,應(yīng)當(dāng)罩住冰凍機(jī),操作者要戴安全防護(hù) 罩 (面具 )。清除污染時(shí),儀器的溫度要升至 20~C。 加熱與高壓消毒操作規(guī)程 3. 4. 1 加熱消毒 1 加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段。 “干 ”熱沒(méi)有腐蝕性,可用來(lái)處理實(shí)驗(yàn)器材中許多可耐受 160~C 或更高溫度 2~ 4 小時(shí)的物品。燃燒或焚化也是一種干熱方式。高壓滅菌的濕熱法則最為有效。 2 煮沸并不一定能殺死所有的微生物或病原體,但如果其他方法 (化學(xué)殺菌、清除污染、高壓滅菌 )不可行或沒(méi)有條件時(shí),也可以作為一種最起碼的消毒措施 3 滅菌后的物品必須小心操作并保存,以保證在使用之前不再被污染。 3. 4. 2 高壓滅 菌 1 高壓滅菌的技術(shù)指標(biāo) 壓力飽和蒸汽滅菌 (高壓滅菌 )是對(duì)實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行滅菌時(shí)最有效和最可靠的方法。對(duì)于大多數(shù)目的,下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果: ——134℃、 3 分鐘 ——126℃、 10 分鐘 ——121℃、 15 分鐘 ——115℃、 25 分鐘 2 高壓滅菌器的裝載 為了利于蒸汽的滲透和空氣排出,高壓滅菌物品應(yīng)松散包裝放置在滅菌器內(nèi)。要使蒸汽能夠作用到其內(nèi)容物。通過(guò)高壓滅菌器內(nèi)的蒸汽,由下而上置換空氣并經(jīng)排氣孔排出。當(dāng)所有的空氣排出后,關(guān)閉排氣孔的閥門,緩慢加 熱使壓力和溫度上升到安全閥預(yù)置的水平。此時(shí)記為滅菌開(kāi)始時(shí)間。滅菌結(jié)束后停止加熱,讓溫度下降到 80℃以下再打開(kāi)蓋子。 4 高壓滅菌器使用注意事項(xiàng) 下列規(guī)定能夠減小操作壓力容器時(shí)會(huì)發(fā)生的危害: ( 1)高壓滅菌器的操作和日常維護(hù)應(yīng)由受過(guò)良好培訓(xùn)的人員負(fù)責(zé)。預(yù)防性的維護(hù)程序應(yīng)包括:由有資質(zhì)人員定期檢查滅菌器內(nèi)部、門的密封性以及所有的儀表和控制器。 ( 2)應(yīng)使用飽和蒸汽,并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)試劑,這些物質(zhì)可能污染正在滅菌的物品。 ( 3)所有要高壓的物品都應(yīng)放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中;滅菌器內(nèi) 不能塞得過(guò)緊,否則蒸汽不能均勻作用于裝載物。 ( 4)當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時(shí),互鎖安全裝置可以防止門被打開(kāi),而沒(méi)有互鎖裝置的高壓滅菌器,應(yīng)當(dāng)關(guān)閉主蒸汽閥并待溫度下降到 80℃以下時(shí)再打開(kāi)門。 ( 5)即使溫度下降到 80℃以下,操作者打開(kāi)門時(shí)也應(yīng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)氖痔缀兔嬲謥?lái)進(jìn)行防護(hù)。 ( 6)在進(jìn)行高壓滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測(cè)中,生物指示 劑或熱電偶計(jì)應(yīng)置于每件高壓滅菌物品的中心。最好在 “最大”裝載時(shí)用熱偶計(jì)和記錄儀進(jìn)行定時(shí)監(jiān)測(cè),以確定滅菌程序是否恰當(dāng)。 ( 7
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