第四章微生物培養(yǎng)基的類型及配制(編輯修改稿)
2025-09-11 20:33 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 /4～～ 1/3管管 平板：平板： 13~15ml培養(yǎng)基的、培養(yǎng)基的 滅滅 菌菌（（ 1）含糖類或明膠的培養(yǎng)基：）含糖類或明膠的培養(yǎng)基： 113℃℃ 滅菌滅菌15分鐘或分鐘或 115℃℃ 滅菌滅菌 10分鐘。分鐘。 （（ 2）無(wú)糖培養(yǎng)基：）無(wú)糖培養(yǎng)基： 121℃℃ 滅菌滅菌 15~20分鐘。分鐘。 （（ 3）） 血液、體液和抗生素等以無(wú)菌操作技血液、體液和抗生素等以無(wú)菌操作技術(shù)抽取后再加入冷卻至約術(shù)抽取后再加入冷卻至約 50℃℃ 左右的培養(yǎng)左右的培養(yǎng)基中?；?。 （（ 4）） 瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后冷至瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后冷至 55℃℃ 60℃℃ 時(shí)取出，再擺置成適當(dāng)斜面。時(shí)取出，再擺置成適當(dāng)斜面。培養(yǎng)基的、培養(yǎng)基的 質(zhì)質(zhì) 量量 測(cè)試測(cè)試（１）如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培（１）如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其最終養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其最終 pH。 （２）將全部培養(yǎng)基放入（２）將全部培養(yǎng)基放入 36177。177。 1176。176。 C恒溫箱培養(yǎng)過(guò)夜，恒溫箱培養(yǎng)過(guò)夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng)，即棄去。如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng)，即棄去。 （３）用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種（３）用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種 1~2管或瓶培養(yǎng)基，培管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)養(yǎng) 24～～ 48小時(shí)，如無(wú)菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好。應(yīng)追查小時(shí)，如無(wú)菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用?！ ○B(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用?！ ∨囵B(yǎng)基的保存、培養(yǎng)基的保存 （（ 1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基不能超過(guò)兩周）基礎(chǔ)培養(yǎng)基不能超過(guò)兩周 （（ 2）生化試驗(yàn)培養(yǎng)基不宜超過(guò)一周，）生化試驗(yàn)培養(yǎng)基不宜超過(guò)一周， （（ 3）選擇性或鑒別性培養(yǎng)最好當(dāng)天使用，）選擇性或鑒別性培養(yǎng)最好當(dāng)天使用，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過(guò)傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過(guò) 3天。天。 培培 養(yǎng)養(yǎng) 基配基配 制制 –器材器材 培養(yǎng)基 、玻璃器皿天平秤、 藥 匙 培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基配制 –儀器儀器 殺菌鍋 (Autoclave)無(wú) 菌操作臺(tái) (Laminarflow)培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的配制 –裝裝 水水 1. 以 量筒 裝取適當(dāng)量 蒸餾 水 于玻璃容器中 2. 于玻璃容器上 標(biāo)示培養(yǎng)基名稱 培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基配制 –秤藥秤藥 1. 放上秤藥紙並 歸零 2. 以秤藥匙舀出適當(dāng)量藥品 (請(qǐng)看培養(yǎng)基配方上說(shuō)明 )培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基配制 –溶解培養(yǎng)基溶解培養(yǎng)基 傾倒培養(yǎng)基時(shí)小心不要沾到玻璃壁上 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) –配藥結(jié)束配藥結(jié)束 1. 清理配藥桌面與天平 2. 清洗秤藥匙，擦干放回 3. 藥品放回藥品柜 培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基配制 –分裝分裝 1. 調(diào)整 分注器 (Dispensette)刻度 2. 分裝試管 3. 蓋上試管蓋 放入 殺菌鍋 (Autoclave)滅菌 培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基配制 –滅菌滅菌加水蓋過(guò)鐵板 放東西 關(guān)門 調(diào)整溫度時(shí)間 關(guān)緊瀉壓伐 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) –殺菌鍋的殺菌鍋的 使用使用注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) –殺菌鍋使用殺菌鍋使用 滅菌結(jié)束后，等壓力降回零時(shí)才可打開門 進(jìn)入殺菌鍋 之物品，蓋子不可關(guān)太緊或太松 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) –殺菌鍋使用殺菌鍋使用 拿滅菌后物品請(qǐng)記得帶 耐 熱 手套 培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基配制 –平板培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基 滅過(guò)菌之固體培養(yǎng)基于 無(wú)菌操作臺(tái) (Laminar flow)內(nèi)倒制平板培養(yǎng)基 (Plate)日光燈 UV燈 風(fēng)扇 思考題思考題加入培養(yǎng)基中的抑制劑有什么作用，常用的、加入培養(yǎng)基中的抑制劑有什么作用，常用的抑制劑有哪些？抑制劑有哪些？ 在制、在制 備備 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 時(shí)時(shí) ，將各，將各成份溶化成份溶化 時(shí)時(shí) 要注意哪要注意哪 些問(wèn)題？些問(wèn)題？ 在制、在制 備備 培培養(yǎng)基養(yǎng)基 時(shí)時(shí) ，如何，如何 進(jìn)進(jìn) 行培養(yǎng)基行培養(yǎng)基 pH的初步的初步 調(diào)正？調(diào)正？ 如何、如何 選擇選擇 培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的 滅滅 菌條件？菌條件？ 如何、如何 進(jìn)進(jìn) 行培養(yǎng)基的保存？行培養(yǎng)基的保存？第二節(jié)、微生物檢驗(yàn)的基本操作技術(shù)第二節(jié)、微生物檢驗(yàn)的基本操作技術(shù)主要內(nèi)容主要內(nèi)容l 無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù) l M的接種與分離技術(shù)的接種與分離技術(shù) l 微生物的培養(yǎng)方法微生物的培養(yǎng)方法 l 微生物的生長(zhǎng)現(xiàn)象與觀察微生物的生長(zhǎng)現(xiàn)象與觀察一、無(wú)菌技術(shù)一、無(wú)菌技術(shù)（一）什么是無(wú)菌技術(shù)（一）什么是無(wú)菌技術(shù)l 指在微生物實(shí)驗(yàn)工作中，控制或指在微生物實(shí)驗(yàn)工作中，控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。系列操作方法和有關(guān)措施。 （二）無(wú)菌環(huán)境（二）無(wú)菌環(huán)境l無(wú)菌室無(wú)菌室 l無(wú)菌柜無(wú)菌柜 l
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