【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 度與理論塔板高度關(guān)系 56 采用 恒線速度方式 ，通常能得到 最高 的 柱 分離效率 。 x 30m , df= He:150kPa, , 柱溫 平均線速度 載氣不同控制方式比較 57 min 0 25000 50000 75000 2.465 80 33 54 34 81 4 min 0 25000 50000 75000 1.867 05 17 33 94 44 1 min 0 25000 50000 75000 1.265 00 32 89 38 2 33 2 線速度 : 15cm/s 線速度 : 20cm/s 線速度 : 30cm/s 恒線速度應(yīng)用數(shù)據(jù) 58 ?為什么必須進(jìn)行色譜柱老化？ 新色譜柱含有溶劑和高沸點(diǎn)物質(zhì)，所以基線不穩(wěn)，出現(xiàn)鬼峰和噪聲；舊柱長(zhǎng)時(shí)間未用，也存在同樣問(wèn)題。 一般采用升溫老化，即從室溫程序升溫到最高溫度，并在高溫段保持?jǐn)?shù)小時(shí)。 新柱老化時(shí)，不要連接檢測(cè)器。 ?每天都要進(jìn)行老化嗎？ 視儀器基線情況，確定是否需要老化及老化時(shí)間 。 色譜柱的老化 第五部分 檢測(cè)器 60 檢測(cè)器 載氣種類 測(cè)定濃度 應(yīng)用 氫火焰離子化 （ FID） 氦氣、氮?dú)? 數(shù) ppm以上 有機(jī)化合物 電子捕獲 （ ECD） 氮?dú)? 數(shù) ppb以上 有機(jī)鹵素 等化合物 火焰光度 （ FPD） 氦氣、氮?dú)? 約 硫、磷 化合物 火焰熱離子 （ FTD） 氦氣、氮?dú)? 數(shù) ppb以上 氮、磷 化合物 熱導(dǎo)（ TCD） 氦氣、氫氣、 氮?dú)?、氬? 50ppm以上 無(wú)機(jī)氣體、 有機(jī)化合物 常用檢測(cè)器 61 FID檢測(cè)器 62 FID檢測(cè)器進(jìn)樣過(guò)程 63 ? 氫氣、空氣的比例 1:10。 ? 檢測(cè)器溫度設(shè)置高于色譜柱實(shí)際工作的溫度，建 議使用溫度 ≥250℃ 。 ? 在未接上色譜柱時(shí)，不要打開(kāi)氫氣閥門。 ? 必須在溫度升高后再點(diǎn)火，關(guān)閉時(shí)，應(yīng)先熄火再 降溫。 ? 因故障導(dǎo)致火焰熄滅，應(yīng)盡量關(guān)閉氫氣閥門，排 除了故障重新點(diǎn)火時(shí)，再打開(kāi)氫氣閥門。 FID檢測(cè)器使用事項(xiàng) 64 ECD檢測(cè)器 65 ECD檢測(cè)器進(jìn)樣過(guò)程 66 ? 氣路要安裝氣體過(guò)濾器和氧氣捕集器。 ? ECD使用溫度為 250～ 350℃ ，否則檢測(cè)器很難 平衡，建議使用溫度為 300℃ 。 ? ECD升溫前通載氣約 10min，先升檢測(cè)器溫度再 升進(jìn)樣口、柱溫。 ? ECD電流最大為 2nA，通常為 ～ 1nA。 ECD檢測(cè)器使用事項(xiàng) 67 FPD檢測(cè)器 68 FPD檢測(cè)器進(jìn)樣過(guò)程 69 ? 建議 FPD使用溫度 ≥250℃ 。 ? FPD的氫氣、空氣流量與 FID不同。 ? 必須在溫度升高后再點(diǎn)火，關(guān)閉時(shí)，應(yīng)先熄火再 降溫。 ? 濾光片表面應(yīng)清潔無(wú)污物，勿用手觸摸其表面。 FPD檢測(cè)器使用事項(xiàng) 70 FTD檢測(cè)器 71 FTD檢測(cè)器進(jìn)樣過(guò)程 72 ?銣珠：避免樣品中帶水。 ?氣源：載氣 N2或 He，要求純度 %。 一般 He的靈敏度高。 空氣最好是選鋼瓶空氣，無(wú)油。 氫氣要求純度 %。 ?使用 FTD時(shí)，不推薦使用含氰基固定液的色譜柱，比如OV1701。 FTD檢測(cè)器使用事項(xiàng) 73 TCD檢測(cè)器 74 ? 載氣中含有氧氣時(shí)，熱絲壽命會(huì)縮短，所以載氣中 必須徹底除氧。 ? 用氫氣作載氣時(shí)，氣體排至室外。 ? 檢測(cè)器通電之前，一定要確保載氣已經(jīng)通過(guò)了檢測(cè) 器，防止熱絲燒斷。 ? 檢測(cè)器電流越高，靈敏度越高，但燈絲壽命會(huì)縮短。 ? 使用應(yīng)注意尾吹氣不能關(guān)閉，默認(rèn)值為 8mL/min。 ? 關(guān)機(jī)時(shí)一定要先關(guān)檢測(cè)器電源，然后關(guān)載氣。 TCD檢測(cè)器使用事項(xiàng) 第六部分 數(shù)據(jù)分析 76 ?良好的峰面積重現(xiàn)性，一般 RSD%在 ～ 3% ?工作曲線具有良好的線性 ?峰形正常，避免拖尾峰和前沿峰 (柱選擇恰當(dāng)、襯管無(wú)污染、溫度及流量設(shè)定 ) ?色譜峰分離良好 (分離度 ) 數(shù)據(jù)可靠性判斷 77 1. 檢查是否漏氣 用檢漏液檢查各連接部位，并確認(rèn)峰面積重現(xiàn)性。 2. 檢查色譜柱是否良好 長(zhǎng)時(shí)間使用，因吸附、固定液流失、固定液分解及 污染，造成柱劣化，更換新柱。 3. 檢查襯管是否正常 確認(rèn)襯管有無(wú)破損、污染，確認(rèn)石英棉的位置。 4. 樣品性質(zhì)，是否易分解 對(duì)于不穩(wěn)定的樣品應(yīng)注意保存溫度，要避光并注意 存放時(shí)間。 數(shù)據(jù)不良時(shí)的檢查措施 78 ? 峰處理參數(shù)（半峰寬 ， 斜率 ， 漂移 ， 變參時(shí)間等） ? 定性：保留時(shí)間及允許誤差（時(shí)間窗％，時(shí)間帶） ? 定量： 定量方法： 面積歸一法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法等 工作曲線的制作： 曲線點(diǎn)數(shù)：一點(diǎn)、兩點(diǎn)及多點(diǎn) 曲線計(jì)算：線性、折線、二次曲線、三次曲線 計(jì)算方法 79 峰面積處理參數(shù) 80 ? Slope：斜率，用來(lái)判斷出峰起點(diǎn)、終點(diǎn)以及濾除低平噪聲 ? Drift：漂移，判斷相鄰峰的積分方式 ? Width：半峰寬，峰的半高寬，排除峰寬小于最小峰寬的峰 ? ：變參時(shí)間，根據(jù)時(shí)間自動(dòng)改變峰寬和斜率 ? Minimum area：最小峰面積，排除面積小于該值的峰 基本積分參數(shù) 81 Slope 斜率的設(shè)定 82 Drift Drift Drift Drift Drift Drift 注： 1) 設(shè)定值為 0時(shí)，工作站將自動(dòng)判斷 2) 如 Drift與基線至峰谷連線較接近時(shí)，積分面積值可能變化較大 Drift 漂移值的設(shè)定 83 ?控制斜率測(cè)試時(shí)間： 10 半峰寬 ?推薦值：填充柱 5 s 毛細(xì)柱 2 s或 3 s 半峰寬 ：設(shè)為最窄峰的半高寬，單位：秒 Width 半峰寬的設(shè)定 84 ?變參時(shí)間：根據(jù)時(shí)間自動(dòng)改變峰寬和斜率 等度洗脫時(shí)，出峰時(shí)間越長(zhǎng)，峰越寬 設(shè)定值為 0時(shí)，根據(jù)寬度自動(dòng)判斷 默認(rèn)值為 1000，此時(shí)該參數(shù)不起作用 在實(shí)際使用中，一般使用默認(rèn)設(shè)定 變參時(shí)間的設(shè)定 85 保留時(shí)間允許誤差： ?時(shí)間窗 (%)：相對(duì)允差 一般設(shè)為 5% ?時(shí)間帶：絕對(duì)允差 一般設(shè)為 ~ min 絕對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)保留時(shí)間 定性參數(shù) 86 面積歸一法 校準(zhǔn)面積歸一法 外標(biāo)法 內(nèi)標(biāo)法 定量方法 87 面積歸一法 各組分濃度以面積百分比表示，該結(jié)果可以確認(rèn)大概的濃度，但 有誤差。 校準(zhǔn)面積歸一法 用質(zhì)量響應(yīng)因子對(duì)峰面積進(jìn)行修正，用該法測(cè)定的濃度比前者準(zhǔn) 確，但前提是樣品中所有組分都出峰，否則也有誤差存在。 這兩種方法應(yīng)用的必須條件是： 1） 樣品中所有組分都出峰。 2） 所有峰面積計(jì)算必須準(zhǔn)確。 定量方法（一） 88 未知樣 組分 A 峰面積 1000 2022 500 1000 總面積 : 4500 + + = + 1000 4500 = % 組分 A的濃度為： ? 不需標(biāo)樣 ? 組分的靈敏度相近 ? 得到大致濃度 (不能用于精確定量 ) 面積歸一法 89 標(biāo)樣 (等量組分混合 ) 峰面積 1000 1500 1000 500 + + + 組分 A的濃度為 未知樣 組分 A 峰面積 1000 2022 500 1000 校正后的總面積 : 2417 + + = + 相對(duì)靈敏度 2 3 2 1 : : : 相對(duì)靈敏度 2 3 2 1 500 2417 = % ? 需要所有組分的標(biāo)樣 校準(zhǔn)面積歸一法 90 外標(biāo)法 該法是應(yīng)用最廣泛的方法之一，其誤差來(lái)源主要是進(jìn)樣誤差，因此，分析前一定要做面積重復(fù)性（即進(jìn)樣重復(fù)性）實(shí)驗(yàn)。 內(nèi)標(biāo)法 在樣品中添加內(nèi)標(biāo)物，通過(guò)組分與內(nèi)標(biāo)峰的面積比，對(duì)組分進(jìn)行 定量。 該方法減小了進(jìn)樣誤差對(duì)定量結(jié)果的影響。 定量方法（二） 91 100 濃度 (ppm) 1000 峰面積 700 70 未知樣 1uL 組分 A 峰面積 : 700 標(biāo)樣 1uL（ 組分 A 100ppm） 組分 A 峰面積 : 1000 組分 A的濃度為 70ppm ? 需要標(biāo)樣 ? 目標(biāo)組分被檢測(cè)到，就可定量 ? 進(jìn)樣量的誤差直接影響定量結(jié)果 外標(biāo)法 92 未知樣+IS:100ppm 1uL 組分 A 1 濃度比 面積比 標(biāo)樣 1uL 組分 A:100ppm 內(nèi)標(biāo) :100ppm 組分 A 峰面積 1200 1000 面積比