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正文內(nèi)容

日本沼蝦卵巢表達序列標簽分析及生殖相關(guān)基因的克隆與表達(編輯修改稿)

2025-08-31 16:58 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 yclinB基因和MnCdc2基因cDNA全長分別為2318和1639bp,開放閱讀框分別編碼398和299個氨基酸的蛋白。MncyclinB具有989bp偏長的3’UTR,其中集中了包括2個多聚腺苷酸加尾信號、5個胞質(zhì)聚腺苷化元件(CPEs)、1個翻譯調(diào)控元件(TCE)和1個Kbox在內(nèi)的多種調(diào)節(jié)元件。MncyclinB蛋白具有周期蛋白B特有的破壞框、周期蛋白識別框和磷酸化位點。進一步的多序列比對和同源性分析表明日本沼蝦MncyclinB和斑節(jié)對蝦、日本囊對蝦、鋸緣青蟹、中華絨螯蟹cyclinB的同源性分別為69%、68%、60%和60%,系統(tǒng)進化分析證明MncyclinB基因在進化上高度保守。日本沼蝦周期蛋白依賴性激酶基因高度保守,和斑節(jié)對蝦、鋸緣青蟹、中華絨螯蟹Cdc2的同源性分別為92%、91%和91%。MnCdc2蛋白具有蛋白激酶特有的ATP特異結(jié)合位點、PSTAIR結(jié)構(gòu)域和絲氨酸/蘇氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶活化位點。此外,第115和161個氨基酸殘基分別是Thr1Tyr15和Thr161??臻g表達的實時熒光定量PCR分析表明,MncyclinB在卵巢中的表達量最高,此外在精巢、肌肉、肝胰腺、表皮和血液中都有較高的表達,而在腸中的表達極其微弱。MnCdc2主要在精巢、卵巢、肝胰腺和表皮內(nèi)表達,其中精巢中的表達量最高,其次是卵巢。時間表達的實時熒光定量PCR分析顯示,MncyclinB轉(zhuǎn)錄本在卵巢的發(fā)育過程中呈現(xiàn)周期性的波動:增殖期MncyclinB基因的表達量處于一相對較高的水平,卵黃發(fā)生前期有所下降,至初級卵黃發(fā)生期開始上調(diào),至成熟期上調(diào)至最高,此后急劇下降。MnCdc2基因的表達量在除次級卵黃發(fā)生期之外的其它各期都基本一致,而在次級卵黃發(fā)生期則有所上調(diào),但與其它各期相比沒有顯著差異。綜合所得的結(jié)果,日本沼蝦cyclinB的翻譯或轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)過程是通過CPEs、TCE和Kbox等復合結(jié)構(gòu)的聯(lián)合作用實施的。MncyclinB和MnCdc2蛋白的氨基酸序列高
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