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正文內(nèi)容

真核轉(zhuǎn)染穩(wěn)定篩選標記及原理(編輯修改稿)

2024-09-01 10:36 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 trp1, ura3, his3, leu2, lys2。 ?顯性選擇標記,用于野生型酵母菌的轉(zhuǎn)染。 G418篩選。 哺乳動物細胞 遺傳性標記 ?胸苷激酶基因( tk)選擇系統(tǒng) ?二氫葉酸還原酶基因( dhfr)選擇系統(tǒng) ?黃嘌呤 鳥嘌呤轉(zhuǎn)移酶基因( HGPRT)選擇系統(tǒng) ?新霉素抗性基因( neo)選擇系統(tǒng) ?氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因( cat)選擇系統(tǒng) ?潮霉素抗性選擇系統(tǒng) 細胞內(nèi) DNA的合成途徑 細胞的 DNA合成有主要途徑和旁路途徑兩種方式 氫葉酸還原酶的催化下合成 DNA 鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 (HGPRT)或胸腺嘧啶激酶( TK)的催化下補救合成 DNA。 胸苷激酶 基因選擇 系統(tǒng) ?遺傳標記: TK ?編碼產(chǎn)物: 胸苷激酶 ?篩選藥物: HAT選擇法 ? H:次黃嘌呤;補救合成核苷酸的原料 ? A:氨基喋呤;抑制四氫葉酸合成 ? T:胸苷;補救合成 dTTP的原料 ?作用機理: TK是核苷酸補救合成途徑的一個關(guān)鍵酶 二氫葉酸還原酶( DHFR)
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