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正文內(nèi)容

真核轉(zhuǎn)染穩(wěn)定篩選標(biāo)記及原理(編輯修改稿)

2025-09-01 10:36 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 trp1, ura3, his3, leu2, lys2。 ?顯性選擇標(biāo)記,用于野生型酵母菌的轉(zhuǎn)染。 G418篩選。 哺乳動(dòng)物細(xì)胞 遺傳性標(biāo)記 ?胸苷激酶基因( tk)選擇系統(tǒng) ?二氫葉酸還原酶基因( dhfr)選擇系統(tǒng) ?黃嘌呤 鳥(niǎo)嘌呤轉(zhuǎn)移酶基因( HGPRT)選擇系統(tǒng) ?新霉素抗性基因( neo)選擇系統(tǒng) ?氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因( cat)選擇系統(tǒng) ?潮霉素抗性選擇系統(tǒng) 細(xì)胞內(nèi) DNA的合成途徑 細(xì)胞的 DNA合成有主要途徑和旁路途徑兩種方式 氫葉酸還原酶的催化下合成 DNA 鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 (HGPRT)或胸腺嘧啶激酶( TK)的催化下補(bǔ)救合成 DNA。 胸苷激酶 基因選擇 系統(tǒng) ?遺傳標(biāo)記: TK ?編碼產(chǎn)物: 胸苷激酶 ?篩選藥物: HAT選擇法 ? H:次黃嘌呤;補(bǔ)救合成核苷酸的原料 ? A:氨基喋呤;抑制四氫葉酸合成 ? T:胸苷;補(bǔ)救合成 dTTP的原料 ?作用機(jī)理: TK是核苷酸補(bǔ)救合成途徑的一個(gè)關(guān)鍵酶 二氫葉酸還原酶( DHFR)
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