動物細胞培養(yǎng)(編輯修改稿)
2024-08-31 15:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ．試劑存放及器材整理所有分裝試劑置于4℃冰箱中保存，已備后續(xù)實驗使用。 注意事項：。盡量減少試劑在空氣中的暴露時間。，分裝瓶規(guī)格、數(shù)量應(yīng)根據(jù)實驗需要準備。避免因包裝瓶過大、貯液時間過長或反復(fù)凍融使用造成營養(yǎng)成分丟失和微生物污染。按一次用量或一周內(nèi)用量挑選小包裝瓶。融化后的液體置4℃保存。，分裝瓶內(nèi)液體量要小于瓶容積的2／3。，包括試劑名稱、濃度、配制日期、組號。實驗二 細胞的原代培養(yǎng)實驗?zāi)康模簩嶒炘恚簭墓w獲取組織細胞的首次培養(yǎng)叫原代培養(yǎng)或初代細胞培養(yǎng)。原代細胞離體時間短，具有二倍體遺傳性，在一定程度上能反映體內(nèi)的生長特性，很適合作藥物測試、細胞分化和轉(zhuǎn)化等實驗研究。根據(jù)不同的實驗?zāi)康?、不同的實驗材料，解離或分離細胞的方法和條件各有不同。一般常用方法有二：一是組織塊培養(yǎng)法；二是單層細胞培養(yǎng)法。本實驗主要采用胰蛋白酶消化法，對初生乳鼠肺組織進行原代培養(yǎng)。實驗材料：材料；4周齡新生乳鼠藥品：DMEM培養(yǎng)液，小牛血清(FCS)，%胰蛋白酶，器材：培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)皿1套/組，移液槍，剪子1把/組，鑷子2把/組，濾器，酒精燈設(shè)備：離心機、二氧化碳培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超凈工作臺、二氧化碳培養(yǎng)箱實驗步驟： 將4周齡新生乳鼠斷髓后，將尾巴提起，鼠身浸入75％酒精的燒杯中旋轉(zhuǎn)3 s左右(默數(shù)5下)，取出放在滅菌的培養(yǎng)皿中，移入工作臺內(nèi)。小鼠仰位固定在培養(yǎng)皿上。在胸廓正中線中位處，用兩把眼科
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