動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(編輯修改稿)
2024-08-31 15:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ．試劑存放及器材整理所有分裝試劑置于4℃冰箱中保存，已備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。 注意事項(xiàng)：。盡量減少試劑在空氣中的暴露時(shí)間。，分裝瓶規(guī)格、數(shù)量應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要準(zhǔn)備。避免因包裝瓶過大、貯液時(shí)間過長或反復(fù)凍融使用造成營養(yǎng)成分丟失和微生物污染。按一次用量或一周內(nèi)用量挑選小包裝瓶。融化后的液體置4℃保存。，分裝瓶內(nèi)液體量要小于瓶容積的2／3。，包括試劑名稱、濃度、配制日期、組號(hào)。實(shí)驗(yàn)二 細(xì)胞的原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)原理：從供體獲取組織細(xì)胞的首次培養(yǎng)叫原代培養(yǎng)或初代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞離體時(shí)間短，具有二倍體遺傳性，在一定程度上能反映體內(nèi)的生長特性，很適合作藥物測(cè)試、細(xì)胞分化和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)研究。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、不同的?shí)驗(yàn)材料，解離或分離細(xì)胞的方法和條件各有不同。一般常用方法有二：一是組織塊培養(yǎng)法；二是單層細(xì)胞培養(yǎng)法。本實(shí)驗(yàn)主要采用胰蛋白酶消化法，對(duì)初生乳鼠肺組織進(jìn)行原代培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)材料：材料；4周齡新生乳鼠藥品：DMEM培養(yǎng)液，小牛血清(FCS)，%胰蛋白酶，器材：培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)皿1套/組，移液槍，剪子1把/組，鑷子2把/組，濾器，酒精燈設(shè)備：離心機(jī)、二氧化碳培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超凈工作臺(tái)、二氧化碳培養(yǎng)箱實(shí)驗(yàn)步驟： 將4周齡新生乳鼠斷髓后，將尾巴提起，鼠身浸入75％酒精的燒杯中旋轉(zhuǎn)3 s左右(默數(shù)5下)，取出放在滅菌的培養(yǎng)皿中，移入工作臺(tái)內(nèi)。小鼠仰位固定在培養(yǎng)皿上。在胸廓正中線中位處，用兩把眼科
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