【文章內(nèi)容簡介】 度與理論塔板高度關(guān)系 56 采用 恒線速度方式 ，通常能得到 最高 的 柱 分離效率 。 x 30m , df= He:150kPa, , 柱溫 平均線速度 載氣不同控制方式比較 57 min 0 25000 50000 75000 2.465 80 33 54 34 81 4 min 0 25000 50000 75000 1.867 05 17 33 94 44 1 min 0 25000 50000 75000 1.265 00 32 89 38 2 33 2 線速度 : 15cm/s 線速度 : 20cm/s 線速度 : 30cm/s 恒線速度應(yīng)用數(shù)據(jù) 58 ?為什么必須進行色譜柱老化？ 新色譜柱含有溶劑和高沸點物質(zhì)，所以基線不穩(wěn)，出現(xiàn)鬼峰和噪聲；舊柱長時間未用，也存在同樣問題。 一般采用升溫老化，即從室溫程序升溫到最高溫度，并在高溫段保持?jǐn)?shù)小時。 新柱老化時，不要連接檢測器。 ?每天都要進行老化嗎？ 視儀器基線情況，確定是否需要老化及老化時間 。 色譜柱的老化 第五部分 檢測器 60 檢測器 載氣種類 測定濃度 應(yīng)用 氫火焰離子化 （ FID） 氦氣、氮氣 數(shù) ppm以上 有機化合物 電子捕獲 （ ECD） 氮氣 數(shù) ppb以上 有機鹵素 等化合物 火焰光度 （ FPD） 氦氣、氮氣 約 硫、磷 化合物 火焰熱離子 （ FTD） 氦氣、氮氣 數(shù) ppb以上 氮、磷 化合物 熱導(dǎo)（ TCD） 氦氣、氫氣、 氮氣、氬氣 50ppm以上 無機氣體、 有機化合物 常用檢測器 61 FID檢測器 62 FID檢測器進樣過程 63 ? 氫氣、空氣的比例 1:10。 ? 檢測器溫度設(shè)置高于色譜柱實際工作的溫度，建 議使用溫度 ≥250℃ 。 ? 在未接上色譜柱時，不要打開氫氣閥門。 ? 必須在溫度升高后再點火，關(guān)閉時，應(yīng)先熄火再 降溫。 ? 因故障導(dǎo)致火焰熄滅，應(yīng)盡量關(guān)閉氫氣閥門，排 除了故障重新點火時，再打開氫氣閥門。 FID檢測器使用事項 64 ECD檢測器 65 ECD檢測器進樣過程 66 ? 氣路要安裝氣體過濾器和氧氣捕集器。 ? ECD使用溫度為 250～ 350℃ ，否則檢測器很難 平衡，建議使用溫度為 300℃ 。 ? ECD升溫前通載氣約 10min，先升檢測器溫度再 升進樣口、柱溫。 ? ECD電流最大為 2nA，通常為 ～ 1nA。 ECD檢測器使用事項 67 FPD檢測器 68 FPD檢測器進樣過程 69 ? 建議 FPD使用溫度 ≥250℃ 。 ? FPD的氫氣、空氣流量與 FID不同。 ? 必須在溫度升高后再點火，關(guān)閉時，應(yīng)先熄火再 降溫。 ? 濾光片表面應(yīng)清潔無污物，勿用手觸摸其表面。 FPD檢測器使用事項 70 FTD檢測器 71 FTD檢測器進樣過程 72 ?銣珠：避免樣品中帶水。 ?氣源：載氣 N2或 He，要求純度 %。 一般 He的靈敏度高。 空氣最好是選鋼瓶空氣，無油。 氫氣要求純度 %。 ?使用 FTD時，不推薦使用含氰基固定液的色譜柱，比如OV1701。 FTD檢測器使用事項 73 TCD檢測器 74 ? 載氣中含有氧氣時，熱絲壽命會縮短，所以載氣中 必須徹底除氧。 ? 用氫氣作載氣時，氣體排至室外。 ? 檢測器通電之前，一定要確保載氣已經(jīng)通過了檢測 器，防止熱絲燒斷。 ? 檢測器電流越高，靈敏度越高，但燈絲壽命會縮短。 ? 使用應(yīng)注意尾吹氣不能關(guān)閉，默認(rèn)值為 8mL/min。 ? 關(guān)機時一定要先關(guān)檢測器電源，然后關(guān)載氣。 TCD檢測器使用事項 第六部分 數(shù)據(jù)分析 76 ?良好的峰面積重現(xiàn)性，一般 RSD%在 ～ 3% ?工作曲線具有良好的線性 ?峰形正常，避免拖尾峰和前沿峰 (柱選擇恰當(dāng)、襯管無污染、溫度及流量設(shè)定 ) ?色譜峰分離良好 (分離度 ) 數(shù)據(jù)可靠性判斷 77 1. 檢查是否漏氣 用檢漏液檢查各連接部位，并確認(rèn)峰面積重現(xiàn)性。 2. 檢查色譜柱是否良好 長時間使用，因吸附、固定液流失、固定液分解及 污染，造成柱劣化，更換新柱。 3. 檢查襯管是否正常 確認(rèn)襯管有無破損、污染，確認(rèn)石英棉的位置。 4. 樣品性質(zhì)，是否易分解 對于不穩(wěn)定的樣品應(yīng)注意保存溫度，要避光并注意 存放時間。 數(shù)據(jù)不良時的檢查措施 78 ? 峰處理參數(shù)（半峰寬 ， 斜率 ， 漂移 ， 變參時間等） ? 定性：保留時間及允許誤差（時間窗％，時間帶） ? 定量： 定量方法： 面積歸一法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法等 工作曲線的制作： 曲線點數(shù)：一點、兩點及多點 曲線計算：線性、折線、二次曲線、三次曲線 計算方法 79 峰面積處理參數(shù) 80 ? Slope：斜率，用來判斷出峰起點、終點以及濾除低平噪聲 ? Drift：漂移，判斷相鄰峰的積分方式 ? Width：半峰寬，峰的半高寬，排除峰寬小于最小峰寬的峰 ? ：變參時間，根據(jù)時間自動改變峰寬和斜率 ? Minimum area：最小峰面積，排除面積小于該值的峰 基本積分參數(shù) 81 Slope 斜率的設(shè)定 82 Drift Drift Drift Drift Drift Drift 注： 1) 設(shè)定值為 0時，工作站將自動判斷 2) 如 Drift與基線至峰谷連線較接近時，積分面積值可能變化較大 Drift 漂移值的設(shè)定 83 ?控制斜率測試時間： 10 半峰寬 ?推薦值：填充柱 5 s 毛細(xì)柱 2 s或 3 s 半峰寬 ：設(shè)為最窄峰的半高寬，單位：秒 Width 半峰寬的設(shè)定 84 ?變參時間：根據(jù)時間自動改變峰寬和斜率 等度洗脫時，出峰時間越長，峰越寬 設(shè)定值為 0時，根據(jù)寬度自動判斷 默認(rèn)值為 1000，此時該參數(shù)不起作用 在實際使用中，一般使用默認(rèn)設(shè)定 變參時間的設(shè)定 85 保留時間允許誤差： ?時間窗 (%)：相對允差 一般設(shè)為 5% ?時間帶：絕對允差 一般設(shè)為 ~ min 絕對保留時間、相對保留時間 定性參數(shù) 86 面積歸一法 校準(zhǔn)面積歸一法 外標(biāo)法 內(nèi)標(biāo)法 定量方法 87 面積歸一法 各組分濃度以面積百分比表示，該結(jié)果可以確認(rèn)大概的濃度，但 有誤差。 校準(zhǔn)面積歸一法 用質(zhì)量響應(yīng)因子對峰面積進行修正，用該法測定的濃度比前者準(zhǔn) 確，但前提是樣品中所有組分都出峰，否則也有誤差存在。 這兩種方法應(yīng)用的必須條件是： 1） 樣品中所有組分都出峰。 2） 所有峰面積計算必須準(zhǔn)確。 定量方法（一） 88 未知樣 組分 A 峰面積 1000 2022 500 1000 總面積 : 4500 + + = + 1000 4500 = % 組分 A的濃度為： ? 不需標(biāo)樣 ? 組分的靈敏度相近 ? 得到大致濃度 (不能用于精確定量 ) 面積歸一法 89 標(biāo)樣 (等量組分混合 ) 峰面積 1000 1500 1000 500 + + + 組分 A的濃度為 未知樣 組分 A 峰面積 1000 2022 500 1000 校正后的總面積 : 2417 + + = + 相對靈敏度 2 3 2 1 : : : 相對靈敏度 2 3 2 1 500 2417 = % ? 需要所有組分的標(biāo)樣 校準(zhǔn)面積歸一法 90 外標(biāo)法 該法是應(yīng)用最廣泛的方法之一，其誤差來源主要是進樣誤差，因此，分析前一定要做面積重復(fù)性（即進樣重復(fù)性）實驗。 內(nèi)標(biāo)法 在樣品中添加內(nèi)標(biāo)物，通過組分與內(nèi)標(biāo)峰的面積比，對組分進行 定量。 該方法減小了進樣誤差對定量結(jié)果的影響。 定量方法（二） 91 100 濃度 (ppm) 1000 峰面積 700 70 未知樣 1uL 組分 A 峰面積 : 700 標(biāo)樣 1uL（ 組分 A 100ppm） 組分 A 峰面積 : 1000 組分 A的濃度為 70ppm ? 需要標(biāo)樣 ? 目標(biāo)組分被檢測到，就可定量 ? 進樣量的誤差直接影響定量結(jié)果 外標(biāo)法 92 未知樣+IS:100ppm 1uL 組分 A 1 濃度比 面積比 標(biāo)樣 1uL 組分 A:100ppm 內(nèi)標(biāo) :100ppm 組分 A 峰面積 1200 1000 面積比