elisa方法的基本原理和操作步驟(編輯修改稿)
2025-08-31 09:22 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ?！ 。ㄈ╅g接法測抗體 間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下： ?。?）將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結合的抗原及雜質(zhì)?！ 。?）加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結合，在洗滌過程中被洗去。 ?。?）加酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結合，從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標羊抗人IgG抗體?！ 。?）加底物顯色：顏色深度代表標本中受檢抗體的量?！ ”痉ㄖ灰鼡Q不同的固相抗原，可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體（四）競爭法 競爭法可用于測定抗原，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，因此結合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下： （1）將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。 ?。?）待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原，則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合，競爭性地占去了酶標抗原
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