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正文內(nèi)容

用正交法測(cè)定幾種因素對(duì)酶活力的影響實(shí)驗(yàn)報(bào)告(編輯修改稿)

2025-08-31 04:29 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 82493572%血紅蛋白液緩沖溶液pH7pH8pH9pH8pH9pH7pH9pH7pH837℃預(yù)溫5min50℃預(yù)溫5min60℃預(yù)溫5min酶液37℃反應(yīng)10min50℃反應(yīng)10min60℃反應(yīng)10min(1)各試管編號(hào),分別加入對(duì)應(yīng)容量的底物(2% Hb)和相應(yīng)pH值的緩沖液,混勻;(2)同溫處理的3支試管同時(shí)預(yù)溫5min;(3)各試管依序分別加入對(duì)應(yīng)容量的trypsin酶液(統(tǒng)一加樣時(shí)間間隔),混勻;(4)同溫處理的3支試管置對(duì)應(yīng)恒溫水浴中反應(yīng)10min;(5)各試管依次加入15%三氯醋酸液2ml,混勻以終止反應(yīng);(6)非酶促對(duì)照:另取一試管,先加入2%,再加15%,;(7)上述各管反應(yīng)液室溫靜置15min后過(guò)濾,取濾液待測(cè)酶活;(8)酶活測(cè)定(考馬斯亮藍(lán)法,標(biāo)準(zhǔn)曲線制備略):取試管若干支編號(hào),混勻,室溫靜置3min,以非酶促對(duì)照管為空白,于波長(zhǎng)595nm比色測(cè)定。將各管測(cè)定所得光密度值對(duì)應(yīng)填入表格,分別算出各因素一、二及三水平的試驗(yàn)結(jié)果總和Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,并分別取其平均值計(jì)算相應(yīng)的極差(各列中最大與最小值之差);比較各因素極差的大小以評(píng)估各因素對(duì)酶活的影響,并對(duì)
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