【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 成抗原抗體復(fù)合物。加入免疫分離劑，使免疫復(fù)合物沉淀出來(lái)，離心后，抽棄上清液，用γ計(jì)數(shù)儀測(cè)量沉淀的放射性計(jì)數(shù)（cpm）。血清中的SF含量越高，試管中沉淀的cpm值越低，血清中的SF含量越低，試管中沉淀的cpm值越高，血清中的SF含量可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線反算出來(lái)。[步驟] 2小時(shí)內(nèi)分離血清,。首先對(duì)試管標(biāo)號(hào)：T（總計(jì)數(shù)），NSB（非特異結(jié)合），S0（最大結(jié)合）和S1至S6，QC（質(zhì)控品）以及U（樣本），然后按下表加樣順序操作。（單位181。l）試 管試 劑TNSBS0S1 S6QCU零標(biāo)準(zhǔn)15050標(biāo)準(zhǔn)品50質(zhì)控品50樣 本50標(biāo)記物100100100100100100抗 體100100100100搖勻后，,37℃溫育1小時(shí)分離劑500500500500500搖勻后,室溫放置15分鐘。3500rpm離心20分鐘,抽棄上清液(T管除外),測(cè)沉淀cpm。反應(yīng)類型： 放射免疫技術(shù)正常范圍：男性：: ng/mL 兒童: ng/mL [校準(zhǔn)] 使用國(guó)家質(zhì)控品進(jìn)行校準(zhǔn)。[試劑] 標(biāo)準(zhǔn)品：7瓶，S1S6濃度分別為0、80、160、3640ng/ml。125︱—標(biāo)記物：1瓶，紅色。內(nèi)含放射性強(qiáng)度小于5181。Ci的125︱—SF及NaN3等?？贵w：1瓶，藍(lán)色。含SF抗血清、穩(wěn)定劑及防腐劑等。免疫分離劑：1瓶，內(nèi)含PEG、二抗血清、NaN3等。加樣前必須搖勻。質(zhì)控品：3瓶，含低、中、高三個(gè)劑量。廠家：濰坊三維生物工程集團(tuán)有限公司。[注意事項(xiàng)] 樣本量可按比例改變。 盡快測(cè)定，否則應(yīng)冰箱冷凍。[儲(chǔ)存條件和效期]2℃8℃避光保存可穩(wěn)定至有效期。[臨床意義]缺鐵性貧血鐵蛋白明顯降低，與骨髓貯存的情況基本吻合；急性時(shí)相反應(yīng)蛋白各種感染性疾病，類風(fēng)濕性疾病，膠原性血管瘤，淋巴瘤等疾病時(shí)作為急性階段性產(chǎn)物升高；再生障礙性貧血，原發(fā)性含鐵血黃素沉積癥，惡性淋巴瘤，急慢性白血癥，重型地中海貧血等，鐵蛋白均可升高；急性白血癥病人白血病細(xì)胞鐵蛋白合成能力增高非何杰金氏病，鐵蛋白增高。[儀器出現(xiàn)故障采取的措施] 出現(xiàn)任何故障則應(yīng)上報(bào)科主任和設(shè)備科。 作相應(yīng)保養(yǎng)、檢測(cè)措施。 設(shè)備科工程師不能處理，則聯(lián)系廠家工程師：上海核福光電儀有限公司。[質(zhì)量保證措施]（1）人員要求：操作人員必須是專門進(jìn)修或培訓(xùn)過(guò)的人員，或者在專門進(jìn)修或培訓(xùn)過(guò)的人員指導(dǎo)下才能操作。（2）實(shí)驗(yàn)條件：溫度：1825℃ ，測(cè)定時(shí)溫度在177。2 ℃以內(nèi)；濕度：3070%RH。（3）儀器保養(yǎng)：表面清潔、緊固易松動(dòng)的螺絲和零件，檢查運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常，零部件是否完整。清潔內(nèi)部，檢查有無(wú)異常情況（聲音、濕度、指示燈）。（4）試劑要求：a精密度： 批內(nèi)≤6%，批間相對(duì)極差≤6%。b準(zhǔn)確度：測(cè)定質(zhì)控血清，偏差≤20%。（5）室內(nèi)、室間質(zhì)控： 開展室內(nèi)、室間質(zhì)控。（6）干擾因素糾正： 嚴(yán)重脂濁、黃疸、溶血等標(biāo)本應(yīng)建議重留標(biāo)本測(cè)試。（7）病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求： 抽血時(shí)，最好空腹、不要輸液。（8）參考資料： 來(lái)源于廠家儀器、試劑使用說(shuō)明書。第三篇作業(yè)指導(dǎo)書第十二章 放射免疫學(xué) CA125版 本第 1 版版 次第 0 次修改頁(yè) 碼第637頁(yè) 共45頁(yè)文件編號(hào)JY/FMZY/008受控狀態(tài)在 控[儀器]放射免疫γ計(jì)數(shù)器 [方法]放射免疫分析法[原理]本項(xiàng)目測(cè)試采用雙抗體夾心方法。固相單抗與標(biāo)記單抗同時(shí)與血清CA125結(jié)合，因兩種單抗結(jié)合在CA125不同位點(diǎn)上，形成三明治夾心復(fù)合物，抽棄反應(yīng)液，洗滌后測(cè)量包被試管放射性計(jì)數(shù)。血清CA125濃度與清洗后包被試管放射性成正比例關(guān)系，通過(guò)γ計(jì)數(shù)儀測(cè)定包被管的放射性。比較病人樣本與標(biāo)準(zhǔn)品的CPM值，可以獲得病人樣本的CA125濃度值。[步驟] 2小時(shí)內(nèi)分離血清,。首先對(duì)試管標(biāo)號(hào)： S0至S6，QC（質(zhì)控品）以及U（樣本），然后按下表加樣順序操作。（單位181。l） 標(biāo) 號(hào) 試 劑S0S6QCU標(biāo)準(zhǔn)品200質(zhì)控血清200樣本200抗體標(biāo)記物100100100搖勻后，2~8℃孵育20177。4小時(shí)或室溫連續(xù)振蕩2小時(shí)吸棄反應(yīng)液，用稀釋后的洗滌液洗包被管2次，每次2ml，每次洗滌后要吸干凈液體置γ計(jì)數(shù)儀上測(cè)量試管cpm反應(yīng)類型：放射免疫技術(shù)正常范圍：正常人血清值：≤35U/ml[校準(zhǔn)] 使用國(guó)家質(zhì)控品進(jìn)行校準(zhǔn)。[試劑] CA125抗體包被試管 125︱—CA125標(biāo)記物 CA125標(biāo)準(zhǔn)品：7瓶，S0S6，濃度分別為0、250、100、250、500 U/ml廠家：濰坊三維生物工程集團(tuán)有限公司。[注意事項(xiàng)] 不同批號(hào)的試劑不可混用。 試劑使用前應(yīng)先平衡至室溫，液體組分使用前輕輕搖勻，勿劇烈震蕩。每一試劑使用后，盡快放回28℃貯存。 每次樣本測(cè)定，都必須同時(shí)帶有標(biāo)準(zhǔn)品系列，各標(biāo)準(zhǔn)管應(yīng)做雙管加樣，以確保曲線的可靠性。每個(gè)樣本用一個(gè)吸頭，以避免交叉污染。 加放射性標(biāo)記物要準(zhǔn)確加至包被管底部，否則將有可能出現(xiàn)假性升高。 [儲(chǔ)存條件和效期]2℃8℃避光保存可穩(wěn)定至有效期。 [儀器出現(xiàn)故障采取的措施]出現(xiàn)任何故障則應(yīng)上報(bào)科主任和設(shè)備科。作相應(yīng)保養(yǎng)、檢測(cè)措施。設(shè)備科工程師不能處理，則聯(lián)系廠家工程師：上海核福光電儀有限公司。[質(zhì)量保證措施]（1）人員要求：操作人員必須是專門進(jìn)修或培訓(xùn)過(guò)的人員，或者在專門進(jìn)修或培訓(xùn)過(guò)的人員指導(dǎo)下才能操作。（2）實(shí)驗(yàn)條件：溫度：1825℃ ，測(cè)定時(shí)溫度在177。2 ℃以內(nèi)；濕度：3070%RH。（3）儀器保養(yǎng)：表面清潔、緊固易松動(dòng)的螺絲和零件，檢查運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常，零部件是否完整。清潔內(nèi)部，檢查有無(wú)異常情況（聲音、濕度、指示燈）。（4）試劑要求：a精密度： 批內(nèi)≤6%，批間相對(duì)極差≤6%。b準(zhǔn)確度：測(cè)定質(zhì)控血清，偏差≤20%。（5）室內(nèi)、室間質(zhì)控： 開展室內(nèi)、室間質(zhì)控。（6）干擾因素糾正： 嚴(yán)重脂濁、黃疸、溶血等標(biāo)本應(yīng)建議重留標(biāo)本測(cè)試。（7）病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求： 抽血時(shí)，最好空腹、不要輸液。（8）參考資料： 來(lái)源于廠家儀器、試劑使用說(shuō)明書。第三篇作業(yè)指導(dǎo)書第十二章 放射免疫學(xué) 前列腺特異性抗原（PSA）版 本第 1 版版 次第 0 次修改頁(yè) 碼第640頁(yè) 共45頁(yè)文件編號(hào)JY/FMZY/009受控狀態(tài)在 控[儀器]放射免疫γ計(jì)數(shù)器 [方法]放射免疫分析法[原理] 本項(xiàng)目測(cè)試應(yīng)用的是雙抗體夾心法檢測(cè)血清PSA含量，抗體是針對(duì)不同抗原決定簇的兩株單克隆抗體，標(biāo)記酶為HRP，顯色系統(tǒng)為TMB。在檢測(cè)濃度范圍內(nèi)，血清PSA含量與酶反應(yīng)顯色底物的光密度值（OD450）呈線性關(guān)系，在實(shí)驗(yàn)中，以PSA標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）為橫坐標(biāo)，其相應(yīng)的OD450值為縱坐標(biāo)，在普通坐紙上繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的PSA濃度可通過(guò)其OD450值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上相應(yīng)查出。[步驟] 2小時(shí)內(nèi)分離血清。（0、250、100ng/ml）將100181。l標(biāo)準(zhǔn)品，樣品依次加入不同反應(yīng)孔內(nèi)，加樣頭切忌混用。輕微振蕩混合30秒。放入37℃環(huán)境中溫育30分鐘。將各孔內(nèi)液體甩出，用水清洗5次（注意：用水不可過(guò)猛，每次要將各孔內(nèi)水甩凈），然后在吸水紙上拍干殘余水份。在每個(gè)反應(yīng)孔內(nèi)加入100181。l酶液。放入37℃環(huán)境中溫育30分鐘。在每個(gè)反應(yīng)孔內(nèi)加入1滴洗液，輕微振蕩混合5秒，將各孔內(nèi)液體甩出，用水清洗5次（注意：用水不可過(guò)猛，每次要將各孔內(nèi)水甩凈），然后在吸水紙上拍干殘余水份。依次在各孔內(nèi)加入1滴底物，1滴顯色劑，輕微振蕩混合5秒。顯色35分鐘（顯色時(shí)間請(qǐng)勿必準(zhǔn)確控制）。加入2滴終止液終止反應(yīng)。 測(cè)算PSA濃度。[校準(zhǔn)] 使用國(guó)家質(zhì)控品進(jìn)行校準(zhǔn)。[試劑] 包被板 酶結(jié)合物 標(biāo)準(zhǔn)品（6瓶，0100ng/ml） 洗液 底物 顯色劑 終止液 樣品稀釋液[注意事項(xiàng)] 樣本盡快測(cè)定，否則應(yīng)冰箱冷凍。[儲(chǔ)存條件和效期]2℃8℃避光保存可穩(wěn)定至有效期。[臨床意義]前列腺特異性抗原（ PSA ）是一種糖蛋白，由前列腺上皮細(xì)胞產(chǎn)生，存在于前列腺腺泡及導(dǎo)管上皮細(xì)胞胞漿中，不表達(dá)于其它組織細(xì)胞，具有極高的組織器官特異性，是目前診斷前列腺癌最敏感的指標(biāo)?？捎糜谇傲邢侔┑脑缙谠\斷，監(jiān)測(cè)治療及預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)。正常人體血清內(nèi)PSA＜4ng/ml，這個(gè)正常值有隨年齡增長(zhǎng)趨勢(shì)。＜50歲者一般低于4 ng/ml， ng/ml， ng/ml，＞ ng/ml。異常升高預(yù)示有患前列腺癌的可能，以＞4 ng/ml為臨界值，早期前列腺癌63%—70%陽(yáng)性，總陽(yáng)性率可達(dá)69%— %，有報(bào)告，只有25%確有前列腺癌，但＞ ng/ml往往又是晚期前列腺癌，失去早期治療時(shí)機(jī)，這是個(gè)急待解決的問(wèn)題。解決辦法為測(cè)定游離PSA（FPSA），在前列腺癌患者中94% PSA是結(jié)合狀態(tài)，而增生患者僅78% PSA處于結(jié)合狀態(tài)，前列腺癌同時(shí)伴有游離態(tài)水平降低，認(rèn)為 以TPSA＞4 .2 ng/ml，同時(shí)F/T＞，其敏感性為86%，特異性為99%，符 合率97%，為最佳指標(biāo)。[儀器出現(xiàn)故障采取的措施] 出現(xiàn)任何故障則應(yīng)上報(bào)科主任和設(shè)備科。 作相應(yīng)保養(yǎng)、檢測(cè)措施。 設(shè)備科工程師不能處理，則聯(lián)系廠家工程師：上海核福光電儀有限公司。[質(zhì)量保證措施]（1）人員要求：操作人員必須是專門進(jìn)修或培訓(xùn)過(guò)的人員，或者在專門進(jìn)修或培訓(xùn)過(guò)的人員指導(dǎo)下才能操作。（2）實(shí)驗(yàn)條件：溫度：1825℃ ，測(cè)定時(shí)溫度在177。2 ℃以內(nèi)；濕度：3070%RH。（3）儀器保養(yǎng)：表面清潔、緊固易松動(dòng)的螺絲和零件，檢查運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常，零部件是否完整。清潔內(nèi)部，檢查有無(wú)異常情況（聲音、濕度、指示燈）。（4）試劑要求：精密度： 批內(nèi)≤6%，批間相對(duì)極差≤6%。（5）室內(nèi)、室間質(zhì)控： 開展室內(nèi)、室間質(zhì)控。（6）干擾因素糾正： 嚴(yán)重脂濁、黃疸、溶血等標(biāo)本應(yīng)建議重留標(biāo)本測(cè)試。（7）病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求： 抽血時(shí)，最好空腹、不要輸液。（8）參考資料： 來(lái)源于廠家儀器、試劑使用說(shuō)明書。第三篇作業(yè)指導(dǎo)書第十二章 放射免疫學(xué) β絨毛膜促性激素（βHCG）版 本第 1 版版 次第 0 次修改頁(yè) 碼第643頁(yè) 共45頁(yè)文件編號(hào)JY/FMZY/010受控狀態(tài)在 控[儀器]放射免疫γ計(jì)數(shù)器 [方法]放射免疫分析法 [原理]本項(xiàng)目檢測(cè)采用抗原、標(biāo)記抗原與限量特異抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的原理，再采用第二抗體將標(biāo)記抗原與特異抗體結(jié)合的部分從未結(jié)合的標(biāo)記抗原中分離，測(cè)結(jié)合部分標(biāo)記抗原的放射活性，通過(guò)已知標(biāo)準(zhǔn)品的濃度計(jì)算待測(cè)樣品的HCGβ濃度。[步驟] 2小時(shí)內(nèi)分離血清。首先對(duì)試管標(biāo)號(hào)：T（總計(jì)數(shù)），NSB（非特異結(jié)合），S0（最大結(jié)合）和S1至S5，QC（質(zhì)控品）以及U（樣本），然后按下表加樣順序操作。（單位181。l）試 管試 劑TNSBS0S1S5QCU零標(biāo)準(zhǔn)100100標(biāo)準(zhǔn)品100質(zhì)控品100樣 本100標(biāo)記物100100100100100100抗 體100100100100充分混勻，,37℃水浴1小時(shí)分離劑500500500500500搖勻后,室溫放置15分鐘。3500rpm離心20分鐘,抽棄上清液(T管除外),測(cè)沉淀計(jì)數(shù)。反應(yīng)類型： 放射免疫技術(shù)正常范圍：正常成人＜10mIU/ml，妊娠婦女＞30 mIU/ml。[校準(zhǔn)] 使用國(guó)家質(zhì)控品進(jìn)行校準(zhǔn)。[試劑] HCGβ標(biāo)準(zhǔn)品：6瓶，S0為2ml，S1S5每瓶1ml，2℃8℃保存，在有效期內(nèi)穩(wěn)定。標(biāo)準(zhǔn)品濃度有三種表示方法，任選一種：WHO（2nd is 61/6）WHO（3rd is 75/537）ng/mlS00mIU/mL